| 光学活性藻蓝蛋白β亚基的体内重组 |
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| 引用本文： | 关翔宇,QIN Song,张伟杰,TANG Xue-Xi.光学活性藻蓝蛋白β亚基的体内重组[J].中国海洋大学学报(自然科学版),2008,38(4). |
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| 作者姓名： | 关翔宇 QIN Song 张伟杰 TANG Xue-Xi |
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| 作者单位： | 1. 中国海洋大学海洋生命学院生态学实验室,山东,青岛,266003
2. 中科院海洋所实验海洋生物学重点实验室,山东,青岛,266071 |
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| 基金项目： | 中国科学院知识创新工程重要方向项目
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国家高新技术研究发展规划项目计划重点项目
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中国科学院创新团队项目资助 |
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| 摘 要： | 在Synechococcus sp.PCC 7002中,首先发现了特异性催化脱辅基藻蓝蛋白β亚基(153位)与藻蓝胆素(phycocyanobiling, PCB)连接的裂合酶基因cpcT.本实验在Synechocystis sp.PCC 6803中找到与cpcT具有高度同源性的基因slr1649.构建2组相容的重组质粒pCDF-cpcB(C82I)或(C153I)-ho1-pcyA和pRSF-slr1649,cpcB(C82I)和cpcB(C153I)分别编码82和153位被突变的脱辅基藻蓝蛋白β亚基,slr1649编码可能的特异性裂合酶,在大肠杆菌体内生成PCB必需的2个基因(ho1编码血红素氧化酶,pcyA编码藻蓝胆素合成酶),将这些基因共同转化到大肠杆菌诱导表达,利用亲和层析柱对可溶性蛋白进行纯化,产物进行SDS-PAGE、色素蛋白锌电泳和光谱检测.结果表明基因slr1649能够特异性催化CpcB(153位)与PCB的连接,产生了具有光学活性的CpcB(C82I)-PCB,为进一步研究螺旋藻藻蓝蛋白的生物活性奠定了基础.
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| 关 键 词： | C-藻蓝蛋白 定点突变 重组 |
Recombinant Expression of a Fluorescent β-phycocyanin in Escherichia Coli |
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| GUAN Xiang-Yu,QIN Song,ZHANG Wei-Jie,TANG Xue-Xi.Recombinant Expression of a Fluorescent β-phycocyanin in Escherichia Coli[J].Periodical of Ocean University of China,2008,38(4). |
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| Authors: | GUAN Xiang-Yu QIN Song ZHANG Wei-Jie TANG Xue-Xi |
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