大黄鱼(Pseudosciaena crocea)转铁蛋白(Tf)基因克隆及序列分析     

李明云  陈炯  张祖兴  管丹东  张呈念 《海洋与湖沼》2007,38(6):563-568

提要应用RNeasy animal mini试剂盒抽提大黄鱼total RNA,逆转录合成模板cDNA;同时综合分析从GenBank数据库查询到已报道的转铁蛋白(Tf)基因序列,先设计并合成扩增引物扩增出大黄鱼转铁蛋白部分基因序列,再应用RACE技术,克隆出大黄鱼转铁蛋白全长cDNA基因,全长2461个核苷酸,编码661个氨基酸。应用WCG软件包,采用DNADIST和NEIGHBOR分析方法,构建了转铁蛋白系统进化树。树图显示与传统的分类地位大致相符,可以看出转铁蛋白在海水鱼和淡水鱼的进化上的差异,同时也显示大黄鱼Tf与真鲷的同源性最高。  相似文献   

土壤与养分流失综合监测方法在密云水库流域的应用     

夏立忠  卜兆宏  张祖兴  杨林章  杨晓勇  姜小三 《地球科学进展》2007,22(3):241-248

土壤与养分流失综合监测方法是根据通用流失方程的基本原理，在对我国中东部南北不同环境条件下大量周年实测数据的统计、分析基础上建立的适合我国南北地区的水土流失与面源污染一体化定量监测方法。本研究采用该方法对密云水库流域2001年度的土壤和氮素养分流失的空间分布，不同土地利用方式对土壤和氮素养分流失的影响，以及泥沙、养分的入库量进行了系统的监测，且利用水文站的实测数据对监测结果进行检验。结果显示，该监测方法对土壤和氮素流失监测的相对误差分别为2.75%~19.63%和-18.78%，监测效果较好。该监测方法具有技术先进、方便、实用、可更新性强和效果好的诸多特点，在我国现有相关资料积累条件下，适用范围较广。随着相关研究的进一步深入，该监测方法可通过改进满足更高时空监测需求，具有较好的应用前景。  相似文献   

大黄鱼(Pseudosciaena crocea)热激蛋白的基因克隆、原核表达及抗血清的制备   总被引：1，自引：1，他引：1  

张祖兴  李明云  陈炯  邬勇 《海洋与湖沼》2006,37(4):337-341

应用trizol裂解法提取象山港网箱养殖大黄鱼肝脏总RNA,采用RTPCR获得大黄鱼cDNA;通过设计特异引物进行PCR扩增,将PCR产物转化到质粒并直接测序,得到1.7kb的目的基因;同时将此目的基因连接到表达质粒pSBET中,在大肠杆菌BL21中进行诱导表达以及表达产物的分析。克隆基因的表达产物经SDSPAGE分析表明,HSP基因的蛋白分子量为60kDa左右,与阅读框的编码大小一致;表达蛋白经纯化后免疫小鼠制备抗血清。Westernblotting检测结果表明,制备的抗血清与HSP蛋白起较强的特异性反应。HSP基因的系统进化分析表明,大黄鱼与非洲爪蟾最为接近,从侧面印证了脊椎动物中两栖纲动物与鱼纲动物的亲源关系。通过大黄鱼HSP基因的提取和分析,可为以后制备出核酸探针、筛选和克隆出一批具有优良性状的基因、构建基因文库等研究工作奠定基础。  相似文献