创伤弧菌内膜脂蛋白MFP4的克隆、表达及细胞定位研究          下载免费PDF全文

张梦琳  马宏姝  祝清松  李珂  王文琪  陈师勇 《海洋科学》2023,47(1):45-53

创伤弧菌是一种海洋环境中的重要病原菌。细菌脂蛋白是一类细菌重要的具有不同生理功能的膜蛋白,以大肠杆菌为代表的经典革兰氏阴性菌脂蛋白分泌规律遵循“+2规则”。为探究海洋环境中革兰氏阴性菌的细菌脂蛋白分泌机制是否有别于其他环境中的革兰氏阴性菌,本研究克隆并表达了创伤弧菌的MFP4脂蛋白,该脂蛋白N端成熟肽段第二位(+2位)氨基酸为甘氨酸,根据“+2规则”理论上应定位于细胞外膜。实验利用细菌外膜小体分离鉴定法,在表达MFP4重组脂蛋白的创伤弧菌中对其进行细胞定位后发现, MFP4生物合成后定位于细胞内膜。实验进一步构建了MFP4蛋白N端序列与红色荧光蛋白RFP的融合脂蛋白基因MFP4tether-RFP并在创伤弧菌中表达,细胞定位结果发现该重组融合脂蛋白仍然定位于细胞内膜,说明MFP4成熟脂蛋白的N端携带内膜细胞定位的信息。实验同时构建并表达了外膜脂蛋白LptE的N端序列与RFP的融合重组脂蛋白LptEtether-RFP,该蛋白具有与MFP4相同的N端+2位氨基酸(Gly+2),与MFP4 tether-RFP融合脂蛋白仅有(+3—+10位)8个氨基酸序列的差异。实验发现该融合脂蛋白定位于...  相似文献   

中华鳖（Pelodiscus sinensis）不同种群酪氨酸酶（TYR）基因的克隆及其多态性分析   总被引：1，自引：0，他引：1       下载免费PDF全文

张永正  张海琪  黄利英  丁诗华 《海洋与湖沼》2009,(3)

以中华鳖4个种群80个个体（太湖种群、日本品系种群、台湾引进种群和“清溪乌鳖”种群）肌肉基因组DNA为模板，利用已知酪氨酸酶（Tyrosinase，TYR）基因部分序列设计合成特异引物进行PCR扩增，克隆并测定了TYR基因的核苷酸序列。扩增所得的696bp序列中共有13个多态性核苷酸位点。中华鳖体色变异种群的3个个体均在第186核苷酸位点出现相同的变异。以此设计酶切位点，选用SmaⅠ内切酶进行RFLP，结果显示80个中华鳖个体的TYR基因存在多态性。AA型基因除在中华鳖体色变异种群内未发现外，其余三个种群内的频率大小顺序为日本品系种群（60％）〉台湾引进种群（30％）〉太湖种群（20％），以省外品种为丰富；AB基因型频率大小顺序为“清溪乌鳖”种群（70％）〉台湾引进种群（50％）〉太湖种群（40％）〉日本品系种群（30％）。  相似文献   

强降水落区中单站降水诊断分析和预报   总被引：6，自引：1，他引：5       下载免费PDF全文

施望芝 金琪刘静  王宏记 《气象科技》2005,33(1):17-21

对2003年7月19日湖北省发生的一场降水强度较强、落区面积较大但武汉市单站出现暴雨空报的大到暴雨过程进行分析。通过诊断分析,解释了其区域暴雨发生和单站暴雨空报原因。结果表明,这是一次典型的中纬度斜压系统引起的大尺度大到暴雨过程,它的发生机制可用准地转运动理论给予很好的解释。而单站的强降水,特别是大到暴雨区中或大到暴雨区边缘单站的大到暴雨是否发生,必须通过诊断分析次级环流,当次级环流条件满足时,才能产生暴雨,否则会出现空报现象。  相似文献