牙鲆孵化酶的分离纯化及其部分生物化学性质研究          下载免费PDF全文

史振平  樊廷俊  丛日山  汤志宏  汪小锋  付永锋 《海洋科学》2008,32(11):44-50

利用凝胶过滤柱层析和阴离子交换柱层析技术，从牙鲆（Paralichthys olivaceus）胚胎孵化液中分离纯化出了大小约为34．8ku的牙鲆孵化酶。该酶卵膜裂解的最适反应温度为35℃，最适pH为7．0；对底物酪蛋白的米氏常数Km值为1．53mmol／L。该酶对丝氨酸蛋白酶和胰蛋白酶的特异性抑制剂非常敏感，而对其他蛋白酶抑制剂不敏感，表明该酶极可能是一种丝氨酸蛋白酶类型的胰蛋白酶。此外，该酶可浓度依赖性地被EDTA所抑制，被Cu^2＋所强烈抑制，被Ca^2＋和Mg^2＋所激活，对Zn^2＋则不敏感，表明该酶很可能是一种金属蛋白酶。  相似文献   

宽纹虎鲨软骨细胞体外培养的启动   总被引：4，自引：1，他引：4       下载免费PDF全文

于秋涛  樊廷俊  汪小锋  丛日山  汤志宏  吕翠仙  史振平 《海洋科学》2005,29(3):33-37

以活体宽纹虎鲨(Heterodortus japonicus)的鳃软骨和鳍软骨组织为材料，利用透明质酸酶(hyaluronidase)、Ⅱ型胶原酶(type Ⅱ collagenase)和胰蛋白酶(trypsin)进行消化获得游离软骨细胞，对所得游离细胞连同软骨组织分别用含20％小牛血清的MEM培养液进行体外培养。对软骨细胞体外培养条件的优化结果显示，宽纹虎鲨鳍软骨细胞体外培养的最适pH为7．2～7．6、最佳温度为24℃，成纤维细胞生长因子(bFGF,basic fibroblast growth factor)对软骨细胞作用不显著。培养于pH7．2～7．6的MEM培养液(含20％小牛血清)中的宽纹虎鲨鳍软骨组织，在24℃启动培养3d后便有软骨细胞开始陆续从组织中迁出，新迁出细胞的形态多为圆形，随着培养时间的延长，部分细胞形态逐渐转变成上皮样。  相似文献   

中国对虾酚氧化酶的部分生物化学特性的初步研究   总被引：8，自引：0，他引：8       下载免费PDF全文

汪小锋  樊廷俊 《海洋科学》2003,27(4):71-75

以海捕中国对虾(Penacus chinensis)为材料，运用离心、凝胶过滤柱层析和离子交换柱层析的方法从对虾血淋巴中部分纯化出酚氧化酶。实验又以L-DOPAC为底物，分析各种因子对其活力的影响。结果显示酚氧化酶的最适pH值约为6．0，最适温度为40℃，Cu^2 能强烈抑制酚氧化酶的活性，而Mg^2 则能促进其活性，表明酚氧化酶可能是一种金属酶。  相似文献   

鱼类精子冷冻保存的研究进展   总被引：4，自引：0，他引：4  

汪小锋  樊廷俊 《海洋科学》2003,27(7):28-31

1 研究意义及应用前景 鱼类精子长期冷冻保存的研究和探索,不仅对进一步理解基本的生命进程具有重要意义,而且对鱼类新品种培育和鱼类养殖业也将产生巨大的深远影响。众所周知,由于低温能抑制生物体内的生化反应,因而在长期保存时不发生变异,而且不需要复杂的温度和湿度调节。鱼类精子超低温冷冻保存的研究,对  相似文献   

Effects of Basic Fibroblast Growth Factor and Insulin-like Growth Factor on Cultured Cartilage Cells from Skate Raja porasa   总被引：1，自引：0，他引：1  

樊廷俊  晋凌云  汪小锋 《中国海洋湖沼学报》2003,21(4):305-311

Effects of basic fibroblast growth factor (bFGF) and insulin-like growth factor Ⅱ(IGF-Ⅱ) on cartilage cells from proboscis of skate, Raja porasa Glinther, were investigated in this study. The cartilage cells were cultured in 20% FBS-supplemented MEM medium at 24℃. Twelve hours after culture initiation, the cartilage cells were treated with bFGF and IGF-Ⅱ at different concentration combinations. It was found that 20 ng/ml of bFGF or 80 ng/ml of IGF-Ⅱ was enough to have obvious stimulating effect on the growth and division of skate cartilage cells. Test of bFGF and IGF-Ⅱ together, revealed that 20 ng/ml of bFGF and 80 ng/ml of IGF-Ⅱ together had the best stimulating effect on the growth and division of skate cartilage cells. The cartilage cells cultured could form a monolayer at day 7.  相似文献