| 溶藻弧菌免疫胶体金快速检测试纸条的制备 |
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| 引用本文： | 王蓓,梁军,简纪常,鲁义善,蔡双虎,黄郁葱,汤菊芬,蔡佳,吴灶和.溶藻弧菌免疫胶体金快速检测试纸条的制备[J].广东海洋大学学报,2013(4). |
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| 作者姓名： | 王蓓 梁军 简纪常 鲁义善 蔡双虎 黄郁葱 汤菊芬 蔡佳 吴灶和 |
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| 作者单位： | 1. 广东海洋大学 水产学院，广东 湛江 524025; 广东省水产经济动物病原生物学及流行病学重点实验室，广东 湛江 524025; 广东省水产经济动物病害控制重点实验室，广东 湛江 524025
2. 广东省水产经济动物病原生物学及流行病学重点实验室，广东 湛江 524025; 广东省水产经济动物病害控制重点实验室，广东 湛江 524025; 仲恺农业工程学院 广东 广州 510225 |
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| 基金项目： | 国家重点基础研究发展计划前期(2011CB111600)；广东省科技计划项目 |
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| 摘 要： | 采用溶藻弧菌ATCC17749菌体作为抗原免疫新西兰大白兔,制备兔抗溶藻弧菌多克隆抗体;利用柠檬酸钠还原氯金酸法制备胶体金及胶体金-抗体结合物,并将其喷涂在玻璃纤维膜上冷冻干燥;在硝酸纤维素膜上包被兔抗溶藻弧菌多克隆抗体和羊抗兔IgG分别作为检测线和控制线;将处理后的玻璃纤维素膜、硝酸纤维膜、样品垫及吸水纸组装成双抗夹心试纸条,并对试纸条灵敏度、特异性、稳定性进行评价。结果表明,制备的兔抗溶藻弧菌多克隆抗体的效价可达1∶512 000;胶体金溶胶的最佳制备条件为:加入1.8 mL 10 mg/mL的柠檬酸三钠,500 W微波炉中火加热10 min;试纸条检测线和质控线的抗体最佳包被量分别为8.0 mg/mL和1.0 mg/mL;试纸条检测灵敏度为1×106cfu/mL,特异性试验显示,试纸条与哈氏弧菌、副溶血弧菌、霍乱弧菌、拟态弧菌、美人鱼弧菌、弗氏弧菌、河流弧菌、创伤弧菌等8株菌无交叉反应;稳定性试验表明,试纸在4℃干燥条件下能稳定保存5个月以上。制备的溶藻弧菌多克隆检测试纸条可灵敏、较特异地检测源自病鱼的溶藻弧菌,整个检测过程可在10 min内完成,适用于溶藻弧菌的快速检测。
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| 关 键 词： | 溶藻弧菌 胶体金 免疫层析 试纸条 |
Development of Immunochromatographic Colloidal Gold Test Strip for Rapid Detection of Vibrio alginolyticus |
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| WANG Bei,LIANG Jun,JIAN Ji-chang,LU Yi-shan,CAI Shuang-hu,HUANG Yu-cong,TANG Ju-fen,CAI Jia,WU Zao-he.Development of Immunochromatographic Colloidal Gold Test Strip for Rapid Detection of Vibrio alginolyticus[J].Journal of Zhanjiang Ocean University,2013(4). |
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| Authors: | WANG Bei LIANG Jun JIAN Ji-chang LU Yi-shan CAI Shuang-hu HUANG Yu-cong TANG Ju-fen CAI Jia WU Zao-he |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Vibrio alginolyticus colloidal gold immunochromatographic test strip |
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