玻尿酸合成酶的鲨鱼源单域抗体筛选     

束树超  徐明策  哈承旭  周宇杭  邓鹏辉  查丽莎  陈锦霖  陈建明  毕允晨 《海洋科学》2022,46(8):111-120

在鲨鱼等软骨鱼类体内存在天然的缺失轻链、仅包含重链的抗体,源于这种重链抗体可变区的片段称为单域抗体(single domain antibody)。目前单域抗体研究中的抗原主要来源于水溶性蛋白或病原体,筛选膜蛋白鲨鱼源单域抗体的领域接近空白。本研究以重组表达的小球藻病毒玻尿酸合成酶(一种膜蛋白)为抗原,经过免疫、建库、淘选、验证等步骤获得了抗原特异性条纹斑竹鲨(Chiloscyllium plagiosum)单域抗体序列。随后利用大肠杆菌表达了该单域抗体,通过等温滴定量热技术(ITC)测定了其与抗原的亲和力,证实了以膜蛋白作为抗原制备鲨鱼源单域抗体的可行性。  相似文献   

长牡蛎电压门控钙离子通道β亚基的无标签亲和层析纯化     

刘凤华  王淏  贾乔雅  毕允晨 《海洋科学》2022,46(2):87-96

亲和层析是一种广泛使用的蛋白质分离纯化技术,常用的亲和标签包括谷胱甘肽巯基转移酶(GST)标签、麦芽糖结合蛋白(MBP)标签、多组氨酸(polyhistidine)标签等.然而,外源亲和标签可能会影响蛋白质的结构与功能,通常需要酶切去除,造成实验流程加长、产率降低.某些蛋白质具有与亲和标签相似的氨基酸序列特征,利用这种...  相似文献