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马氏珠母贝α2-巨球蛋白受体结合区酵母双杂交系统的构建及自激活检测
引用本文:曹丹煜,陈刚,张健东,汤保贵,周晖,施钢,潘传豪,黄建盛,王忠良.马氏珠母贝α2-巨球蛋白受体结合区酵母双杂交系统的构建及自激活检测[J].广东海洋大学学报,2019(1):30-34.
作者姓名:曹丹煜  陈刚  张健东  汤保贵  周晖  施钢  潘传豪  黄建盛  王忠良
作者单位:广东海洋大学水产学院
基金项目:广东省省级科技计划项目(2015A020209169);国家自然科学基金项目(31202023);广东海洋大学优秀青年骨干教师特别资助计划项目(GDOU2015050214)
摘    要:【目的】构建马氏珠母贝(Pinctada martensii)酵母双杂交文库及α2-巨球蛋白受体结合区诱饵载体,检测其在酵母细胞中的自激活作用。【方法】利用CLONTECH SMART技术及酵母体内同源重组的方法构建马氏珠母贝酵母双杂交cDNA文库;将α2-巨球蛋白受体结合区克隆至pGADT7载体,并转化AH109酵母感受态细胞,检测自激活作用。【结果与结论】酵母双杂交文库容量为1.11×107克隆/mL,重组率大于90%;菌落PCR结果显示,插入片段长度均在500bp以上;诱饵质粒成功转化至AH109菌株,且无自激活性,符合文库构建指标,可用于文库筛选。

关 键 词:马氏珠母贝  Α2-巨球蛋白  酵母双杂交  自激活检测
本文献已被 CNKI 维普 等数据库收录!
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