单环刺螠纤溶酶Ⅱ的基因克隆     

韩宝芹  冯伊琳  毕庆庆  刘万顺  隋正红  杨官品 《中国海洋大学学报(自然科学版)》2011,41(7)

单环刺螠纤溶酶( UFE)是由本实验室分离纯化出的l组包括4个分子量组分的纤溶酶,各个组分均有提高受试机体继发性纤溶活性的能力,并具有显著的抗凝活件和纤溶活性以及较好的生物安全性.根据该纤溶酶Ⅱ的N-末端氨基酸序列设计简并引物,通过3'-RACE PCR获得该组分蛋白质的部分编码序列,进一步通过5’-RACE PCR获得单环刺螠纤溶酶基因全长cDNA编码序列906 bp,其中开放阅读框795 bp.该基因全长cDNA BLASTx比对结果表明,其编码产物与丝氨酸蛋白酶家族成员具有较高的同源性,通过PROSITE的ScanProsite软件分析得出,该蛋白质含有1个trypsin domain(第32-264位),在NCBI的CDD数据库中分析结果显示该酶是1种胰蛋白酶样丝氨酸蛋白酶.  相似文献   

甲壳胺寡糖的液相色谱及薄层层析分析   总被引：1，自引：0，他引：1  

房子  刘万顺  位晓娟  韩宝芹 《中国海洋大学学报(自然科学版)》2005,35(1):113-115,120

为了解低分子甲壳胺多糖的抗肿瘤辅助疗效，作者利用高效液相色谱法(HPLC)结合薄层色谱法(TLC)，探讨了SUGAR-KS-802寡糖分析柱分析甲壳胺寡糖的条件，并尝试了几种薄层层析展开剂对甲壳胺寡糖组分的展层条件。结果表明，在HPLC流动相为0．001mol／L NaOH溶液，流速0．2mL／min时，可将混合的标准甲壳胺寡糖成分很好地分离；采用乙酸乙脂：甲醇：水：氨水=5：9：1：1．5混合液作为硅胶薄板展开剂时，可将不同聚合度的甲壳胺寡糖很好地分开，且层析重现性高，糖残基数目和Rf值具有很好的线性关系。2种分析方法结合可以作为1种可靠的甲壳胺寡糖分析方法。  相似文献   

海藻工具酶研究I.褐藻酸降解菌的分离鉴定及其褐藻酸酶形成条件研究     

韩宝芹  戴继勋  王海 《海洋学报》1997,(5)

海带、裙带菜病烂处分离得到５株褐藻酸降解菌，经鉴定属于埃氏交替单胞菌（Ａｌｔｅｒｏｍｏｎａｓｅｓｐｅｊｉａｎａ）（菌株Ａ１０１、Ａ１０２，Ａ１０３、Ａ１０５）、麦氏交替单胞菌（Ａｌｔｅｒｏｍｏｎａｓｍａｃｌｅｏｄｉｉ）（菌株Ａ１０４）．菌株Ａ１０２发酵培养时，褐藻酸形成条件的研究表明，培养基含０．３％～０．６％的褐藻酸钠，０．５％的蛋白胨，ｐＨ７．５，装量为５００ｃｍ３三角瓶装２００ｃｍ３培养基，在２５℃下培养１４４ｈ较为适宜。  相似文献   

硫酸软骨素酶高产菌株的筛选、鉴定和发酵培养条件的研究     

刘万顺  付静芸  常菁  杨艳  韩宝芹 《中国海洋大学学报(自然科学版)》2012,(11):35-39,53

通过透明圈法从土样中初筛到2株产硫酸软骨素酶能力较高的菌株,经复筛,28号菌株产酶能力更强,对该菌株的形态特征和生理生化特性考察,初步鉴定为少动鞘氨醇单胞菌(Sphingomonas paucimobilis)。该菌株的发酵产酶条件研究表明,其产酶最适培养基组分为(%,w/v):酵母粉1.0,硫酸软骨素0.5,NaCl 0.5,KH2PO40.03,MgSO4.7H2O0.5,起始pH=8.5,其余为水。其最适产酶条件为:250mL三角瓶装液量40mL,1%(v/v)接种量,25℃,100r/min培养36h。在最适产酶培养条件下,菌株发酵液中硫酸软骨素酶的活力可达1.2U/mL。本研究筛选出产硫酸软骨素酶高的菌株,并为发酵法制备硫酸软骨素酶提供一定的实验依据。  相似文献   

单环刺螠纤溶酶Ⅲ基因克隆及原核表达简     

韩宝芹  杜芳  毕庆庆 《中国海洋大学学报(自然科学版)》2014,(3):44-49

  相似文献   

产甲壳素酶菌株的发酵条件、酶的分离纯化及酶学性质研究     

韩宝芹  伊金玲  蔡文娣  杨艳  董文  刘万顺 《中国海洋大学学报(自然科学版)》2010,40(10)

利用甲壳素为唯一碳源从土壤中筛选得到1株产甲壳素酶活力较高的菌株HD002,初步鉴定其为Massilia属。确定菌株产甲壳素酶的最适培养基组成为(g/L):(NH4)2SO45,K2HPO40.7,KH2PO40.3,MgSO4.7H2O 1,胶体甲壳素10;最适产酶培养条件为:培养基起始pH值6.0,培养时间192 h,发酵液酶活力达1.314 U/mL。采用70%饱和度硫酸铵盐析、DEAE-Sepharose F.F阴离子交换层析、Sephadex G-75凝胶过滤层析对该甲壳素酶进行纯化,SDS-PAGE证明达到电泳纯。该甲壳素酶的分子量为60.2 kDa,最适反应温度为55℃,最适反应pH值为5.0,Cu2+和Fe3+对酶活力有明显的抑制作用,Ca2+和Na+对酶活力有明显的促进作用。  相似文献   

嫁■消化系统的组织学研究          下载免费PDF全文

余红卫  李太武  苏秀榕  韩宝芹 《海洋科学》2008,32(5):17-21

利用光学显微镜研究了嫁(Cellana toreuma(Reeve))消化系统的组织结构。嫁的消化系统由消化道(口区、食道、嗉囊、胃、肠、直肠、肛门)和消化腺(食道腺、肝胰腺)组成。口中具有齿舌和颚片,分别通过发达的肌肉与软骨相连;食道中部膨大成食道腺;胃和肠非常长。消化道壁由黏膜层、黏膜下层、肌层和外膜构成,黏膜上皮主要为单层柱状上皮细胞,肌层主要为环肌。胃壁和肠壁非常薄,黏膜下层和外膜均不发达。肝胰腺由无数肝小叶组成,每一肝小叶由位于基膜上的单层腺细胞和胚细胞组成。  相似文献   

海边香豌豆（Lathyrus　maritimus）资源开发基础研究     

韩宝芹  陈登勤 《中国海洋大学学报(自然科学版)》1995,(2)

海边香豌豆是生长在青岛海边的野生豆科植物，具有开发前途和应用价值。研究表明，它具有耐盐性、多年生、再生力强、抗逆性强、营养丰富等特点。其核型为Ｋ（２ｎ）＝１４＝６ｍ＋８ｓｍ。  相似文献   

褐藻酸降解酶的制备及其性质研究   总被引：6，自引：0，他引：6       下载免费PDF全文

袁兆慧  韩丽君  林伟  韩宝芹 《海洋科学》2005,29(2):78-80

通过培养褐藻酸降解菌交替单胞菌(Alteromonas sp．)菌株H-1使其产酶，研究了该酶的性质。结果表明，该菌在25℃培养72h时产酶量最高。褐藻酸酶作用的最适底物质量分数为1％～2％。最适pH值为7．5，最适反应温度为40℃，温度升高酶活力急剧下降。  相似文献   

海藻解壁酶研究   总被引：1，自引：0，他引：1  

韩宝芹  刘万顺  王海  戴继勋 《海洋科学》1997,21(3):47-49

海藻生物技术始于50年代初期,其发展较陆生高等植物要缓慢得多。在海藻中缺乏特殊的海藻解壁酶是制约海藻生物技术发展的重要因素,因此在今后的研究中,迫切需要解决海藻解壁酶问题[14]。海藻解壁酶的种类很多,但主要有两个类源[1,2,10,12,14,18,21,22,27～30]。1　动物源的海藻解壁酶研究1980～1984年刘万顺等[23]从海螺消化系统中制备了海螺酶,并用于紫菜、海带、裙带菜和江蓠的单细胞和原生质体分离,为开辟海洋动物源的海藻解壁酶奠定了基础,同时也是酶法制备红藻和褐藻原生质体的首次成功。1982年,唐延林[7]用海螺酶制备紫菜原生质体并再…  相似文献