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31.
建立螺旋藻转基因体系初报 总被引:9,自引:1,他引:8
Mao Yunxiang 《中国海洋大学学报(自然科学版)》2000,30(Z1):13-18
从钝顶螺旋藻单细胞克隆的制备、重组平台的 克隆、同源重组表达质粒的构建、质粒的电激转化和报告基因的表达等方面对螺旋藻转基因 表达系统进行了研究,初步建立起螺旋藻转基因体系。用次氯酸钠溶液处理获得无菌培养系 ;用钠、钙离子混合液处理,获得了可再生的螺旋藻单细胞。用含EDTA的培养基预培养和用 培养基洗涤可分别去除胞外核酸酶活性和抑制胞内核酸酶活性。以氯霉素乙酰转移酶基因替 换大肠杆菌表达质粒pBV220的抗性选择标记,同时插入系列同源重组片段和萤火虫荧光素酶 基因,构建了同源重组表达载体pBVCS01-04L。电激转化螺旋藻S6-4品系单 细胞,获得了具有稳定氯霉素抗性的培养系,并用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳证实了报告基 因的表达。 相似文献
32.
硒碲胁迫对两种螺旋藻生长的影响 总被引:8,自引:3,他引:8
研究了硒(Na2SeO 3)和碲(Na2TeO 3)胁迫对钝顶螺旋藻(Spirulinaplatensis)和极大螺旋藻(Spirulinamaximum)生长的影响。结果表明 ,两种藻对硒、碲表现出不同的耐性。对于S.platensis,CSe≤200mg/L促进生长 ,CTe<100mg/L影响不大 ,CTe≥100mg/L抑制生长 ,CSe≥800mg/L或CTe=400mg/L藻死亡 ;而对于S.maximum ,CSe=25mg/L时促进生长 ,CTe≤25mg/L无影响 ,CTe≥50mg/L明显抑制生长 ,CSe≥800mg/L或CTe≥600mg/L则死亡。而在培养周期内分次添加硒、碲 ,当累计达到CSe(CTe)=800mg/L,两种藻仍能正常生长。表明硒、碲添加方式不同 ,产生明显不同的效应。 相似文献
33.
在不同温度和光强下培养极大螺旋藻438(Spirulina maxim438),得到其积累多糖规律为:不利于螺旋藻生长的温度、光照条件,会促进胞外多糖EPS(extracellular polysaccharide,EPS)的分泌,而螺旋藻最适生长条件(30℃,5000lx)与胞内多糖IPS(intracellular polysaccharide,IPS)积累的条件一致。MTT(四甲基偶氮唑盐)法体外实验证明IPS和EPS对人宫颈癌Hela细胞有抑制作用,最佳作用浓度分别为80μg/mL,100μg/mL。Caspase-3试剂盒检测经两种多糖作用后Hela细胞Caspase-3酶的变化,结果显示:处理组比对照组Caspase-3酶活性有明显提高,预示着多糖抑制肿瘤细胞的机制可能是通过Caspase途径,引起细胞的凋亡。 相似文献
34.
从钝顶螺旋藻(Spirulina platensis)中提取纯化藻蓝蛋白(Phycocyanin,PC),光吸收值A620/A280为3.1,观察Se(Ⅳ)与PC相互作用的光谱行为及红硒化现象。光谱检测发现,加入SeO32-后,PC在620 nm的特征光吸收减弱,并随Se(Ⅳ)浓度增加和时间延长单调降低,278 nm和347 nm的光吸收增强;PC的荧光发射和荧光激发也均呈现衰减。另外,PC与Na2SeO3相互作用后,观察到红硒化现象,透射电镜(TEM)证明主要存在形态为红色纳米硒。结果提示PC可能是SeO32?作用的敏感靶点,Se(Ⅳ)对PC主要表现为氧化损伤,而Se(Ⅳ)被还原为红色纳米硒。 相似文献
35.
用乙醇提取螺旋藻中的叶绿素,再用5%NaOH溶液皂化、石油醚萃取,在酸性环境中用10%CuSO4溶液实现铜镁置换,沉淀物经丙配溶解后,加2%NaOH的乙醇溶液成盐,过滤,水洗,真空干燥,制成叶绿素铜钠盐.制品的质量达到GB3262-82的要求.提取率为64.7%,制品得率占藻粉1.1%。着重对铜镁置换的条件、制品耐酸、耐热、耐光等性能进行了对比试验,结果表明整个工艺是切实可行的. 相似文献
36.
CCC plasmid was isolated from an economically important blue-green alga —Spirulina platensis (1.7×106 dalton from the S6 strain and 1.2×106 dalton from the F3 strain) using a rapid method based on ultrasonic disruption of algal cells and alkaline removal of chromosomal DNA. The difference
in the molecular weight of the CCC DNAs from the two strains differing in form suggests that plasmid may be related with the
differentiation of algal form. This modified method, which does not use any lysozyme, is a quick and effective method of plasmid
isolation, especially for filamentous blue-green algae.
Contribution No. 79 of the Experimental Marine Biology Laboratory and 2153 of the Institute of Oceanology, Academia Sinica.
This research was supported in part by The President of the Chinese Academy of Sciences Foundation. 相似文献
37.
38.
39.
曹吉祥 《中国海洋湖沼学报》1996,(4)
This study on the effect of different concentrations of germanium dioxide (GeO_2) on the specificgrowth rate (SGR), pigment contents, protein content and amino acid composition of Spirulina platensisshowed that Ge was not the essential element of this alga; that GeO_2 could speed up growth and raiseprotein content of S. platensis, and could possibly influence the photosynthesis system. The concentrationrange of GeO_2 beneficial to growth of S. platensis is from 5-100 mg/l. GeO_2 is proposed to be util-ized to remove contamination by Chlorella spp. usually occurring in the cultivation of Spirulina. 相似文献
40.