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抗杂交鳢(Channa argus×C. maculate)弹状病毒卵黄抗体制备及ELISA检测方法的建立
引用本文:刘田,李硕,汪铭书,赵立宁,黄锦炉,吴艺琳,贾爱卿.抗杂交鳢(Channa argus×C. maculate)弹状病毒卵黄抗体制备及ELISA检测方法的建立[J].海洋与湖沼,2023,54(6):1756-1765.
作者姓名:刘田  李硕  汪铭书  赵立宁  黄锦炉  吴艺琳  贾爱卿
作者单位:农业农村部微生态资源养殖利用企业重点实验室 广东广州 511400;广东海大集团股份有限公司畜牧水产研究中心 广东广州 511400;广东海大畜牧兽医研究院 广东广州 511400;四川农业大学预防兽医研究所 四川成都 611100
基金项目:年乡村振兴战略专项-农业科技发展及资源环境保护管理项目,2023KJ115号
摘    要:为确定杂交鳢(Channa argus×C. maculate)弹状病毒卵黄抗体效价水平消减规律并验证抗体对病毒的中和能力,采用杂交鳢弹状病毒灭活疫苗免疫蛋鸡,使用醋酸-醋酸钠-辛酸法制备卵黄抗体,建立间接ELISA检测方法以监测卵黄抗体产生过程抗体水平消减情况,以中和试验评估卵黄抗体中和杂交鳢弹状病毒效果。结果显示, ELISA检测方法 最佳条件为抗原包被浓度0.5×105.8 TCID50/0.1 mL, 37℃包被2 h, 37℃封闭2 h。与大口黑鲈蛙虹彩病毒卵黄抗体、SPF蛋黄提取物、免疫前蛋黄提取物以及MBC空细胞均无交叉反应。以S/N(sample/negative)>2.1且敏感性最高为标准确定阳性、阴性样品。卵黄抗体于首免后28 d产生效价,四免后达到最高水平,效价为1︰25 600,平台期可持续40~60 d,通过中和抗体检测结果证明平台期内抗体中和效价在免疫周期内最高,约为46.3。通过ELISA检测方法对卵黄抗体产生规律进行监测,通过中和检测方法评估卵黄抗体中和病毒效果。高滴度卵黄抗体具有被开发为新型抗杂交鳢弹状...

关 键 词:杂交鳢弹状病毒  卵黄抗体  间接ELISA  中和抗体
收稿时间:2023/5/18 0:00:00
修稿时间:2023/9/24 0:00:00

PREPARATION OF ANTI-HYBRID SNAKEHEAD RHABDOVIRUS IGY AND DEVELOPMENT OF INDIRECT ELISA
LIU Tian,LI Shuo,WANG Ming-Shu,ZHAO Li-Ning,HUANG Jin-Lu,WU Yi-Lin,JIA Ai-Qing.PREPARATION OF ANTI-HYBRID SNAKEHEAD RHABDOVIRUS IGY AND DEVELOPMENT OF INDIRECT ELISA[J].Oceanologia Et Limnologia Sinica,2023,54(6):1756-1765.
Authors:LIU Tian  LI Shuo  WANG Ming-Shu  ZHAO Li-Ning  HUANG Jin-Lu  WU Yi-Lin  JIA Ai-Qing
Affiliation:Key Laboratory of Microecological Resources and Utilization in Breeding Industry, Ministry of Agriculture and Rural Affairs, Guangzhou 511400, China;Animal Husbandry and Fisheries Research Center of Guangdong Haid Group Co., Ltd., Guangzhou 511400, China;Guangdong Haid Institute of Animal Husbandry and Veterinary, Guangzhou 511400, China;Institute of Preventive Veterinary Medicine, Sichuan Agricultural University, Chengdu 611100, China
Abstract:
Keywords:hybrid snakehead rhabdovirus  immunoglobulin of egg yolk (IgY)  indirect ELISA  neutralizing antibody
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