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91.
甘糖酯对大鼠尿激酶型纤溶酶原激活物(uPA)mRNA水平的影响   总被引:2,自引:2,他引:0  
从分子水平上探讨海洋新药甘糖酯的抗栓作用机理。实验以大鼠为材料,采用定量RTPCR方法定量检测口服甘糖酯后大鼠尿激酶型纤溶酶原激活物(uPA)基因m RNA水平变化。研究表明大鼠口服甘糖酯后uPA基因m RNA 水平高于对照组,差异显著。结论认为甘糖酯可提高体内uPA基因的m RNA 水平,从而提高uPA蛋白的活性,激活机体的纤溶系统,达到抗栓作用。  相似文献   
92.
93.
Effects of exposure to polychlorinated biphenyls (PCBs) on Sebastiscus marmoratus were investigated using a suppression subtractive hybridization method. A total of 108 gene sequences were identified as having the potential for being differentially expressed, and 45 could be identified with homologous database sequences. Functions with which they were associated included long-term potentiation and neurotransmitter release, neuroendocrine, mitosis and cell proliferation, energy-related metabolism, general metabolism, signal protein, hemopoiesis system, immune system, and structure. The expression of 17 of these genes was analyzed in the brain using real time fluorescent quantitative PCR. The present study provided a basis for studying the response of fish to PCB exposure and allowed the characterization of new potential neurotoxicol biomarkers of PCB contamination in seawater.  相似文献   
94.
水产动物病原菌广泛分布于近海,不但影响海水养殖业的发展、海产品的质量安全,甚至还威胁到人类公众健康,因此,开展近海水域病原菌多样性的研究,对于海水养殖业的可持续发展及人类健康都具有重要意义。文章综述了近海水域水产动物病原菌多样性研究主要方法的原理、特点以及局限性,介绍了16S rRNA序列分析、分子杂交、指纹图谱等分子生物学技术,阐述了实时荧光定量PCR、竞争定量PCR等定量研究技术的应用,展望了病原菌多样性研究的发展趋势是原位、快速、高通量、灵敏、多技术联合和准确定量。  相似文献   
95.
根据爱德华氏菌(Edwardsiella)的16S rDNA基因序列设计一对特异性引物,用二温式PCR对6株爱德华氏菌均扩增出与预期大小相一致的576 bp产物,而对嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila)、温和气单胞菌(Aeromonas sobria)、荧光假单胞菌(Pseudcmonas fluoroscercs)、柱状屈挠杆菌(Cytophaga columnaris)、链球菌(Streptococcus)、葡萄球菌(Staphylococci)、弧菌(Vibrio)、大肠杆菌(Escherichia colibacillus)和沙门氏菌(Salmonella)等10种病原体的扩增,结果全为阴性。该二温式PCR可以检测到1 pg的爱德华氏菌DNA模板和48个菌体。本实验建立的二温式PCR为爱德华氏菌病的早期诊断与有效的防治提供了快速检测方法,对水产品的食品安全有重要的意义。  相似文献   
96.
东海原甲藻线粒体细胞色素b(Cytb)基因的定量检测   总被引:3,自引:0,他引:3  
建立了检测东海原甲藻线粒体细胞色素b(Cytb)基因mRNA含量的实时荧光定量PCR方法.以甲藻Cytb基因的简并引物扩增得到984 bp长的东海原甲藻Cytb基因片段,经克隆、测序,制备并纯化质粒.以光度法测定质粒浓度并作为标准品.对上述基因片段,利用PRIMER EXPRESS 3.0 设计引物,以梯度稀释的质粒标准品进行定量PCR反应,以SYBR Green I为荧光染料,制作标准曲线,得到基因拷贝数X与Ct值的关系为:Ct=-3.50 lg X+39.35(相关系数r为0.999).通过对不同生长时期的东海原甲藻样品的Cytb基因mRNA含量检测,发现该基因的表达量较稳定,平均值为(45.4±4.7)拷贝/细胞,受生长状态影响不大,可作为实时荧光定量PCR的内参基因.  相似文献   
97.
福建沿海巨蛎属牡蛎的主要种类及其分布   总被引:4,自引:0,他引:4  
杜玄  郭希明  钱鲁闽 《台湾海峡》2009,28(3):399-404
本实验采用了多重种类特异性PCR(multiplex species—specific PCR)技术,研究了巨蛎属(Crassostrea)牡蛎主要种类在福建沿海的分布.从沿海11个采样地点共采集了657个野生牡蛎样本,随机抽取了327个牡蛎样本进行基因组DNA的提取和线粒体COI基因的鉴定,结果发现200个个体为葡萄牙牡蛎(Crassostrea angulata),101个个体为近江牡蛎(Crassostrea ariakensis),20个个体为熊本牡蛎(Crassostrea sikamea),6个个体为香港巨牡蛎(Crassostrea hongkongensis).此次实验中未发现长牡蛎(Crassostrea gigas).结果表明,福建沿海有葡萄牙牡蛎、近江牡蛎、熊本牡蛎和香港巨牡蛎4种巨蛎属牡蛎分布.  相似文献   
98.
用PCR法成功制备了DIG标记探针,探针长度为547bp,探针的产量为21.6ng/μL。此探针与随机引物合成探针检测样品灵敏度相近。用此探针核酸斑点杂交法检测了54尾中国对虾。结果表明此探针在对白斑综合症病毒的检测、对虾暴发性流行病的诊断等方面具有很高的应用价值。  相似文献   
99.
为构建南极冰藻Chlamydomonassp.ICE-L的cDNA文库,提取对数生长期南极冰藻ICE-L的总RNA,以此为模板,通过PowerScript逆转录酶逆转录合成第一链cDNA;再以第一链cDNA产物为模板,用LD-PCR合成第二链cDNA。该cDNA产物经分级分离转入大肠杆菌中,即获得南极冰藻ICE-L的cDNA原始文库,其滴度为1.6×106cfu/mL。扩增后的cDNA文库的滴度为1.0×1010cfu/mL。用PCR方法测得文库的重组率大于97%,插入cDNA的长度为0.5~1.8 kb,0.9 kb以上插入片段占50%以上。取适量扩增文库稀释并铺平板,挑取72个独立菌落,对其中22个独立菌落所插入的cDNA进行测序,克隆到了一个具有5′和3′非编码区的40S ribosomalprotein S5全长基因序列,GenBank收录号为AM167929。  相似文献   
100.
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