| 对虾传染性皮下及造血组织坏死病毒编码蛋白的相互作用研究 |
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| 引用本文： | 陈沈雪,魏永伟,苗亮,陈炯.对虾传染性皮下及造血组织坏死病毒编码蛋白的相互作用研究[J].海洋与湖沼,2016,47(1):205-212. |
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| 作者姓名： | 陈沈雪 魏永伟 苗亮 陈炯 |
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| 作者单位： | 宁波大学海洋学院 生物化学与分子生物学实验室 宁波 315211,宁波大学海洋学院 生物化学与分子生物学实验室 宁波 315211,宁波大学海洋学院 生物化学与分子生物学实验室 宁波 315211,宁波大学海洋学院 生物化学与分子生物学实验室 宁波 315211,宁波大学海洋学院 生物化学与分子生物学实验室 宁波 315211 |
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| 基金项目： | 国家高技术研究发展计划(863计划)项目, 2012AA020101号; 浙江省重大科技专项计划项目, 2013C03045-1号; 宁波市自然科学基金项目, 2014A610182号 |
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| 摘 要： | 采用Matchmaker酵母双杂交系统,将对虾传染性皮下及造血组织坏死病毒(Infection hypodermal and hematopoietic necrosis virus,IHHNV)编码蛋白NS1、NS2和CP序列分别构建到酵母猎物载体p GADT7和诱饵载体p GBKT7上,分别转化至酵母AH109以检测重组猎物载体和诱饵载体的自激活作用及对宿主的毒性作用,发现无自激活作用和毒性作用,随后将重组猎物载体和诱饵载体两两共转至酵母AH109中,涂布于SD/-Leu/-Trp固体培养基上,再点种至SD/-Ade/-His/-Leu/-Trp/X-α-gal固体培养基以鉴定编码蛋白间的相互作用。表型鉴定结果显示,只有共转化有p GADT7-CP/p GBKT7-CP的酵母重组子能够在SD/-Ade/-His/-Leu/-Trp/X-α-gal上生长并显蓝,而其它重组子均不能在其上生长,表明病毒的CP能够自身互作,而其他编码蛋白间无相互作用。为了进一步研究病毒CP自身互作的作用位点,分别从CP的N端和C端截短若干个氨基酸序列,结果发现CP的自身互作是高度敏感的,任何较少氨基酸序列的缺失都将导致其自身互作的丧失。本研究为深入探讨病毒的组装机制和致病机理奠定了理论基础。
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| 关 键 词： | 传染性皮下及造血组织坏死病毒 编码蛋白 相互作用 自身互作 酵母双杂交 |
| 收稿时间： | 9/6/2015 12:00:00 AM |
| 修稿时间： | 2015/11/13 0:00:00 |
INTERACTIONS BETWEEN INFECTIOUS HYPODERMAL AND HEMATOPOIETIC NECROSIS VIRUS (IHHNV) ENCODING PROTEINS OF PENAEID SHRIMP |
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| CHEN Shen-Xue,WEI Yong-Wei,MIAO Liang and CHEN Jiong.INTERACTIONS BETWEEN INFECTIOUS HYPODERMAL AND HEMATOPOIETIC NECROSIS VIRUS (IHHNV) ENCODING PROTEINS OF PENAEID SHRIMP[J].Oceanologia Et Limnologia Sinica,2016,47(1):205-212. |
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| Authors: | CHEN Shen-Xue WEI Yong-Wei MIAO Liang and CHEN Jiong |
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| Institution: | Laboratory of Biochemistry and Molecular Biology,School of Marine Sciences,Ningbo University,Laboratory of Biochemistry and Molecular Biology,School of Marine Sciences,Ningbo University,Laboratory of Biochemistry and Molecular Biology,School of Marine Sciences,Ningbo University,Laboratory of Biochemistry and Molecular Biology,School of Marine Sciences,Ningbo University,Laboratory of Biochemistry and Molecular Biology,School of Marine Sciences,Ningbo University |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Infectious hypodermal and haematopoietic necrosis virus (IHHNV) encoding proteins interaction self-interaction yeast two-hybrid |
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