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1.
【目的】为促进长茎葡萄蕨藻（Caulerpa lentillifera）的开发利用,研究长茎葡萄蕨藻多糖的理化性质和对免疫抑制小鼠的调节作用。【方法】以海南养殖的长茎葡萄蕨藻为研究对象,采用水提醇沉和离子交换柱层析获得多糖成分,用高效凝胶渗透色谱和高效液相色谱法分析多糖分子质量和单糖组成等理化性质,并从动物水平研究多糖对免疫抑制小鼠的免疫调节和抗氧化活性。【结果与结论】长茎葡萄蕨藻粗多糖产率为5.04%,粗多糖脱蛋白后,经强阴离子交换柱层析纯化得到主要多糖组分CP0。理化性质分析表明,CP0的总糖质量分数为70%,硫酸基质量分数为11%;主要由甘露糖、半乳糖和木糖组成,比例为4.4:4.0:1.4,还含有微量的葡萄糖。表明CP0是硫酸化的木糖半乳甘露聚糖,相对分子质量为471 000。原子力显微镜显示,CP0为直径约100 nm的近球体结构。CP0对免疫抑制小鼠脾脏指数、胸腺指数有显著影响（P <0.05）,对小鼠白介素（IL2、IL4、IL10）、干扰素（IFN）、肿瘤坏死因子（TNF）、肠道分泌型免疫球蛋白A(SIgA)等6种免疫因子有显著调节作用（P <0.05）,对... 相似文献
2.
《广东海洋大学学报》2017,(4)
为制备马氏珠母贝免疫活性肽,以马氏珠母贝全脏器为原料,利用体外模拟消化的方法对其进行酶解,然后通过超滤系统收集分子量小于3 ku的酶解液。采用细胞培养方法,以体外免疫活性为指标,利用Sephadex G-25凝胶柱层析、Capto Q强阴离子交换色谱等对马氏珠母贝酶解液进行分离纯化与筛选,获得2个具有免疫活性的肽段,利用电喷雾静电场离子阱串联质谱分别对2个活性肽序列进行测定。结果表明:一个肽的相对分子质量为245.0,肽序列为Ala-Arg/Pro-Met;另一个别肽的相对分子质量为274.0,肽序列为Val-Arg。在浓度0.3 mg/m L时,2种肽能显著促进脾淋巴细胞的增殖与提高巨噬细胞的吞噬能力,表明这2种肽均具有较好的免疫活性。 相似文献
3.
【目的】探讨鳙鱼(Aristichthys nobilis)鱼鳔黏多糖的提取工艺及提取物的化学组成及抗氧化活性。【方法】采用热水浸提法和碱液浸提法提取黏多糖,用GC-MS法测定分析所提取多糖的化学组成和抗氧化活性等性质。【结果】碱液浸提法的最佳工艺条件为料液质量体积比(g/m L)1∶20、碱液质量分数1%、提取温度70℃、提取时间为4 h,在此条件下,黏多糖的提取率为5.58%;热水浸提和碱液浸提得到的鳙鱼鱼鳔黏多糖量分别为5.3%和25.33%;气质联用色谱(GC-MC)测定结果显示,热水提取的黏多糖(WANVM)主要由质量分数13.72%木糖、19.57%甘露糖、16.11%葡萄糖及32.49%半乳糖构成;碱液提取的黏多糖(AANVM)主要由质量分数50%甘露糖和34.87%半乳糖构成。在相同质量分数条件下,WANVM清除羟基自由基、DPPH自由基及总还原力均高于AANVM。【结论】碱液浸提对黏多糖的提取效果优于热水浸提,AANVM、WANVM组分不同,且前者抗氧化活性略高于后者。 相似文献
4.
《广东海洋大学学报》2020,(5)
【目的】探讨4种亨氏马尾藻岩藻聚糖的结构及其对氧化型低密度脂蛋白诱导HMVEC损伤的保护作用。【方法】以亨氏马尾藻岩藻聚糖(FD1)为原料,过Sepharose Cl-6B琼脂糖凝胶柱层析得到组分FS11,对FS11进行化学组成分析和单糖分析,测定F、FD1、FS1、FS11等4种岩藻聚糖的相对分子质量、糖链构象和红外光谱,进行结构鉴定;采用MTT法测定3种岩藻聚糖对HMVEC存活率的影响,研究4种岩藻聚糖对氧化型低密度脂蛋白诱导HMVEC损伤的保护作用。【结果】与F、FD1、FS1比,FS11硫酸基和多糖含量最高。FS11中岩藻糖含量高达52.744%;F、FD1、FS1、FS11的相对分子质量分布分别为474 576、459 032、201 285、190 049;I-KI紫外扫描和刚果红实验表明岩藻聚糖具有复杂树状分支和多股螺旋结构;红外光谱结果表明各组分均有O—H、C—H多糖特征官能团、S==O活性特征官能团;加药培养24 h,质量浓度为500μg/mL和1 000μg/mL的4种岩藻聚糖(F、FD1、FS1、FS11)均能显著减弱受氧化型低密度脂蛋白损伤的HMVEC的增殖抑制(P0.01)。【结论】尾藻岩藻聚糖对氧化型低密度脂蛋白诱导的HMVEC损伤具有保护作用。 相似文献
5.
以马氏珠母贝糖胺聚糖粗品为主要功能成分,以β-环糊精为辅料,制成珠母贝糖胺聚糖胶囊,并进行检测。结果表明:该胶囊中水分、总糖、糖胺聚糖(GAG)和粗蛋白质量分数分别为8.85%、85.23%、3.00%和3.60%;胶囊的装量差异与崩解时限均符合质量标准;胶囊制剂中细菌总数小于1000 g-1,大肠杆菌MPN小于30 g-1,霉菌和酵母菌总数小于25 g-1,符合《保健食品通用卫生要求》规定;致病菌均未检出。 相似文献
6.
溶藻弧菌asp基因在大肠杆菌中表达活性研究及条件优化 总被引：1，自引：0，他引：1
为进一步研究溶藻弧菌碱性丝氨酸蛋白酶(ASP)蛋白生物学活性和功能,将构建的pET23d-asp在大肠杆菌BL21(DE3)中表达,对表达产物进行纯化分析,并优化表达条件。结果表明:在咪唑洗脱缓冲液浓度为100 mmol/L时,表达的可溶性ASP被大量洗脱,纯化的ASP相对分子质量约为42 000,具有蛋白活性;在诱导温度28℃、异丙基-β-D硫代半乳糖苷(Isopropyl-β-D-thiogalactopyranoside,IPTG)浓度1 mmol/L及诱导时间16 h时,表达的活性ASP蛋白最多。 相似文献
7.
【目的】研究源自海南红树林植物角果木(Ceriops tagal)内生真菌Endomelanconiopsis endophytica的次级代谢产物及其体外生物活性。【方法】利用正相硅胶柱层析、反相ODS柱层析、Sephadex LH-20凝胶柱层析、半制备高效液相色谱等色谱分离方法,对该菌发酵产物的乙酸乙酯浸膏的次级代谢产物进行分离纯化;综合利用核磁共振波谱(NMR)、质谱(MS)等波谱学技术以及与文献数据比对,鉴定化合物的结构;并对化合物进行体外细胞毒活性和免疫抑制活性评价。【结果】从内生真菌Endomelanconiopsis endophytica中分离得到9个化合物,其结构分别鉴定为(4E,8E)-2-N-(2-hydroxypalmitoyl)-1-O-(β-D-glucopyranosyl)-9-methyl-4,8-sphingadienine(Ⅰ)、2-(1-hydroxyethyl)quinazolin-4(3H)-one(Ⅱ)、uridine(Ⅲ)、citreoisocoumarinol(Ⅳ)、5-hydroxymellein(Ⅴ)、roccellatol(Ⅵ)、... 相似文献
8.
《广东海洋大学学报》2017,(3)
采用超声波辅助水提法制得张氏马尾藻(Sargassum zhangii)粗多糖,用无水乙醇、丙酮、乙醚脱脂,Sevage法脱蛋白,得到张氏马尾藻初级纯化的多糖(ZSP),分析ZSP化学组成,模拟人体胃肠道pH环境,测定ZSP对胆固醇胶束中胆固醇的抑制作用及结合胆酸盐活性;采用MTT法观察ZSP对HepG2细胞生长影响,并研究ZSP浓度和作用时间对HepG2细胞内胆固醇水平影响。结果表明,在模拟人体胃肠道pH环境中,ZSP对胶束中胆固醇的抑制率高达18.74%,与牛磺胆酸钠、胆酸钠及甘氨胆酸钠的结合率分别高达57.69%、64.72%、69.03%;在48 h内,100、200、400、800、1 600μg/mL的ZSP对HepG2细胞的生长均无抑制作用;100、200、400、800μg/mL的ZSP在48 h内均可降低HepG2细胞内胆固醇水平,降低程度与外源性ZSP浓度和作用时间相关。ZSP具有良好的降胆固醇活性。 相似文献
9.
通过盐析、离子交换、凝胶过滤和疏水层析等分离纯化,同步进行抗血管生成和抗肿瘤生长检测,从赤魟(Dasyatis akajei)组织获得强抗血管生成成分福安肽-03(Fuantai-03,FAT-03)的纯品(纯度>95%);使用Edman降解法测定FAT-03 N-末端氨基酸组成和序列,RACE系统技术解析FAT-03的一级结构。结果表明:FAT-03明显抑制鸡胚绒毛尿囊膜血管生成和BALB/c裸小鼠Lewis肺癌的生长及肝转移,且其效果与剂量相关。FAT-03分子的一级结构即其氨基酸组成和序列已被确定。 相似文献
10.
《广东海洋大学学报》2020,(4)
【目的】从凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei)中分离纯化多酚氧化酶(Polyphenol Oxidase,PPO),进行质谱鉴定,分析其生物学信息。【方法】采用硫酸铵沉淀结合柱层析法从虾头胸部中提取纯化PPO,电泳法确定其分子质量,采用液相质谱联用法分析氨基酸序列结构,根据分析结果,同源建模并进行评估。【结果与结论】获得了高纯度的PPO,其纯化倍数为65.7,酶比活力达650.1 U/mg蛋白,得率为29.5%。PPO分子质量约为72 ku。经质谱检测分析和basic local alignment search tool(BLAST)序列比对,纯化蛋白与凡纳滨对虾酚氧化酶原的氨基酸序列相似性为65%,匹配度分值为11 321,确认为PPO。PPO是一种亲水性大于疏水性的两性蛋白,二级结构以α-螺旋和无规则卷曲为主,建立的PPO三维结构模型可靠性较高。 相似文献
11.
在内陆干旱区,作为重要饮用水源的地下水常面临氟含量超标问题。查明内陆干旱区高氟地下水的分布规律,了解氟在地下水中的富集过程及其影响因素,既可丰富高氟地下水的研究体系,也是保证内陆干旱区饮水安全的重要基础。以新疆阿克苏地区典型山前洪积扇——依格齐艾肯河-喀拉玉尔滚河河间地带为研究区,基于水文地球化学调查结果,刻画了高氟地下水的分布区;结合氟离子含量与特征性水化学指标间的关系,揭示了高氟地下水的成因机制。结果表明:①地下水中氟含量的变化范围为0.8~6.1 mg/L,83%的水样氟含量超过《生活饮用水卫生标准》（GB 5749-2006）规定的上限（1.0 mg/L）;②总体上,氟含量沿地下水流动路径逐渐增大,低氟地下水（ρ（F-）≤1.0 mg/L）分布在国道314以北的补给区,高氟地下水（ρ（F-）>1.0 mg/L）分布在国道314以南的径流区和排泄区;③高氟地下水的水化学类型以Cl·HCO3-Na型为主,而低氟地下水则以Cl·SO4-Na型为主,高氟地下水相比于低氟地下水优势阴离子偏向于HCO3-;④地下水的pH值范围为7.9~8.9（均值为8.4）,表明其处于弱碱环境中。地下水中ρ（F-）与pH值呈正相关,此外构成浅层含水层的上更新统沉积物中含有黑云母、氟磷灰石等矿物,其表面存在一定数量的可交换F-,这表明水中OH-与矿物表面F-间的阴离子交换可能对氟的富集有一定贡献;⑤地下水的F-含量与Ca2+含量呈负相关,即高氟地下水中ρ（Ca2+）小于低氟地下水。考虑到氟化钙（CaF2）是自然界中的主要含氟矿物,也是地下水中氟的主要来源,ρ（F-）与ρ（Ca2+）间的这种负相关指示着高氟地下水中可能存在去Ca2+、Mg2+作用,如阳离子交替吸附或碳酸盐岩沉淀等。研究区地下水样中ρ（F-）与ρ（Mg2+）间也呈负相关关系,且和ρ（F-）与ρ（Ca2+）间的关系高度相似,也佐证了高氟地下水中去Ca2+、Mg2+作用的存在;⑥绝大部分地下水样品都位于氯碱性指数图的负值区域,且ρ（F-）与CAI-1和CAI-2均呈较好负相关,CAI-1和CAI-2都随ρ（F-）的增大而减小,这表明高氟地下水中存在Ca2+、Mg2+与Na+间更强的交换作用,对氟富集起着重要作用。地下水中ρ（F-）与SAR间呈较好正相关关系,且高氟地下水样的SAR均值（5.71）远大于低氟地下水SAR均值（1.67）,这也进一步证明高氟地下水中的Ca2+、Mg2+与含水介质的Na+间存在强烈的交替作用,对氟的富集起着重要作用;⑦所有地下水样中的萤石均处于未饱和状态,且萤石的饱和指数（SI）与F-含量间呈现较好的正相关,这表明地下水对含氟矿物（主要是萤石）的持续溶解应是导致研究区地下水中氟富集的主要原因。与之相反,研究区所有地下水样中的方解石均处于过饱和状态（SI>0）。这表明CaCO3的沉淀可能促进了CaF2的溶解,导致地下水中氟离子质量浓度增高;⑧研究区低氟地下水的δ18O值介于-11.20‰~-10.67‰间,平均值为-10.94‰,而高氟地下水的δ18O值介于-11.65‰~-11.21‰间,平均值为-11.49‰,即低氟地下水较高氟地下水富集δ18O。此外,F-质量浓度较低（ρ（F-）≤3.0 mg/L）的地下水样中δ18O值与F-质量浓度呈负相关,即低氟地下水具有更正的δ18O值;F-质量浓度较高（ρ（F-）≥4.8 mg/L）的地下水样中δ18O值与F-质量浓度的相关性不显著,随F-质量浓度的增高,δ18O值基本维持不变。以上表明蒸发浓缩作用对地下水中氟的富集贡献较小;⑨研究区地下水中ρ（F-）/ρ（Cl-）比值与ρ（F-）间呈现正相关,即ρ（F-）/ρ（Cl-）比值随ρ（F-）增高呈增大趋势,这也说明地下水中氟富集的主要原因是含氟矿物的溶解,而不是蒸发浓缩作用。此外,Gibbs图也提供了证据:研究区地下水样基本处于水岩作用主导区域,表明地下水化学特征（包括氟的富集）主要受水岩作用控制,蒸发浓缩影响很小。总之,地下水中氟的富集主要由溶解作用引起,OH-与矿物表面F-间的交换也有贡献,但蒸发浓缩作用影响微弱。含氟矿物持续溶解的驱动机制是阳离子交替吸附（地下水中Ca2+与岩土颗粒表面Na+之间）及方解石沉淀所引起的地下水中Ca2+的衰减。 相似文献
12.
【目的】以2株海洋真菌为研究对象,探究不同种类及浓度的化学表观遗传修饰剂对其次级代谢产物化学多样性和生物活性的影响。【方法】基于化学表观遗传修饰策略,采用两种不同的化学表观遗传修饰剂5-氮杂胞嘧啶核苷(5-azaC)和丁酸钠,分别对Penicillium sp.019和Aspergillus terreus ZN4-5-4两株海洋来源真菌进行表观遗传修饰。通过观察真菌在培养基中的生长状态变化,并根据薄层层析(TLC)指纹图谱、高效液相色谱(HPLC)图谱、乙酰胆碱酯酶(AChE)抑制、1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(1,1-Diphenyl-2-picryl-hydrazyl,DPPH)自由基清除和卤虫致死活性筛选模型等技术手段,从中筛选出代谢产物丰富、AChE抑制活性与抗氧化活性产物丰富且毒性小的发酵培养条件。【结果】添加1 mmol/mL的丁酸钠诱导剂可使菌株019和ZN4-5-4的次生代谢产物的种类增加,且同时能提高该菌株次级代谢产物的AChE的抑制活性和DPPH自由基清除活性。因此,确定菌株019和ZN4-5-4的最优发酵条件均是添加浓度为1 mmol/mL丁酸钠的PDB培养基。【结论】化学表观遗传修饰策略指导下,添加诱导剂5-azaC或者丁酸钠对2株海洋真菌次生代谢产物的产生有影响。 相似文献
13.
This study examined levels of polycyclic aromatic hydrocarbons (PAHs) in estuarine sediments in Licun (Qingdao, China) by gas chromatography under optimized conditions for sample pretreatment via ultrasonic extraction, column chromatography, and thin layer chromatography. Methanol and dichloromethane (DCM)/methanol (2:1, v/v) were used in ultrasonic extraction, and DCM was used as eluate for column chromatography. The developing system consisted of n-hexane and DCM at a ratio of 9:1 (v/v), with DCM as the extraction solvent for PAHs-containing silica gel scraped off the plate. When the spiking level is 100 ng, total recoveries of spiked matrices for four target PAHs (phenanthrene, anthracene, pyrene and chrysene) were 83.7%, 76.4%, 85.8%, and 88.7%, respectively, with relative standard deviation (RSD) between 5.0% and 6.5% (n = 4). When the spiking level is 1000 ng, associated total recoveries were 78.6%, 72.7%, 82.7% and 85.3%, respectively, with RSD between 4.4% and 5.3% (n = 4). The opti-mized method was advantageous for determination of PAHs in complex matrix due to its effective sample purification. 相似文献
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INTRODUCTIoNGlyOProtein'sroleinthevedousbioactivitiesofcelllifewasPaldcloseattentiontoinrecentyearsWhenanuInberofantitUInractiveglycoproteinswerefoundinsuccessionintheInarinemolusca(driS-etal-,l985;kisugiJ-etal.,1989).Thehighan-titumoractivityoftheglycoproteinfromPatinOPectenyeSSoensisofJaPaninterestedPharma-cologists(~S.etal.9l987).TheadductorofChamy(forecten)farmri,acultivatedshellfishdistributedrnaidealongthenorthemcoastofChina,isValuableandtastymdrineproductverypoPulartoman.T… 相似文献
15.
After being degreased with acetone, the female gonad ofChlamys (Azumapecten) farreri was extracted with water, and then subjected to DEAE—cellulose column chromatography and purified by Sephadex G-100 chromatography
to obtain a pure female gonad glycoprotein (FGGP). The IR spectra, electrophoresis and chemical analysis of FGGP indicated
that it was a kind of acid glycoprotein and that the content of total protein and sugar were 54.8% and 40%, respectively.
Pharmacological tests showed that FGGP could inhibit (inhibition rate of 40.87%) the growth of Sarcoma 180 of mice. 相似文献
16.
Prepared in this experiment were six groups of diets, i.e. VC0, VC1, VC2, VC3, VC4 and VC5 with the contents of vitamin C (VCmg(100g)-1 diet) of 0, 100, 200, 400, 800, and 1200 respectively. It was found that vitamin C increased the concentrations of immunoglobulin-like (IgG-like, IgA-like and IgM-like) substances in the serum of Penaeus chinensis after a feeding period of 3 weeks. The differences among groups were significant (P＜ 0.01), but there was no difference in the contents of complement3-1ike and complement4-1ike substances in the serum (P ＞0.05). Phenoloxidase (PO) activity in the serum of VC3 group shrimps was higher than that of VC0 and other groups, but no significant difference was observed between VC0 group and other groups. Furthermore, bactericidal activity of the serum to Vibrio parahaemolyticus in shrimps fed with the VC1 diet was higher than that in the other groups (P＜ 0.01), while no difference was demonstrated among all groups for the bactericidal activity to Vibrio alginolyticus (P ＞0.05). It is, therefore, suggested that vitamin C (100-400 mg(100 g) -1 diets) could be used as an immunostimulant of P. chinensis. 相似文献
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为了明晰张家口坝下地区高氟地下水的成因，探究其对当地居民饮用水安全的潜在影响，采集了391组潜水样品（井深≤ 100 m），通过水化学分析法、图解法、离子比例法、饱和指数计算法等对高氟地下水的分布与成因进行了分析，并利用美国EPA非致癌健康风险评价模型对四类受体人群进行健康风险评价。结果表明，研究区高氟地下水（ρ（F-）>1.5 mg/L）主要分布在地势低洼、高氟岩浆岩下游的山前地带、封闭式小盆地、沿河两侧的径流滞缓区等地区，其主要机制主要包括矿物风化溶解作用、碱性环境下的晶格置换作用和阳离子交换作用；盐效应会影响研究区地下水中F-富集，但不是高氟地下水的主要成因；农业活动与地下水中F-的富集无关。此外，坝下地区分布的电厂、钢铁厂等是永定河水系的潜在污染源，对高氟地下水形成的影响不容忽视。研究区婴儿、儿童、成年男性和成年女性的平均健康风险指数依次为1.20，0.74，0.69，0.56，呈现出受体年龄越小，风险越高；女性对含氟地下水的抗风险能力优于男性的特征。建议针对高风险区发展多水源联合供水模式，提升退氟改水工程效率，保障区域供水安全。 相似文献
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Growth and feed efficiency of juvenile shrimp Litopenaeus vannamei fed formulated diets containing different levels of poultry by-product meal 总被引：1，自引：0，他引：1
This feeding trial was conducted to evaluate the potential of poultry by-product meal (PBM) as a protein source in the culture ofLitopenaeus vannamei. Seven isonitrogenous and isoenergetic diets were formulated to near to commercial diet with about 40% protein and 7.5% lipid. Fish meal was replaced by 0, 30%, 40%, 50%, 60%, 70% and 100% of PBM (diets 1-7). The diet with 100% fish meal was used as a control (diet 1). Post-larvae were reared in an indoor semi-closed re-circulating system. Each dietary treatment was tested in 4 replicate tanks (260 L) of 40 shrimp, arranged in a completely randomized design. The shrimps were hand-fed for three times a day to near-satiation (0700, 1200 and 1800) for 60d. Percentage weight gain, survival, feed conversion ratio (FCR), protein efficiency ratio (PER) and body composition of shrimps were measured. There were no significant differences (P>0.05) in growth performance among shrimps fed diets 1-5 (0-60% fish meal replacement). However, shrimps fed diet 7 (100% fish meal replacement) had significantly lower (P<0.05) growth than those fed diets 1-5 (0-60% fish meal replacement). Shrimp fed diets 2-4 (30%-50% fish meal replacement) showed significantly higher growth than those fed diets 6 and 7 (70% and 100% fish meal replacement, respectively). Survival ranged from 94.7% to 100.0% and did not differ significantly (P>0.05) among different experimental diets. No differences in body composition were found among shrimps fed different diets. These results showed that up to 70% of fish meal protein can be replaced by PBM without adversely affecting the growth, survival, FCR, PER and body composition of Litopenaeus vannamei. 相似文献
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煤矸石回填地基的环境效应研究 总被引：1，自引：0，他引：1
为了弄清楚煤矸石回填地基对复垦区的环境效应,以开滦矿区吕家坨复垦新村为例,介绍了地基回填煤矸石工艺,分析了煤矸石化学成分及其含量;采用室内淋溶实验,对pH、总硬度(CaCO3)、F-、SO2-4、Pb、Cd和Cr6+浓度等地下水环境质量指标进行分析,探讨了煤矸石回填地基对水环境的影响;讨论了煤矸石回填地基对大气质量的影响;参照《城市放射性废物管理办法》规定,评价了回填地基煤矸石的放射性对人体健康的危害.结果表明:通过现场振动压实试验确定了回填地基分层充填、分层振动压实参数及碾压趟数,确定按照煤矸石与土体积之比5∶2进行回填,若回填一层厚500 mm煤矸石,则要回填一层厚200 mm粉煤灰或土,地表覆土厚度确定为0.5m;煤矸石中SiO2和Al2O3含量较高,属基性岩类,同时煤矸石含有炭、铝和CaO等物质,易发生水解和风化等现象;地基分层回填压实的复垦工艺减少了煤矸石中有害物质的释放量,降低了污染物的迁移速度,不会对水环境造成污染;地基回填煤矸石也显著减少粉尘和有害气体的排放量,降低对大气的污染;研究区煤矸石不属于放射性废物,不会影响人体健康,可作为建筑材料使用. 相似文献
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《中国海洋湖沼学报》2017,(4)
In this study,we established a comprehensive method for simultaneous identification and quantification of tetrodotoxin(TTX) in fresh pufferfish tissues and pufferfish-based products using liquid chromatography/quadrupole-linear ion trap mass spectrometry(LC-QqLIT-MS).TTX was extracted by 1% acetic acid-methanol,and most of the lipids were then removed by freezing lipid precipitation,followed by purification and concentration using irnmunoaffinity columns(IACs).Matrix effects were substantially reduced due to the high specificity of the IACs,and thus,background interference was avoided.Quantitation analysis was therefore performed using an external calibration curve with standards prepared in mobile phase.The method was evaluated by fortifying samples at 1,10,and 100 ng/g,respectively,and the recoveries ranged from 75.8%-107%,with a relative standard deviation of less than 15%.The TTX calibration curves were linear over the range of 1-1 000 ng/L,with a detection limit of 0.3 ng/g and a quantification limit of 1 ng/g.Using this method,samples can be further analyzed using an informationdependent acquisition(IDA) experiment,in the positive mode,from a single liquid chromatography-tandem mass spectrometry injection,which can provide an extra level of confirmation by matching the full product ion spectra acquired for a standard sample with those from an enhanced product ion(EPI) library.The scheduled multiple reaction monitoring method enabled TTX to be screened for,and TTX was positively identified using the IDA and EPI spectra.This method was successfully applied to analyze a total of 206 samples of fresh pufferfish tissues and pufferfish-based products.The results from this study show that the proposed method can be used to quantify and identify TTX in a single run with excellent sensitivity and reproducibility,and is suitable for the analysis of complex matrix pufferfish samples. 相似文献