| 实时定量RT-PCR方法检测太平洋牡蛎中的诺沃克样病毒 |
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| 引用本文： | 岳志芹,汪 俊,梁成珠,雷质文,高宏伟,徐 彪,朱来华,薛长湖.实时定量RT-PCR方法检测太平洋牡蛎中的诺沃克样病毒[J].海洋科学,2008,32(8):1-4. |
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| 作者姓名： | 岳志芹 汪 俊 梁成珠 雷质文 高宏伟 徐 彪 朱来华 薛长湖 |
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| 作者单位： | 1. 山东出入境检验检疫局技术中心,山东,青岛,266002
2. 中国海洋大学,食品安全实验室,山东,青岛,266003 |
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| 基金项目： | 山东出入境检验检疫局科研基金，浙江省宁波市博士科研项目，新世纪人才基金 |
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| 摘 要： | 建立了Taqman 实时定量RT-PCR方法检测诺沃克样病毒(Norwalk-like Virus,NLV)的方法,并对中国的牡蛎样品进行了分析.选取GⅡ型NLV的RNA聚合酶区域,利用Primer Express 2.0软件设计引物和探针,建立了定量RT-PCR反应体系.将含有NLV扩增片段的质粒10倍梯度稀释,作为标准品进行反应以确定检测灵敏度并制备标准曲线.结果表明,质粒密度在6×106,6×105,6×104,6×103,6×102,6×101,6个拷贝之间,共7个数量级的范围内,定量RT-PCR反应都有"S"型扩增曲线,检测灵敏度为6个拷贝.制备的标准曲线中,病毒拷贝数(X)与Ct值的关系为Ct = -3.36lg X 37.11,相关系数R2=0.998.对中国37批太平洋牡蛎(Crassostrea gigas Thunberg)样品进行了定量检测,有6批样品为阳性,并根据标准曲线测定了NLV的含量.
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| 关 键 词： | 牡蛎 诺沃克样病毒（Norwalk-like virus NLV） 实时定量RT-PCR Taqman探针 |
| 收稿时间： | 2006/5/29 0:00:00 |
| 修稿时间： | 2007/1/10 0:00:00 |
Detection of Norwalk-like virus in oysters (Crassostrea gigas) by real-time quantitative RT-PCR |
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| YUE Zhi-qin,WANG Jun,LIANG Cheng-zhu,LEI Zhi-wen,GAO Hong-wei,XU Biao,ZHU Lai-hua,XUE Chang-hu.Detection of Norwalk-like virus in oysters (Crassostrea gigas) by real-time quantitative RT-PCR[J].Marine Sciences,2008,32(8):1-4. |
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| Authors: | YUE Zhi-qin WANG Jun LIANG Cheng-zhu LEI Zhi-wen GAO Hong-wei XU Biao ZHU Lai-hua XUE Chang-hu |
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| Institution: | YUE Zhi-qin1,WANG Jun2,LIANG Cheng-zhu1,LEI Zhi-wen1,GAO Hong-wei1,XU Biao1,ZHU Lai-hua1,XUE Chang-hu2(1.Technical Center of Sh,ong Entry-Exit Inspection , Quarantine Bureau,Qingdao 266002,China,2.Food Safety Lab of Ocean University of China,Qingdao 266003,China) |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Crassostrea gigas Norwalk-like virus real-time quantitative RT-PCR Taqman probe |
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