3种典型荒漠灌木内生固氮菌及固氮酶基因nifH多样性分析   总被引：1，自引：0，他引：1  

徐正金  罗明  王卫霞  王纯利 《中国沙漠》2014,34(2):472-480

具有特殊生境的内生固氮菌,对改善植物营养、增强植物抗逆性及群落稳定性具有重要作用,是一类潜力巨大、尚待开发的微生物资源。以新疆3种典型荒漠灌木多枝柽柳（Tamarix ramosissima）、黑果枸杞（Lycium ruthenicum）、盐穗木（Halostachys caspica）为材料,从根和枝条组织中分离筛选获得137个内生固氮菌菌株,采用16S rDNA PCR-RFLP、16S rDNA序列测定、BOXAIR-PCR指纹图谱、nifH PCR-RFLP等方法分析其遗传多样性及系统发育关系。结果表明：分离菌株经16SrDNA PCR-RFLP酶切图谱聚类划分为9个遗传类型。序列测定和系统发育分析显示,代表菌株分属于拉恩氏菌属（Rahnella）、假单胞菌属（Pseudomonas）、泛菌属（Pantoea）、芽孢杆菌属（Bacillus）、寡养单胞菌属（Stenotrophomonas）和申氏杆菌属（Shinella）,其中Rahnella为优势种群。一个测定菌株的16SrDNA序列同源性低于97%,提示可能为一个潜在的新种。BOXAIR-PCR分析优势种群的基因组结构特征,获得12种指纹图谱类型,显示出该种群具有丰富的基因组多样性。nifH PCR-RFLP分析分离内生固氮菌菌株固氮酶基因nifH的分子多态性,将其划分为3种基因型,体现了nifH具有高度保守性,同时在不同固氮微生物种群和菌株间也存在一定的多样性。研究结果丰富了固氮微生物物种资源库和基因库,对于内生固氮菌资源的保护和利用奠定了科学基础。  相似文献   

Molecular Cloning of a Cytosolic G6PDH Gene from Populus Suaveolens and Its Expression to Improve the Cold Resistance of Tobacco Plants     

LIN Yuan-zhen  GUO Hai  ZHANG Zhi-yi  LIN Shan-zhi 《冰川冻土》2009,31(6)

Glucose-6-phosphate dehydrogenase (G6PDH, EC 1.1.1.49) is the first and main regulated enzyme of oxidative pentose phosphate pathway (OPPP), catalyzing the conversion of glucose-6-phosphate to 6-phospho-gluconolactone and playing important roles in the growth and development of plants. It is preciously reported that the enhancement of freezing resistance of Populus suaveolens cuttings is clear related to the distinct increase in cytosolic G6PDH activity. Here, a 1697 bp cDNA fragment (PsG6PDH) is amplified by RT-PCR from cold-induced total RNA of the freezing-tolerant P. suaveolens . A sequence analysis showed that PsG6PDH coding region had 1 530 bp and encoded 510 predicted amino acid residues. Genomic Southern analysis revealed that the isoform is encoded by a few copies of the gene in the poplar genome. The cloned gene PsG6PDH is cloned into binary vector pBI121 and used to transform tobacco. PCR and Southern blotting results verified integration of this gene into the genome of tobacco. Moreover, cold treatment experiments and membrane defense enzyme activity analysis confirmed that overexpression of the PsG6PDH gene could enhance the tolerance to cold or frigid stresses in transgenic plants.  相似文献   

Phylogenetic diversity of planktonic bacteria in the Chukchi Borderland region in summer   总被引：1，自引：1，他引：0  

ZENG Yinxin  YU Yong  LI Huirong  HE Jianfeng  LEE Sang H  SUN Kun 《海洋学报(英文版)》2013,32(6):66-74

Planktonic bacteria are abundant in the Chukchi Borderland region. However, little is known about their diversity and the roles of various bacteria in the ocean. Seawater samples were collected from two stations K2S and K4S where sea ice was melting obviously. The analysis of water samples with fluorescence in situ hybridization (FISH) showed that DMSP-degrading bacteria accounted for 13% of the total bacteria at the station K2S. No aerobic anoxygenic phototrophic (AAP) bacteria were detected in both samples. The bacterial communities were characterized by two 16S rRNA gene clone libraries. Sequences fell into four major lineages of the domain Bacteria, including Proteobacteria (Alpha, Beta and Gamma subclasses), Bacteroidetes, Actinobacteria and Firmicutes. No significant difference was found between the two clone libraries. SAR11 and Rhodobacteraceae clades of Alphaproteobacteria and Pseudoalteromonas of Gammapro-teobacteria constituted three dominant fractions in the clone libraries. A total of 191 heterotrophic bacterial strains were isolated and 76% showed extracellular proteolytic activity. Phylogenetic analysis reveals that the isolates fell into Gammaproteobacteria, Bacteroidetes, Actinobacteria and Firmicutes. The most common genus in both the bacterial isolates and protease-producing bacteria was Pseudoalteromonas. UniFrac data showed suggestive differences in bacterial communities between the Chukchi Borderland and the northern Bering Sea.  相似文献   

凡纳滨对虾P23蛋白基因的筛选、表达和生物信息学分析     

李喜莲  张艳艳  辛静静  钱昭英  刘小林  相建海 《海洋学报》2013,35(4):162-167

克隆凡纳滨对虾极端体重个体的组织差异表达基因P23基因并进行生物信息学分析, 为进一步研究该基因的功能以及凡纳滨对虾的分子选育等研究提供信息。以凡纳滨对虾雌虾极端体重个体腹部肌肉为实验材料, 利用抑制消减杂交(SSH)技术构建极大体重雌性个体和极小体重雌性个体腹部肌肉组织正反向消减cDNA文库:正库(以极大体重个体为试验组, 以极小体重个体为驱动组, L-S)和反库(以极小体重个体为试验组, 以极大体重个体为驱动组, S-L)消减cDNA文库, 并采用实时定量技术分析P23基因的组织表达规律, 利用生物信息学对其功能和结构进行预测。以β-actin为看家基因检测两个文库的消减效率分别为210和25, 实时定量技术分析结果表明P23基因在体重的调节中起上调作用。P23基因编码区序列全长495bp, 编码165个氨基酸, GenBank登录号:JF806619。生物信息学分析发现P23蛋白部分序列含有强疏水性, 无跨膜螺旋结构, 两种信号肽预测都显示P23含有信号肽。  相似文献   

宽体沙鳅(Botia reevesae)β-肌动蛋白基因的cDNA克隆与表达分析     

覃川杰  陈立侨  岳兴建  李二超  王永明  邹远超  谢碧文  齐泽民 《海洋与湖沼》2013,44(2):396-402

利用RT-PCR和快速扩增cDNA末端(rapid amplification of cDNA ends,RACE)技术首次克隆了宽体沙鳅(Botia reevesae)-肌动蛋白基因的cDNA全序列,该序列全长为1795bp,由长100bp的5非翻译区(untranslated region,UTR)、570bp的3非翻译区和1125bp的开放阅读框(open reading frame,ORF)组成,编码375个氨基酸。宽体沙鳅-actin氨基酸序列包含1个糖基化位点、9个N-豆寇酰化位点、3个actin信号位点等主要结构区域。PSI-BLAST比对表明,宽体沙鳅-actin氨基酸与真鲷、罗非鱼、虹鳟等鱼类同源性达99%。NJ法系统进化分析显示宽体沙鳅-actin首先与鲢聚在一起,然后与、尖头等鱼类聚在一起。荧光定量PCR检测-actin基因在宽体沙鳅脑、鳃、心脏、肝、胃等12个组织的表达无显著差异(P<0.05),具有良好的稳定性。  相似文献   

山东部分海域红藻的鉴定与多样性分析     

梁成伟  王娟娟  张晓文  徐东  叶乃好 《海洋科学》2013,37(2):22-29

在山东青岛、威海和烟台近海海域的潮间带进行采样调查,共采取36株红藻样本,对其形态学特征进行了详细的观察.结果显示,所采集的样本在色泽、大小、形态、叶状体形状等外观上均有一定差异,但部分样本间差别并不明显.同时作者采用分子系统学的方法,从藻类样本中分离了rbcL基因片段,并进行了序列分析,利用 rbcL 基因建立了分子系统进化树,对样品间的亲缘关系及多样性进行了系统分析.结果表明,本研究采得的红藻样本有很好的多样性,分别与 GenBank 中已报道的红藻门中的16个属亲缘关系较近.在青岛、烟台和威海3个海域的红藻样本呈现不同的多样性,并且同一属的样品表现出很好的属内种间多样性.  相似文献   

Identification of normalization factors for quantitative real-time RT-PCR analysis of gene expression in Pacific abalone Haliotis discus hannai     

邱礽  孙铂光  房沙沙  孙黎  刘晓 《中国海洋湖沼学报》2013,31(2):421-430

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Cloning and expression analysis of vasa during the reproductive cycle of Korean rockfish, Sebastes schlegeli     

MU Weijie  WEN Haishen  HE Feng  LI Jifang  LIU Miao  MA Ruiqin  ZHANG Yuanqing  HU Jian  QI Baoxia 《中国海洋大学学报(英文版)》2013,12(1):115-124

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大菱鲆2种类胰岛素样生长因子结合蛋白基因克隆及在成鱼和早期发育期中的表达     

胡健  温海深  关健  官曙光  何峰  李吉方  史丹  马瑞芹  刘淼  母伟杰  张远青 《海洋学报》2012,34(5):139-146

类胰岛素样生长因子结合蛋白(IGFBP)在调节IGF的生物学功能上起着重要的作用,利用简并引物扩增及RACE克隆技术,首次克隆得到大菱鲆IGFBP-1,-2基因cDNA全长序列。两个基因氨基酸序列都分为保守的N端和C端以及高度特异的L区域3个部分,其中N端和C端共包含18个半胱氨酸残基,N端存在一段保守的(GCGCCXXC)结构,C端存在一段保守的(CWCV)结构,这些结构在与IGF相互作用以及调节与IGF结合的亲和性和稳定性起重要作用。组织表达分析表明,igfbp-1主要在肝脏及脾中大量表达,在其他组织中表达量较少,igfbp-2除在肌肉中没有检测到表达外,在其他组织中均有表达,其中肝脏脑、心、肾、肠中表达量较高。广泛的组织表达模式表明IGFBP是通过自分泌和旁分泌来调节IGF的功能。对于胚胎发育期表达分析表明,igfbp-1在整个发育期均检测到表达,igfbp-2在胚体期开始有表达,结果表明igfbp-1和igfbp-2在胚胎发育过程中的细胞生长以及组织器官分化都起着重要的生理学作用。  相似文献   

刺参虾青素基因的克隆及不同体色个体间表达差异的分析     

赵鹤凌  杨红生  赵欢  刘石林 《海洋科学》2012,36(3):22-28

仿刺参(Apostichopus japonicus Selenka)的体色变化很大,多数背腹均为黄褐色,极少数呈白化特征,背腹均为纯白色。经人工繁育实验发现,白化仿刺参的子代仍多具白化特征。本文研究了虾青素基因与刺参白化特征的相关性。在克隆虾青素基因cDNA全长的基础上,比较了普通仿刺参和白化仿刺参在不同发育时期虾青素基因表达量的差异。结果表明,该基因的cDNA含有2058个核苷酸,编码560个氨基酸。经实时定量PCR分析,白化成参体壁中虾青素基因表达量显著低于普通成参;而在仿刺参色素沉积的早期,白化稚参体壁中虾青素基因表达量从受精后第39天开始显著低于普通稚参。可见,仿刺参体壁中虾青素基因的低表达与刺参白化特征的发生密切相关。  相似文献