转基因微藻作为新型生物反应器的研究进展     

刘红涛  鲁照明  侯桂琴  李慎柯  王建民  薛乐勋 《海洋通报》2006,25(1):75-83

转基因微藻作为生物反应器生产生物活性物质已成为基因工程研究的热点之一。目前以转基因微藻作为生物反应器的技术并不十分成熟,然而许多科研人员及生物医药公司将微藻作为新型生物反应器生产有用的外源蛋白。本文对微藻生物反应器构建中的有效核转化方法的建立、转基因微藻中所用的启动子、筛选标记、稳定表达等问题进行了综述,同时介绍了目前转化成功的以及未来可能转化成功的有潜在应用价值的微藻。  相似文献   

杜氏盐藻叶绿体ATP合酶α亚单位基因启动子的克隆及初步功能分析     

谷辉辉  冯书营  潘卫东  李杰  薛乐勋 《海洋科学》2011,35(9):18-23

采用DraⅠ,EcoRⅤ,PvuⅡ,ScaⅠ,SmaⅠ和StuⅠ六种内切酶消化杜氏盐藻（Dunaliella salina）叶绿体基因组DNA,与相应DNA接头连接,构建成无载体连接的盐藻叶绿体Genome Walker DNA文库。利用长距离PCR（long distance-polymerase chain rea...  相似文献   

盐藻的一种盐诱导碳酸酐酶基因转录起始点的确定及表达载体的构建     

柴玉荣  侯卫红  王天云  王宁  袁保梅  王建民  薛乐勋 《海洋科学》2005,29(4):26-30

采用5′RACE和巢式PCR的方法确定盐藻(Dunaliella salina)一种盐诱导碳酸酐酶基因的转录起始位点,通过序列分析得出转录起始位点为A,从而确定核心启动子及上游调控区的位置。应用巢式PCR技术分别扩增盐藻这种碳酸酐酶基因上游调控区的2个片段,长度大约分别为0．8和1．2kb,序列经测定无误后分别与带β-葡糖苷酸酶(GUS)报告基因的载体相连接,经酶切鉴定这两种表达载体构建正确。用基因枪法将这两个载体导入盐藻细胞中,经染色检测,GUS基因在转化藻株中得到瞬时表达。  相似文献   

Heterologous gene expression driven by carbonic anhydrase gene promoter in Dunaliella salina     

柴玉荣吕玉民  王天云侯卫红 薛乐勋 《中国海洋湖沼学报》2006,24(4):352-357

1 INTRODUCTION The unicellular Dunaliella salina, is one of the well studied microalgae for mass culture and is of commercial importance as a source of natural beta-carotene (Avron and Ben-Amot, 1992). D. sa- lina has desirable properties of halotolerance…  相似文献   

杜氏盐藻磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶基因的克隆和分析     

张楠楠  潘卫东  崔玉琳  秦松  薛乐勋 《海洋科学》2011,35(12):42-47

为研究杜氏盐藻（Dunaliella salina）磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶（phosphoenolpyruvate carboxylase,PEPC）基因的功能, 根据莱茵衣藻（Chlamydomonas reinhardtii）、拟南芥（Arabidopsis thaliana）、花生（Arachis hypogae...  相似文献   

盐藻胞浆hsp70 cDNA的克隆及其mRNA的诱导表达   总被引：2，自引：0，他引：2  

姜国忠  许培荣  牛向丽  王建民  袁保梅  薛乐勋 《海洋科学》2005,29(5):43-49

用cDNA末端快速扩增方法克隆得到了一个2652bp的盐藻(Dunaliella salina)胞浆hsp70 cDNA全长，编码着650个氨基酸残基的多肽。推导的氨基酸序列有2个ATP酶结合位点和一个多肽结合区。由克隆得到的盐藻cDNA推导的氨基酸序列，经GenBank blast后与数据库中胞浆hsp70序列一致。与莱茵衣藻(Chlamydomonas reinhardtii)、人、小麦(Triticum astivum)和啤酒酵母(Saccharamyces．cerevisiae)胞浆hsp70的序列一致性分剂为83％、80％、81．5％和80．5％。Northern印迹显示，90min后，mRNA量在40℃热休克时是光诱导时的3倍。光诱导则使hsp70 mRNA积累相对迟缓。结果表明，所克隆得到的hsp70基因蛋白产物定位在盐藻细胞浆中，光诱导和热休克均可以使hsp70 mRNA水平明显增高，但以热休克为显著。  相似文献