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为了探究灿烂弧菌中 Zn2+转运系统的细胞周质组分 VsA 的表达与功能，本实验采用 PCR 克隆 vsA 基因，实时荧光定量测定 vsA 基因的表达，利用抗体封闭实验研究 VsA 蛋白的功能。生物信息学分析表明 VsA 具有结合和转运 Zn2+的结构基础。实时荧光定量结果表明，vsA 的表达受 Zn2+调控，且具有浓度依赖性，0.01 mmol/L 的 Zn2+可使 vsA 的表达量下调至对照组的0.5倍，而添加等摩尔量的 Cu2+、Fe3+、Mg2+和 Ca2+对 vsA 的表达无明显影响。而 0.1 滋mol/L Zn2+则会诱导 vsA 的表达。此外，在大肠杆菌 Escherichia coli BL21 （DE3） 中进行了 VsA 的重组表达，制备了 VsA 的小鼠多克隆抗体。利用抗体封闭 VsA 蛋白可导致灿烂弧菌在 Zn2+限制条件下的生长受抑制，以及过氧化氢的能力和粘附效率的降低。本研究获得了灿烂弧菌的 vsA 基因，其表达受 Zn2+浓度调控，VsA 蛋白在灿烂弧菌生长、抗氧化以及粘附宿主细胞过程中发挥作用。 相似文献
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