应用荧光抗体技术检测牙鲆体内的河流弧菌   总被引：12，自引：0，他引：12  

鄢庆枇  邹文政  纪荣兴  庄峙厦  王小如 《海洋科学》2006,30(4):16-19

用灭活的河流弧菌(Vibrio fluvialis)抗原,注射免疫实验兔,制得凝集价为1∶5 120的抗血清。用试管凝集法检测了抗血清的特异性,再用免疫吸附法去除交叉反应,从而得到高效价、高特异性的抗河流弧菌血清。用所制备的抗血清在实验室中建立起河流弧菌荧光抗体检测技术(FAT),在荧光显微镜下可清楚地看到被标记的病原菌,整个检测过程只需3h。用河流弧菌感染牙鲆(Paralichthys olivaceus),24 h后,用FAT测定牙鲆的血液、肾脏和肝脏中的河流弧菌,在血液中河流弧菌的检出率最高,其次是肾脏,肝脏的检出率最低。以上结果表明:荧光抗体技术可以快速、灵敏、准确地检测出牙鲆体内的河流弧菌。  相似文献   

免疫添加物对大黄鱼血液白细胞数量及其吞噬功能的影响   总被引：14，自引：2，他引：14  

王军  鄢庆枇  苏永全  周永灿  邵勋 《海洋科学》2001,25(9):44-46

采用低聚糖益力素、稳定型维生素C、渔用多维等免疫、营养添加物定期投喂大黄鱼，以粒细胞、淋巴细胞、单核细胞、吞噬百分率、吞噬指数等为指标，跟踪检测试验大黄鱼血液中白细胞组成数量和吞噬细胞吞噬能力的变化。研究结果表明，免疫添加物可以提高大黄鱼血液中白细胞数量和吞噬细胞的吞噬能力，增强大黄鱼的非特异性免疫功能，促进大黄鱼的健康生长。  相似文献   

大黄鱼病原副溶血弧菌单克隆抗体制备及其应用   总被引：5，自引：0，他引：5  

池信才  王军  鄢庆枇  苏永全 《海洋科学》2007,31(8):1-5

用甲醛灭活副溶血弧菌(Vibrio parahaemolyticus)和溶藻弧菌(V.alginolyticus)制成免疫原免疫BALB/c小鼠,利用淋巴细胞杂交瘤技术,获得1株特异的针对副溶血弧菌的单克隆抗体,命名为D6F3H5。腹水及培养上清液抗体的ELISA效价分别为:1∶5 120和1∶1 280,该单克隆抗体与其它细菌没有明显的交叉反应。利用该单克隆抗体和兔抗副溶血弧菌多克隆抗体,建立了检测副溶血弧菌的双抗体夹心ELISA方法。该方法对副溶血弧菌的最小检出量为5×104个/mL。用双抗体夹心ELISA检测大黄鱼(Pseudosciaena crocea)样品,14尾患病大黄鱼中有11尾检出副溶血弧菌,而10尾健康大黄鱼都没有检出副溶血弧菌。由此可见,本试验制备的高特异性的抗副溶血弧菌单克隆抗体,可以用于患病大黄鱼副溶血弧菌的快速诊断。  相似文献   

大黄鱼病原弧菌拮抗菌筛选     

邹文政  鄢庆枇  林文雄  纪荣兴 《海洋科学》2004,28(3):5-9

用平板涂布法从集美海边分离到381株细菌，用平板划线法或点种法检验这些海洋细菌对两株病原弧菌(副溶血弧菌(Vibrio Parahaemolyticus)和溶藻弧菌(Vibrio alginolyticus)的拮抗作用。从中挑选2株对海水养殖动物病原弧菌有较好拮抗作用的细菌，编号为GX75和GZ46。对拮抗菌(GX75和GZ46进行了抗菌谱测定，结果表明，GX75对9株指示菌中的副溶血弧菌、河流弧菌和坎普氏弧菌有较好的拮抗作用，GZ46对副溶血弧菌、溶藻弧菌和坎普氏弧菌有较好的桔抗作用。在营养肉汤中，测定了GX75和GZ46的抗菌作用，表明(GX75和GZ46对副溶血弧菌拮抗作用很明显。  相似文献   

大黄鱼病原弧菌拮抗放线菌的筛选与人工诱变   总被引：4，自引：0，他引：4  

鄢庆枇  王军  苏永全  梁桂洪  麦添成 《台湾海峡》2002,21(2):187-192

从厦门集美海滩底泥分离得到38株放线菌，用琼脂块法测定它们对大黄鱼病原弧菌-溶藻弧菌和副溶血弧菌的拮抗效果，选择两株拮抗效果较好的放线菌进行诱变，测定诱变后各菌株的抗菌效果，并选择抗菌效果较好的菌株进行第二次诱变，如此反复诱变3次，共得到97株放线菌，结果表明；38株放线菌中的22株对两株病原菌有一定的拮抗作用；用紫外线照射可以获得少量对两株病原菌拮抗作用加强的菌株。  相似文献   

致病性副溶血弧菌生物膜形成特性研究     

陈珍  覃映雪  邹文政  徐晓津  邢颜丽  鄢庆枇 《海洋学报(英文版)》2010,29(5):110-116

采用改良的微孔板法测定了12株弧菌的形成生物膜的效果,选择形成生物膜效果最好的副溶血弧菌ND-02,进一步研究了环境因子对其生物膜形成的影响。实验结果显示副溶血弧菌ND-02菌株在静置培养24~36 h后形成成熟的生物膜,在起始菌浓度为10⁷~10⁸CFU/mL形成生物膜的量最大;在30 ℃,NaCl浓度为3%~ 5%,pH偏弱碱性时的生物膜OD₅₉₀值最大;Ca²⁺ 促进副溶血弧菌生物膜的形成,而Mg²⁺ 抑制生物膜的形成;副溶血弧菌在分别经大黄鱼表皮黏液、肠黏液和肝脏提取液包被的的基质上形成生物膜的作用明显,鳃黏液和脾脏提取液中次之,肌肉提取液包被后生物膜形成量最低。以上结果表明,副溶血弧菌ND-02菌株能形成稳定而明显的生物膜,而且生物膜的形成受温度、NaCl浓度、pH值等环境因子的影响。  相似文献   

大黄鱼病原副溶血弧菌拮抗菌的筛选   总被引：1，自引：1，他引：0       下载免费PDF全文

郭国军  覃映雪  陈强  邹文政  鄢庆枇 《海洋学报》2008,30(1):127-134

用点种法从大黄鱼肠道优势菌群中筛选出104株病原性副溶血弧菌的拮抗菌,进一步研究拮抗效果最好的11株拮抗菌的抗菌谱和生长曲线,其中NAC平板上筛选的4株拮抗菌的抗菌范围较广,锰营养琼脂培养基上筛选的3株拮抗菌具有生长优势。用BIOLOG板测定了抗菌谱较广、有一定生长优势3株拮抗菌(R22,Y58和J312)的碳源利用情况,结果表明,3株拮抗菌的碳源谱都比较广,都能利用糖类、有机酸和氨基酸等,而且与鱼类营养的竞争较小。16S rRNA基因同源性分析的结果显示与R22,Y58,J312同源性达99%以上的菌株分别来自弧菌属、芽孢杆菌属和假单胞菌属。进一步对R22,J312和Y58三株拮抗菌进行生化鉴定,结果显示R22为溶藻弧菌,J312为荧光假单胞菌,但Y58的种属未能得到确认。所得到的3株拮抗菌R22,Y58,J312在拮抗病原菌、抗菌谱、生长特性和营养利用等方面都初步满足益生菌的筛选条件,有待进一步检测其安全性和实用效果以便能够成为能实用的益生菌。  相似文献   

Non-specific immune response of bullfrog <Emphasis Type="Italic">Rana catesbeiana</Emphasis> to intraperitoneal injection of bacterium <Emphasis Type="Italic">Aeromonas hydrophila</Emphasis>     

张俊杰  邹文政  鄢庆枇 《中国海洋湖沼学报》2008,26(3):248-255

Non-specific immune response of bullfrog Rana catesbeiana to pathogenic Aeromonas hydrophila was studied to 60 individuals in two groups. Each bullfrog in bacterium-injected group was injected intraperitoneally （i.p.） with 0.2 ml bacterial suspension at a density of 5.2 × 10^6 CFU/ml, while each one in control group injected i.p. with 0.2 ml sterile saline solution （0.85%, w/v）. Three bullfrogs in both groups were sampled at 0, 1, 3, 7, 11, 15 and 20 days post-injection （dpi） for the evaluation of non-specific immune parameters. It was observed that intraperitoneal injection of A. hydrophila significantly increased the number of leucocytes and that of NBT-positive cells in peripheral blood. Significant increases in serum bactericidal activity and serum acid phosphatase activity were also observed in the bacterium-injected frogs when compared with those in the control group. However, a significant reduction was detected in vitro in phagocytosis activity of peripheral blood phagocytes. No significant difference in changes in the number of peripheral erythrocytes, serum superoxide dismutase （SOD） activity, and lysozyme activity was detected between the two groups. It is suggested that bullfrogs may produce a series of non-specific immune reactions in response to the A. hydrophila infection.  相似文献   

海水鱼类寄生虫刺激隐核虫(Cryptocaryon irritans)趋化性研究     

邹峰  苏永全  覃映雪  马英  张艺  韩坤煌  鄢庆枇 《海洋与湖沼》2013,44(4):1003-1007

应用本实验室建立的趋化模型对海水鱼类寄生虫刺激隐核虫(Cryptocaryon irritans)的趋化特性进行研究。结果显示, 刺激隐核虫幼虫在30min时趋化达到饱和, 在温度28℃时趋化率达到最高; 多种硬骨鱼的血清与粘液对刺激隐核虫的幼虫都有着强烈的吸引作用, 刺激隐核虫幼虫对碳水化合物、氨基酸等小分子物质没有趋化作用; 在组织匀浆液中, 刺激隐核虫幼虫对肌肉匀浆液有一定的趋化作用, 对肝、肠、胃的匀浆液都没有趋化作用; 感染后鱼类血清对刺激隐核虫的幼虫有着更加强烈的吸引作用(P<0.01); 18种中草药中的五倍子、大黄、槟榔、苦楝、虎杖、贯众等6种中药草对刺激隐核虫的幼虫有一定的驱虫作用。本文的研究结果有助于深化对刺激隐核虫致病性的认识并对“白点病”的防治有一定的参考价值。  相似文献   

河流弧菌(Vibrio fluvialis)对大黄鱼( Pseudosciaena crocea ) 鳃粘液粘附特性研究   总被引：1，自引：0，他引：1  

朱苏琴  纪荣兴  苏永全  王军  覃映雪  马英  邹文政  李海平  鄢庆枇 《海洋与湖沼》2012,43(2):389-393

采用间接ELISA法(最低检测值约104cfu)研究不同培养条件、不同培养阶段、抗体处理、营养饥饿等对河流弧菌粘附作用的影响。结果表明,经TSB培养的菌体的粘附作用极显著强于TSA培养的菌体的粘附作用(P<0.01);河流弧菌能很好地粘附于大黄鱼粘液,粘附量随菌浓度升高而增大并符合饱和粘附动力学:y=0.1782ln(x)1.6923(R2=0.9810);不同生长阶段河流弧菌的粘附能力不同,在培养初期阶段细菌的粘附量先是随着培养时间的延长而增大,并在培养24h后粘附量达到最大,而后随着培养时间的延长其粘附量急剧下降;抗体处理后河流弧菌的粘附量显著低于对照组(P<0.05);营养饥饿菌体的粘附量明显降低。以上结果表明:海水中的河流弧菌能很好地粘附于大黄鱼鳃粘液,其粘附作用受细菌培养条件、营养状况等自身因素的显著影响。本研究结果有助于了解河流弧菌的流行病学和致病机理。  相似文献