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相似文献
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1.
乙二醇对长毛对虾酸性磷酸酶活力与构象的影响   总被引:4,自引:0,他引:4  
应用荧光光谱、紫外差示光谱及园二色性光谱等生物物理技术研究长毛对虾酸性磷酸酶经乙二醇微扰后的分子构象变化情况,结果表明乙二醇对酶分子构象有显著的影响。酶的内源荧光强度随乙二醇浓度增大而增强,Tyr、Trp残基的微环境发生明显的变化;紫外差示光谱在220和275nm出现2个负峰,而236nm出现正峰,220和236nm的差吸收与酶分子主链去折叠有关,而275nm主要与Trp残在微环境变化有关;乙二醇  相似文献   

2.
N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(EC3.2.1.52,NAGase)是几丁质酶系的主要组成分之一,节肢动物周期性脱皮生理和生长发育与NAGase密切相关。为了探讨有机溶剂对中国鲎(Tachypleus tridentatus)NAGase的影响,从中国鲎内脏分离提取了NAGase,研究甲醇、乙醇、正丙醇、正丁醇、乙二醇、丙三醇、甲醛和丙酮等8种有机溶剂对中国鲎NAGase的影响;利用酶抑制作用动力学方法,研究丙酮对NAGase的抑制机理和抑制作用类型。结果表明:甲醇对中国鲎NAGase有激活作用,乙醇、正丙醇、正丁醇、甲醛和丙酮对该酶均有不同程度的抑制作用;乙二醇和丙三醇对NAGase表现为低浓度下呈激活现象,随浓度增大则转为对酶的抑制作用;丙酮对中国鲎NAGase的抑制有剂量效应关系,0.1 mol/L丙酮可使酶活力丧失49.53%;丙酮对中国鲎NAGase的抑制作用是个可逆过程;动力学研究显示,该酶抑制作用类型属于混合型。丙酮对游离酶(E)的抑制常数KI和对酶-底物络合物(ES)的抑制常数KIS分别为0.117和0.608 mol/L,KI相似文献   

3.
SDS变性剂对杂色鲍碱性磷酸酶的活力与构象的影响   总被引:3,自引:0,他引:3  
以十二烷基磺酸钠(SDS)为变性剂,研究其对杂色鲍碱性磷酸酶(ALP)活力的影响,结果表明酶的剩余活力随着SDS浓度增高而下降,但当下降到67%时,随着SDS浓度增高,酶活力几乎不再发生明显变化.这说明杂色鲍ALP对SDS具有高度的耐受性.研究SDS对杂色鲍ALP的pH稳定性的影响,发现该酶的pH稳定性区域由5.9-10.0区域漂移到7.6~10.6区域,显示酶的pH稳定性往碱性区域偏移.进一步以荧光和紫外光谱为监测手段,研究杂色鲍ALP经SDS微扰后的分子构象变化情况.其结果表明随着SDS浓度增高,荧光发射强度逐渐发生变化,但发射峰未发生明显变化;紫外吸收强度发生变化,但吸收峰也未发生明显变化.这说明该酶活性中心对SDS变性剂并不敏感.这在以往文献中未见过报道.  相似文献   

4.
锯缘青蟹NAGase在DMSO溶液中的失活动力学   总被引:3,自引:1,他引:3  
以二甲亚砜(DMSO)为效应物,研究其对锯缘青蟹N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAGase)活力的影响,结果表明,酶的剩余活力随着DMSO浓度增高而迅速下降,当DMSO浓度达4.0moL/dm^3时,酶活力几乎完全丧失,该酶在低于2mol/dm^3的DMSO溶液中的失活作用表现为可逆过程,导致酶活力丧失50%的DMSO浓度(IC50)为0.75mol/dm^3应用酶失活过程的底物反应动力学方法测定了游离酶(E)和酶-底物络合物(ES)在不同浓度DMSO溶液中的微观失活速度常数k+0和k’+0,k+0明显大于k’+0,说明游离酶较酶-底物络合物对DMSO更为敏感,底物对酶被DMSO失活有保护作用.随着DMSO浓度增加,逆向微观复活速度常数k-0不断下降,这说明NAGase在高浓度DMSO中失活的可逆性减弱。  相似文献   

5.
本文报告了文昌鱼酸性磷酸酯酶在不同浓度的盐酸胍作用下酶的构象与催化活力变化的关系。盐酸胍浓度在1mol/dm~3时,酶活力提高50%.随着盐酸胍浓度提高(2~4mol/dm~3),酶活力下降,荧光强度也下降,荧光发射光谱λ_(max)值明显红移(330~358nm)。测其变性及失活动力学常数,结果表明,酶的失活速度大于变性速度,表现为慢构象变化、快活力变化的一种模式。在盐酸胍3~4mol/dm~3时,酶的变性与失活过程表现为两个一级反应过程(快相和慢相),其构象与催化活力的变化表明AC-Pase 与活力部位相关的色氨酸残基微环境产生了变化。  相似文献   

6.
报道了杂色鲍碱性磷酸酶(ALP)在甲醇、乙醇、丙醇、甲醛、丙酮等溶液中的失 活动力学.结果表明:酶的剩余活力随着有机溶剂浓度的增大而迅速下降.测得上述 5种有机溶剂对该酶的半抑制率(IC50)分别为5.41、3.07、1.80、31.0×10-3、2.30 mol/dm3.在这些有机溶剂溶液中酶的失活过程都是可逆反应.检测醇、醛、酮对该酶 的失活作用机理,结果表明甲醇、乙醇、丙醇对杂色鲍ALP的失活作用均为非竞争性 机制,其抑制常数分别为5.36、3.02、1.80mol/dm3.甲醛、丙酮对杂色鲍ALP的失活 作用都呈现为混合型抑制,其对游离酶的抑制常数(K1)分别为24.7×10-3、1.66 mol/dm3;对酶-底物络合物的抑制常数(KIS)分别为56.2×10-3、5.40mol/dm3.  相似文献   

7.
褐牙鲆鳃丝Na+-K+-ATPase性质的研究   总被引:3,自引:0,他引:3  
研究了褐牙鲆 (Paralichthysolivaceus)鳃丝Na K ATPase的性质。结果表明 :褐牙鲆鳃丝Na K ATPase活力随着反应温度、pH的增加均呈现峰值变化 ,其最适反应温度为 3 0~ 3 5℃ ,高于 40℃酶活力急剧下降 ,至 5 0℃酶失活 ,而最适pH为 7.5~ 8.0之间 ,pH <7.5或 >8.0时酶活力急剧下降 ,低于 6.0酶活则被完全抑制 ;在本试验设计的反应时间和底物浓度范围内 ,随着时间和底物浓度的增大 ,酶活力的变化均为逐渐升高 ,且上升趋势逐渐变缓 ;反应介质中Na ,K ,Mg2 的最适浓度分别为 180 ,3 0 ,6mmol/L ,并且当K 或Mg2 浓度为 0时 ,酶活力均接近于 0。抑制剂乌本苷对鳃丝Na K ATPase活力表现为显著性抑制 ,在乌本苷浓度为 2mmol/L时 ,酶活力完全被抑制。  相似文献   

8.
长毛对虾酸性磷酸酶功能基因的研究(I)   总被引:4,自引:3,他引:4  
采用某些化学修饰剂修饰长毛对虾酸性磷酸酶的活性功能基因。结果表明,精氨酸残基、组氨酸残基、赖氨酸残基是酶活性功能基团,当酶活力下降时,伴随着紫外吸收光谱及荧光发射光谱的变化,显示酶活力与构象密切相关。健康虾酶对修饰剂的敏感性大于病虾酶。  相似文献   

9.
采用某些化学修饰剂修饰长毛对虾(Penaeuspenicillatus)酸性磷酸酶的活性功能基团。结果表明,精氨酸残基、组氨酸残基、赖氨酸残基是酶活性功能基团,当酶活力下降时,伴随着紫外吸收光谱及荧光发射光谱的变化,显示酶活力与构系密切相关健康虾酶对修饰剂的敏感性大于病虾酶。  相似文献   

10.
研究了几种抗菌类药物对锯缘青蟹(Scylla serrata)N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(简称NAGase,EC 3.2.1.52)活力的影响.其结果表明:链霉素、卡那霉素、青霉素钾、庆大霉素和磺胺嘧啶对该酶活力均没有明显的影响.头孢拉定对该酶有显著的激活作用,当其浓度为4.5mg/cm^3时,可使酶活力提高200%.而氟哌酸和恩诺沙星对该酶均有抑制作用,其中恩诺沙星对该酶的抑制作用较强,随着抑制剂浓度增大,酶活力呈指数下降,导致酶活力下降50%的抑制剂浓度(IC50)为0.44mg/cm^3.恩诺沙星对该酶的抑制作用类型表现为非竞争性可逆过程,抑制常数KI为0.35mg/cm^3.该研究对锯缘青蟹的人工养殖具有一定的参考价值.  相似文献   

11.
乙醇对文昌鱼酸性磷酸酶活力与构象的影响   总被引:1,自引:0,他引:1  
薛雄志  符乃阳 《台湾海峡》1996,15(3):275-279
文昌鱼酸性磷酸酶是一种含有铁离子的金属酶,酶的紫外-可见光谱扫描,280nm,500nm有最大吸收峰,320nm有肩峰。荧光扫描:在281nm激发下,330nm有发射峰,在480nm激发下,515nm有一发射峰。  相似文献   

12.
珠江口水体叶绿素荧光特性研究   总被引:3,自引:0,他引:3  
利用2003年1月和2004年1月珠江口实测的遥感反射率和叶绿素浓度,建立了基于实测1nm带宽及其模拟MERIS遥感反射率数据的叶绿素荧光特征与叶绿素浓度之间的拟合关系。基于实测1nm带宽遥感反射率光谱,叶绿素荧光峰的位置和高度分别与叶绿素浓度之间存在良好的线性关系和指数关系;基于模拟MERIS遥感反射率数据,叶绿素荧光峰的高度与叶绿素浓度之间存在良好的线性关系,叶绿素荧光峰位置与叶绿素浓度之间不存在明显的相关关系,但可作为叶绿素浓度数量级的有效探针。利用2006年5月和8月的珠江口实测遥感反射率和叶绿素浓度对拟合结果进行了检验,结果表明其精度较高,说明叶绿素荧光特征在探测叶绿素浓度时效果良好且MERIS数据在近岸二类水体叶绿素浓度反演、水质监测等方面有着良好的应用前景。  相似文献   

13.
条斑紫菜的R-藻红蛋白在pH:5.8—8.4的几种缓冲液中保存,经过大约4个星期,其吸收光谱由原有的双峰型转变为三峰型;在pH=8.4的聚丙烯酰胺梯度凝胶电泳后或在微量四甲基乙二胺作用下发生了同样的变化。但在变性剂SDS或尿素存在下,吸收光谱中540nm和565nm的峰强度比逐渐改变,直至565nm吸收峰消失,始终没有从双峰型转变为三峰型的迹象。显然,条斑紫菜R-藻红蛋白吸收光谱类型的转变不是变性引起的。  相似文献   

14.
为了提取和鉴定长牡蛎(Crassostrea gigas)贝壳与外套膜中的黑色物质,选取贝壳与外套膜颜色均为黑色的长牡蛎,将贝壳及外套膜进行粉碎、盐酸水解、水浴加热、乙醚抽脂,从3份贝壳中提取出3份黑色固体物质,从3份外套膜中提取出3份黑色固体物质,将提取的黑色固体溶解于0.01m L/L氢氧化钠水溶液中,在150—500 nm的范围内测定紫外吸收光谱,发现其最大吸收峰在210 nm左右,随着波长增加,其吸光值迅速大幅度下降,与公认的黑色素紫外吸收光谱特征一致,从而首次确定长牡蛎贝壳与外套膜中的黑色物质为黑色素。  相似文献   

15.
赤潮水体红光波段反射光谱中"荧光峰"的红移现象一直备受研究者的广泛关注。本文基于前向辐射传输模型,通过2011年7月9日在大连湾海域实测的赤潮水体吸收系数和后向散射系数模拟了弹性散射作用下的反射光谱,发现在未考虑叶绿素荧光的情况下,红光波段仍存在显著的反射峰,且随叶绿素浓度的增加,反射峰出现红移现象;加入叶绿素荧光后,模拟光谱红光波段反射峰的位置与高度出现不同程度的改变,与实测光谱的更接近;对比模拟光谱与实测光谱可确定,红光波段的反射峰由吸收、后向散射以及叶绿素荧光共同控制,而文献中通常提到的"荧光峰"红移实由浮游藻类红光波段的强吸收作用导致,与叶绿素荧光无关,因此反射峰红移的说法更为合理。  相似文献   

16.
Chromophoric dissolved organic matter (CDOM) is the major light absorber in the Baltic Sea. In this study, excitation emission matrix (EEM) fluorescence spectra and UV–visible absorption spectra of CDOM are reported as a function of salinity. Samples from different locations and over different seasons were collected during four cruises in 2002 and 2003 in the Baltic Sea in both Pomeranian Bay and the Gulf of Gdansk. Absorption by CDOM decreased with increased distance from the riverine source and reached a relatively stable absorption background in the open sea. Regression analysis showed that fluorescence intensity was linearly related to absorption by CDOM at 375 nm and aCDOM(375) absorption coefficients were inversely related to salinity. Analysis of CDOM-EEM spectra indicated that a change in composition of CDOM occurred along the salinity gradient in the Baltic Sea. Analysis of percent contribution of respective fluorophore groups to the total intensity of EEM spectra indicated that the fluorescence peaks associated with terrestrial humic components of the CDOM and total integrated fluorescence decreased with decreasing CDOM absorption. In contrast, the protein-like fraction of CDOM decreased to a lesser degree than the others. Analysis of the percent contribution of fluorescence peak intensities to the total fluorescence along the salinity gradient showed that the contribution of protein-like fluorophores increased from 2.6% to 5.1% in the high-salinity region of the transect. Fluorescence and absorption changes observed in the Baltic Sea were similar to those observed in similar transects that have been sampled elsewhere, e.g. in European estuaries, Gulf of Mexico, Mid-Atlantic Bight and the Cape Fear River plume in the South Atlantic Bight, although the changes in the Baltic Sea occurred over a much smaller salinity gradient.  相似文献   

17.
Vertical changes of phytoplankton absorption spectra along 175°E from 48°N to 15°S were examined during spring 1994. The absorption spectra were analyzed using three different approaches; averaging the spectra within same oceanic areas, EOF analysis, and multiple regression analysis. Average spectra showed differences in five oceanic areas; subarctic, Kuroshio, subtropical surface, equatorial surface, and subtropical and equatorial subsurface areas. The distributions of the EOF mode of the variance of absorption spectra and of the pigments estimated by the multiple regression analysis indicated consistent differences of the spectra between those areas. Kuroshio water contains highest chlorophyll a concentrations and low chlorophyll-a-specific absorption spectra, and this may be caused by the package effect with large phytoplankton cell and by low concentrations of photo-protected carotenoids. Subtropical and equatorial subsurface water showed high absorption at 480 nm and indicated the effects of chlorophyll b. Absorption of the subsurface phytoplankton also showed a shift of the blue peak, possibly caused by the presence of divinyl-chlorophyll a. The consistency of the three different analytical methods indicates that the phytoplankton absorption includes significant information on pigment composition along a north-south vertical section of the central North Pacific.  相似文献   

18.
锯缘青蟹碱性磷酸酶分离纯化及部分理化性质研究   总被引:40,自引:0,他引:40  
于1995年2月在厦门海域采集锯缘青蟹,取其内脏经正丁醇抽提,硫酸铵分级分离DEAE-52离子交换柱层析及SephadexG-200凝胶过滤柱层析纯化,获得碱性磷酸酶 制剂,以快速 蛋白液相色谱及聚丙烯酰胺凝胶电泳检验萁 纯度,获得单一蛋白纯的酶 制剂。  相似文献   

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