LPS胁迫下五个群体菲律宾蛤仔TYR基因在鳃和肝胰腺中表达特性研究     

刘杰  聂鸿涛  姜坤银  王政兴  孙晓彤  霍忠明  闫喜武 《海洋科学》2020,44(1):81-88

为了解TYR基因与蛤仔免疫的关系,本实验利用荧光定量PCR技术研究了菲律宾蛤仔五个群体(白蛤、白斑马蛤、斑马蛤、养殖和野生群体)的鳃组织和肝胰腺组织在LPS胁迫下TYR基因在不同时间(0 h、3 h、12 h、24 h、48 h)的表达特性。结果表明,在LPS注射后鳃组织中TYR6基因表达水平在白蛤和白斑马蛤3 h、6 h、12 h,野生蛤仔3 h,斑马蛤3 h、6 h,养殖群体6 h、12 h显著上调(P0.05),3h野生蛤仔和斑马蛤达到峰值, 6 h白蛤、白斑马蛤、养殖群体达到峰值(P0.05);在肝胰腺中,养殖群体和白斑马蛤6 h,白蛤6 h、24 h,野生群体24 h,斑马蛤3 h显著上调, 3 h野生蛤仔和斑马蛤达到峰值,6h养殖群体、白蛤、白斑马达到峰值(P0.05);鳃组织中TYR10基因表达水平在白蛤、野生群体和白斑马蛤3 h,养殖群体3 h、6 h,斑马蛤3 h、12 h显著上调(P0.05),肝胰腺组织中TYR10基因表达水平在白蛤3 h,野生群体3 h、6 h、12 h,斑马蛤、养殖群体6 h显著上调(P0.05),推测TYR基因在五个菲律宾蛤仔群体的鳃和肝胰腺中参与了免疫应答。通过对TYR基因的氨基酸序列进行二级结构分析和系统发育树分析,找到两个铜离子结合位点和6个组氨酸残基,并发现TYR6基因和长牡蛎同源性最高,为39.43%, TYR10基因和大珠母贝同源性最高,为51.04%。本文首次探讨在LPS胁迫下菲律宾蛤仔TYR基因的表达特性,为进一步探究TYR基因与菲律宾蛤仔免疫应答机制提供参考。  相似文献   

Cloning, expressing, and hemolysis of tdh, trh and tlh genes of Vibrio parahaemolyticus   总被引：1，自引：0，他引：1  

Yonggang Zhao  Xiaoqian Tang  Wenbin Zhan 《中国海洋大学学报(英文版)》2011,10(3):275-279

Vibrio parahaemolyticus (VP) is one of the pathogenic vibrios endangering net-cage cultured Pseudosciaena crocea,Fennerpenaeus chinensis, and shellfish in coastal areas of China. Several types of hemolysins produced by Vp have been characterized as major virulence factors.They are thermostable direct hemolysin (TDH),TDH-related hemolysin (TRH) and thermolabile hemolysin (TLH). In this study, we cloned tdh, trh, and tlh genes from the genome DNA of VP by polymerase chain reaction (PCR).We ligated the three genes into prokaryotic expression vector pET-28a (+),and transformed the recombinant plasmids into Es-cherichia coli BL21 (DE3). The expression of recombinant proteins was induced by isopropyl-β-D-thiogalacto-pyranoside (IPTG). The recombinant proteins were expressed in a form of inclusion bodies and thus purified with Ni-NTA affinity chromatography. Western blotting results showed that recombinant proteins,TDH, TRH and TLH, could be recognized by rabbit anti-VP serum. The three purified proteins were renatured by gradient dialysis.The renatured proteins exhibited hemolytic activity except for TLH in the presence of phosphatidylcholine. These results not only are helpful for better understanding these genes’ functions under a single factor level, but also provide evidence for VP vaccine engineering.  相似文献   

Effects of dietary soybean stachyose and phytic acid on gene expressions of serine proteases in Japanese flounder (Paralichthys olivaceus)     

Haifeng Mi  Kangsen Mai  Wenbing Zhang  Chenglong Wu  Yinghua Cai 《中国海洋大学学报(英文版)》2011,10(3):234-240

Soybean stachyose (SBS) and phytic acid (PA) are anti-nutritional factors (ANF) which have deleterious effects on the growth and digestibility in fish. The present research studied the effects of dietary SBS and PA on the expression of three serine protease genes in the liver of Japanese flounder (Paralichthys olivaceus). These genes are trypsinogen 1 (poTRY), elastase 1 (poEL) and chymotrypsinogen 1 (poCTRY). Eight artificial diets with graded levels of supplemented ANFs were formulated to 4 levels of SBS ...  相似文献   

中原城市群城市竞争力的评价与时空演变   总被引：8，自引：1，他引：7  

王发曾  吕金嵘 《地理研究》2011,30(1):49-60

城市竞争能力的强弱决定着城市的兴衰.全球流动的资本、创新知识与技能、高级人才、旅游者等都是当今经济全球化趋势下城市发展的宝贵要素,这些要素的有限性使城市之间的竞争愈加激烈.以省域城市群为背景区域,研究城市竞争力的评价与时空演变,对于完善我国城市竞争力研究体系、整合城市群各城市具有重要意义.本文建立了中原城市群城市竞争力...  相似文献   

深海高温淀粉普鲁兰酶异源表达及酶活分析     

焦豫良  王淑军  吕明生  房耀维  刘姝 《海洋学报》2011,33(5):133-138

深海热液口厌氧古菌Thermococcus siculi HJ21中的高温淀粉普鲁兰酶进行分子进化树系分析,并在大肠杆菌中通过pMal-c2x载体表达并纯化其N端催化结构域.通过融合表达,在N端催化结构域的N端融合有麦芽糖结合蛋白MalE.对该融合蛋白的α-淀粉酶和普鲁兰酶活性进行了实验分析.融合蛋白的两种酶活的最适温...  相似文献   

大黄鱼肌肉生长抑制素基因原核表达及多克隆抗体的制备     

董海阳  叶秀丽  薛良义  Diallo Amadou 《台湾海峡》2011,30(2):196-202

肌肉生长抑制素抑制动物肌肉的生长发育.根据本实验室克隆的大黄鱼（Pseudosciaena cro-cea）肌肉生长抑制素（MSTN）基因编码序列设计引物,用RT-PCR扩增目的片段,构建MSTN-pET-28 a重组表达质粒,将其转化到大肠杆菌BL21上并用1.0 mmol/dm3IPTG诱导表达,SDS-PAGE电泳检测该目的蛋白大小约为44 kDa,与理论值大小符合.用0.25 mol/dm3KCl染色后从凝胶中切取该蛋白且回收.该回收蛋白与弗氏佐剂等量混合后注射ICR小鼠制备多克隆抗体,并用Westernblot检测该抗体.免疫印迹结果在44 kDa的位置上出现棕色条带,表明大黄鱼肌肉生长抑制素的多克隆抗体制备成功.这为今后对肌肉生长抑制素功能的研究奠定了基础.  相似文献   

饥饿对金鱼卵巢型和脑型芳香化酶基因表达的影响研究     

温海深  王宇龙  姜龙  李吉方  何峰  刘淼 《中国海洋大学学报(自然科学版)》2011,(Z2):48-53

采用RT-PCR技术,研究了金鱼性腺型芳香化酶基因(CYP19A)和脑型芳香化酶基因(CYP19B)的表达对饥饿胁迫的响应机制.研究结果表明:正常投喂的雌性金鱼中CYP19A基因mRNA在卵巢、肝脏、肾脏、肌肉、鳃、头肾、脾脏、脑、肠和心脏10个组织均有表达,表达量呈现递减趋势;饥饿胁迫后,CYP19A基因mRNA在脑和卵巢中表达的变化规律基本一致,即饥饿5d时表达量显著降低(P<0.05),随后表达水平维持稳定.正常投喂的雌性金鱼CYP19B基因mRNA在脑、头肾、性腺、脾、肌肉和心脏6个组织中表达呈现递减趋势;CYP19B基因mRNA在脑和卵巢中的表达量,在饥饿5d时表达量显著降低(P<0.05),随后表达水平维持稳定.这些结果说明,雌性金鱼在饥饿条件下,性激素合成关键酶基因在脑和卵巢中的表达量显著降低,可能影响卵巢发育。  相似文献   

鳗弧菌膜绑定溶胞壁质转糖酶MltD的表达纯化及生物信息学分析     

徐子男  张晓华 《中国海洋大学学报(自然科学版)》2011,(Z2):101-106

本研究将新发现的鳗弧菌毒力相关基因mltD(膜绑定溶胞壁质转糖酶基因)克隆于表达载体pET-32a(+),在大肠杆菌BL21(DE3)中诱导表达,并以镍琼脂糖亲和层析柱纯化表达的融合蛋白;经SDS-PAGE分析,纯化的融合蛋白为单一条带,分子量约为70.2 kDa,与理论预测值相符。生物信息学分析表明,鳗弧菌MltD由523个氨基酸组成,与其他弧菌的MltD氨基酸序列有较高的相似性;二级结构以α螺旋和无规则卷曲为主;功能区包括N端的信号肽区域、1个糖基转移酶结构域和C端的3个溶解酶结构域;蛋白的N端具有一段脂蛋白信号肽,信号肽外的其他部分为非细胞质蛋白。鳗弧菌MltD蛋白为亲水性;不稳定系数为27.40,属于稳定性蛋白;整个蛋白分子共有24个可能的抗原决定簇,具有较强的抗原性。推断MltD蛋白为1种外周膜脂蛋白,在弧菌中相对保守,抗原性强,可应用于抗弧菌病疫苗的开发研制。  相似文献   

紧凑二叉树表示法──一种有效的图像表达技术     

谈国新 《国土资源遥感》1995,6(3):47-54

本文介绍了一种新的图像表达技术──紧凑二叉树表示法,给出了该技术的编码方法,讨论了基于紧凑二叉树表示的图像操作过程。通过与其它图像表达技术的比较和分析表明,紧凑二叉树表示具有较高的时空效率。  相似文献   

在CAD使用中加入AUTOLSIP编程的研究     

程学忠 《物探化探计算技术》2001,23(2):166-170

作者在文中介绍了为适应新形势，在计算机辅助设计AUTOCAD使用中，灵活运用AUTOLISP语言编制程序绘制图形，应将自学重点放到掌握LISP语言的语法规则，用一个典型的自学内容清单，说明在自学中应增加的学习内容，列举了四个典型的程序，并附有程序清单及注解，可供读者参考。  相似文献