罗非鱼源无乳链球菌(Streptococcus agalactiae)新型AI-2信号分子受体RbsB蛋白结晶生长研究   总被引：1，自引：0，他引：1  

樊博琳  潘丽霞  王忠良  黎源  简纪常  王蓓 《海洋与湖沼》2020,51(1):132-140

为了开展无乳链球菌(Streptococcus agalactiae)核糖结合蛋白(Ribose binding protein B,RbsB)结构功能的研究,本实验根据已知无乳链球菌ZQ0910全基因组序列设计相关引物。采用PCR方法扩增其RbsB基因,随后将该基因定向克隆到原核表达载体pGEX-6p-1中,在大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞中进行IPTG诱导表达;采用HRV 3C蛋白酶切除GST标签,分子筛分离获得RbsB蛋白;运用生物信息学软件对RbsB基因序列进行分析,并对RbsB蛋白二级和三级结构进行预测;采用NeXtal Tubes JCSG Core Suite结晶试剂盒筛选蛋白结晶条件。研究结果表明,该基因全长为969碱基,编码322个氨基酸,RbsB蛋白理论分子量33.9ku,等电点为9.41,二级结构中α螺旋结构所占比重最高,建立RbsB蛋白三维结构模式图;经IPTG诱导后表达的融合蛋白分子量为59ku,筛选RbsB蛋白的初始结晶条件为(0.2mol/L di-Potassium hydrogen phosphate,20%(W/V)PEG3350;1.5mol/L ammonium sulfate,25%(V/V)Glycerol),获得RbsB蛋白结晶体。本研究结果可为无乳链球菌核糖结合蛋白(RbsB)的功能解析提供实验及理论基础。  相似文献   

Cu2+对序批式反应器中活性污泥胞外聚合物产量及其组分的影响     

李姗姗  朱四富  马丙瑞  于娜玲  赵长坤  信帅帅  潘云浩  吴淑妍  武原原  高孟春 《中国海洋大学学报(自然科学版)》2020,(2):107-115

研究了长期暴露条件下Cu2+对序批式反应器(SBR)性能及其活性污泥胞外聚合物(EPS)特性的影响。结果表明,进水中加入10 mg·L-1的Cu2+后,在SBR运行的第16~55天,COD和NH+4-N的去除率保持稳定;在第56~75天,COD和NH+4-N的平均去除率与进水Cu2+浓度为0 mg·L-1时相比分别下降了3.88%和6.41%。浓度为10 mg·L-1的Cu2+长期作用下,活性污泥中EPS、松散附着EPS(LB-EPS)和紧密附着EPS(TB-EPS)产量及LB-EPS和TB-EPS中蛋白质(PN)含量增加。傅里叶变换红外光谱分析表明10 mg·L-1 Cu2+的长期暴露导致TB-EPS中PN的C=O键、N-H键和C-O键相对含量降低。X射线光电子能谱(XPS)测试结果显示在10 mg·L-1 Cu2+长期暴露条件下,LB-EPS和TB-EPS中元素Cu和O百分含量增加。  相似文献   

iTRAQ-based proteomic profiling of the marine medaka (Oryzias melastigma) gonad exposed to BDE-47     

C.C. Fong  Y.F. Shi  W.K. Yu  F. Wei  J.P. van de Merwe  Alice K.Y. Chan  R. Ye  Doris W.T. Au  Rudolf S.S. Wu  M.S. Yang 《Marine pollution bulletin》2014

A recent study demonstrated that 2,2′,4,4′-tetrabromodiphenyl ether (BDE-47) may have an adverse effect on the reproduction in marine medaka (Oryzias melastigma), but the molecular mechanisms remain largely unknown. In this study, we investigated the protein expression profiles of male and female gonads of O. melastigma exposed to dietary BDE-47 at two dosages (0.65 and 1.30 μg/g/day, respectively) for 21 days. Extracted proteins were labeled with iTRAQ and analyzed on a MALDI TOF/TOF analyzer, as results, 133 and 144 unique proteins were identified in testis and ovary, respective, and they exerted dose- and sex-dependent expression patterns. In testis, among the 42 differentially expressed proteins; down-regulation of histone variants and parvalbumins implicated BDE-47 may disrupt the spermatogenesis and induce sterility in fishes. In ovary, 38 proteins were differentially expressed; the elevation of vitellogenins and apolipoprotein A–I expression indicated BDE-47 acts as an estrogen-mimicking compound and led to reproductive impairment in O. melastigma.  相似文献   

饲料中不同蛋白质和脂肪水平对克氏螯虾（Procambarusclarkii）生长性能、体组成和消化酶活性的影响   总被引：3，自引：0，他引：3       下载免费PDF全文

徐维娜  刘文斌  沈美芳  王莹  朱杰  徐刚  程龙 《海洋与湖沼》2011,42(4):521-529

采用3×3因子方法,进行了饲料中不同蛋白质和脂肪水平对克氏螯虾f均重（7．03±0．05）g]生长性能、体组成和消化酶活性的影响研究。试验设3个蛋白质水平（24％、27％和30％1和3个脂肪水平（4％、7％和10％）,共9组,每组4个重复,每个重复10尾虾,为期8周。结果表明,蛋白质和脂肪水平对成活率无显著影响（P〉0...  相似文献   

苯并[a]芘(BaP)对褐菖鲉(Sebasticus marmoratus)肝CYP1A1酶活性、基因表达及蛋白表达的影响     

孙文静  王晓艳  祁鹏志  张建设  吴常文 《海洋与湖沼》2018,49(4):897-903

为了了解苯并[a]芘(BaP)对鱼类细胞色素P4501A1(CYP1A1)表达的影响,以褐菖鲉(Sebasticus marmoratus)为实验材料,采用体内实验,研究其在经过不同浓度(0.1、1、10、20、50mg/kg鱼体重量)的BaP诱导后,鱼体肝脏研究CYP1A1基因表达的情况,筛选出后续时间-效应实验中BaP注射的最佳浓度,研究BaP诱导6h、12h、1d、3d、7d后(质量浓度为20mg/kg鱼体重量)鱼体肝脏CYP1A1酶活性、基因表达和蛋白表达的情况。结果表明:剂量-效应实验中,20mg/kg鱼体重量为最佳浓度,此浓度下,基因表达在各组中变化最显著。时间-效应实验中,较空白对照组而言,染毒6h、12h和1d后,EROD酶活性显著增加。3d后开始下降,与对照组相比变化不大,7d后酶活性又发生上调。半定量RT-PCR结果表明,各染毒组与对照组相比,CYP1A1基因表达量都发生了上调,呈现先上升后下降的趋势。其中,6h和12h组相对表达量极显著增加,1d后开始下降且与3d和7d组相比变化不明显。Western blot结果表明,蛋白表达量在染毒12h后表现出显著的诱导效应,随着时间的延长略有回落,但与对照组相比仍有显著性差异。研究表明:BaP对褐菖鲉CYP1A1具有较强的诱导作用。一定质量浓度的BaP注射于褐菖鲉不同的时间后,能诱导褐菖鲉活体EROD酶活性、CYP1A1基因m RNA表达及蛋白表达,并随着时间的延长呈现先诱导后抑制的趋势。这说明BaP作为诱导剂对CYP1A1酶活性和蛋白表达的作用机制可能与调控CYP1A1的转录水平有关。  相似文献   

点带石斑鱼幼鱼配合饲料的适宜能量蛋白比     

林建斌  朱庆国  李金秋 《广东海洋大学学报》2010,30(6)

以鱼粉和酪蛋白为蛋白源,添加鱼油、豆油、α-马铃薯淀粉、纤维素以及适量的维生素和矿物质配制成实验饲料,蛋白质质量分数设置41%、47%、53%3个水平,能量设置12 561、14 655、16 748 kJ/kg 3个水平,饲养点带石斑鱼幼鱼59 d后,以增重率、蛋白质效率、饲料系数为评价指标,分析不同能量蛋白比的饲料对点带石斑鱼体内消化酶活性的影响。结果表明:当能量蛋白比分别为31.30、33.50、32.26 kJ/g时,点带石斑鱼增重率、蛋白质效率达到极大值,饲料系数达到极小值;能量蛋白比在31.62～35.54 kJ/g范围内,胃、肠道的蛋白酶、淀粉酶、脂肪酶活性较强。点带石斑鱼幼鱼配合饲料中合适的能量蛋白比为31.62～33.50 kJ/g。  相似文献   

Adsorption of Heavy Metal Ions, Dyes and Proteins by Chitosan Composites and Derivatives- A Review     

LIU Bingjie  WANG Dongfeng  YU Guangli  MENG Xianghong 《青岛海洋大学学报(英文版)》2013,(3):500-508

Chitosan composites and derivatives have gained wide attentions as effective biosorbents due to their low costs and high contents of amino and hydroxyl functional groups. They have showed significant potentials of removing metal ions, dyes and pro- teins from various media. Chemical modifications that lead to the formation of the chitosan derivatives and chitosan composites have been extensively studied and widely reported in literatures. The aims of this review were to summarize the important information of the bioactivities of chitosan, highlight the various preparation methods of chitosan-based active biosorbents, and outline its potential applications in the adsorption of heavy metal ions, dyes and proteins from wastewater and aqueous solutions.  相似文献   

饲料中豆粕含量对军曹鱼幼鱼碳、氮稳定同位素分馏的影响     

张泽钊  周晖  施钢  陈刚 《广东海洋大学学报》2013,(6):30-36

配制全鱼粉饲料（以鱼粉为蛋白源）、10%豆柏饲料（用豆柏蛋白10%鱼粉）、20%豆柏饲料（用豆柏蛋白20%鱼粉）等3种等氮等能饲料，分别投喂体质量21.34± 1.54g的幼鱼24 d，研究饲料中豆柏蛋白含量对 军曹鱼幼鱼碳、氮稳定同位素分馈的影响。结果表明，随着养殖时间的延长，各饲料组军曹鱼δ13C逐渐上升，δ15N逐渐下降，虽然δ13C和δ15N变化速度上有差异，但除20%豆柏饲料组肌肉的δ15N外，其他各饲料组肌肉和 全鱼在实验结束时均已与饲料达到同位素平衡;军曹鱼肌肉和全鱼的△13^C和△15^N值均随饲料中豆柏蛋白含量 的增加而加大，△13C从4.19‰增加到5.04‰， △15N从0.18‰。增加到 2.20‰,军警鱼金鱼和肌肉的△13C和△15N 相似，但在同位素值变化速度上有差异，因此，在进行生态学营养级研究（长时间尺度）时，肌肉可以代表军警鱼的同位素特征，而在进行生理学研究（短时间尺度）时，肌肉的同位素变化则不能代表军警鱼的同位素变化。  相似文献   

Immune functional impacts of oyster peptide-based enteral nutrition formula (OPENF) on mice: a pilot study     

蔡冰娜  潘剑宇  吴园涛  万鹏  孙恢礼 《中国海洋湖沼学报》2013,31(4):813-820

Oyster peptides were produced from Crassostrea hongkongensis and used as a new protein source for the preparation of an oyster peptide-based enteral nutrition formula (OPENF). Reserpine-induced malabsorption mice and cyclophosphamide-induced immunosuppression mice were used in this study. OPENF powder is light yellow green and has a protein-fat-carbohydrate ratio of 16:9:75 with good solubility in water. A pilot study investigating immune functional impacts of the OPENF on mice show that the OPENF enhanced spleen lymphocyte proliferation and the activity of natural killer (NK) cells in BALB/c mice. Furthermore, OPENF can improve intestinal absorption, increase food utilization ratio, and maintain the normal physiological function of mice. These results suggest that oyster peptides could serve as a new protein source for use in enteral nutrition formula, but more importantly, also indicate that OPENF has an immunostimulating effect in mice.  相似文献   

热液区管状蠕虫几丁质结合蛋白的克隆表达及功能鉴定     

闫鑫富  阮灵伟 《台湾海峡》2012,31(1):34-38

本文应用PCR技术对四种管状蠕虫几丁质结合蛋白进行了扩增,进而连接到pIZ-FLAG构建了重组表达载体,并在昆虫细胞中实现了几丁质结合蛋白的异源重组表达.我们对几丁质结合蛋白的功能进行了初步研究,亲和活性实验结果表明这四种几丁质结合蛋白对α-chitin具有亲和活性,并且可以辅助几丁质酶,对降解α-chitin和β-chitin均有不同程度的促进作用,且作用效果明显.结果表明,这四种几丁质结合蛋白均为α型,且可以促进几丁质酶的活性,对降解几丁质多糖具有巨大的应用潜力和应用价值.  相似文献