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| 鱼类类立克次氏体PCR检测方法的建立及初步应用 | |
| 作者单位： | ;1.广州利洋水产科技股份有限公司;2.广州金水动物保健品有限公司;3.山东农业大学动物科技学院 |
| 摘 要： | 根据Gen Bank中类立克次氏体基因的保守序列,设计一对针对鱼类类立克次氏体PCR检测的特异性通用引物,通过对PCR扩增条件的优化,建立快速检测鱼类类立克次氏体的PCR方法,并用该方法对类立克次氏体阳性罗非鱼(Oreochromis nilotica)进行PCR扩增,结果得到与实验设计相符的390 bp的特异性扩增条带,而对健康罗非鱼、乌鳢(Ophiocephalus argus)、海鲈(Dicentrarchus labrax)、中华绒螯蟹(Eriocheir sinensis)及其他对照组的扩增结果为阴性。测序比对结果证实,该PCR方法检测结果准确,最低可检测出约1 pg的类立克次氏体质粒DNA;利用建立的PCR方法,对来自广东、云南、海南、天津、江苏、安徽、湖北等地的252份临床样品进行检测,共检出阳性样品30份,提示该PCR方法可用于类立克次氏体的临床快速检测。 |
| 关 键 词： | 鱼类类立克次氏体 PCR检测 临床应用 |
Development and Primary Application of a PCR Assay for Detection of Piscirickettsia-like Organisms |
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