马氏珠母贝α2-巨球蛋白受体结合区酵母双杂交系统的构建及自激活检测 |
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引用本文: | 曹丹煜,陈刚,张健东,汤保贵,周晖,施钢,潘传豪,黄建盛,王忠良.马氏珠母贝α2-巨球蛋白受体结合区酵母双杂交系统的构建及自激活检测[J].广东海洋大学学报,2019(1):30-34. |
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作者姓名: | 曹丹煜 陈刚 张健东 汤保贵 周晖 施钢 潘传豪 黄建盛 王忠良 |
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作者单位: | 广东海洋大学水产学院 |
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基金项目: | 广东省省级科技计划项目(2015A020209169);国家自然科学基金项目(31202023);广东海洋大学优秀青年骨干教师特别资助计划项目(GDOU2015050214) |
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摘 要: | 【目的】构建马氏珠母贝(Pinctada martensii)酵母双杂交文库及α2-巨球蛋白受体结合区诱饵载体,检测其在酵母细胞中的自激活作用。【方法】利用CLONTECH SMART技术及酵母体内同源重组的方法构建马氏珠母贝酵母双杂交cDNA文库;将α2-巨球蛋白受体结合区克隆至pGADT7载体,并转化AH109酵母感受态细胞,检测自激活作用。【结果与结论】酵母双杂交文库容量为1.11×107克隆/mL,重组率大于90%;菌落PCR结果显示,插入片段长度均在500bp以上;诱饵质粒成功转化至AH109菌株,且无自激活性,符合文库构建指标,可用于文库筛选。
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关 键 词: | 马氏珠母贝 Α2-巨球蛋白 酵母双杂交 自激活检测 |
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