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ELISA技术在水产养殖病害诊断和海洋生物毒素检测中的应用进展
引用本文:张晓辉,邓志平,何丰,卢建平,黄家庆,郑天伦.ELISA技术在水产养殖病害诊断和海洋生物毒素检测中的应用进展[J].海洋学研究,2008,26(4):79-85.
作者姓名:张晓辉  邓志平  何丰  卢建平  黄家庆  郑天伦
作者单位:1. 浙江省水产质量检测中心,浙江,杭州,310012
2. 杭州西湖风景名胜区钱江管理处,浙江,杭州,310008
3. 浙江大学,生物科学系,浙江,杭州,310012
基金项目:浙江省科技厅资助项目  
摘    要:对ELISA技术原理及在水产养殖细菌性病害、病毒性病害及海洋生物毒素检测中的应用情况作一综述。ELSIA技术基础是抗原抗体特异性反应,样品与酶标记物和抗体在板孔中反应,洗去未结合的酶标记物,加入发色剂进行孵育,结合的酶标记物使发色剂颜色发生变化,最后加入终止液,在合适的波长下测定吸光度值。水产养殖中常见的细菌性病原为弧菌和嗜水气单胞菌,利用已建立的ELISA技术对大黄鱼肝脏中副溶血性弧菌含量进行测定,检出率为70%。嗜水气单胞菌的单克隆抗体技术分析也取得了较大进展,对于分泌抗嗜水气单胞菌单克隆抗体的细胞株,ELSIA分析可为快速、准确诊断鱼类嗜水气单胞菌提供可靠方法。20世纪90年代末,已有学者利用ELISA技术测定了草鱼出血病病毒(GCHV)的毒力,30 min内即可从未经提纯的毒液中检测出抗原,比较Dot-ELISA和SPA-CoA测定效果,发现灵敏度比SPA-CoA提高了10倍。对于虾类病毒性病原,ELISA测定主要涉及杆状病毒和白斑综合症病毒,其中对中国对虾杆状病毒检测灵敏度可达到60 ng,对同一个池白斑综合症发病率检测,检出率可达61.8%。利用ELSIA技术测定海洋生物毒素要求快速、方便、准确,日本于20世纪90年代初率先研制出检测DSP主要毒素软海绵酸(OA)的ELISA方法,美国和德国使用抗石房蛤毒素(saxtoxins,STX)和抗neo-STX多克隆抗体建立ELISA法测定PSP,可同时检测STX和neo-STX,灵敏度为40μg/(100 g)。虽然利用ELISA技术测定海洋生物毒素已经取得了一定进展,但是在检测过程中容易发生抗体交叉反应、系列标准毒素缺乏等因素仍然限制该方法的深入应用。

关 键 词:细菌性病害  病毒性病害  海洋生物毒素

The application development of ELISA technology on aquicultural disease diagnosis and oceanic biological toxin detection
ZHANG Xiao-hui,DENG Zhi-ping,HE Feng,LU Jian-ping,HUANG Jia-qing,ZHENG Tian-lun.The application development of ELISA technology on aquicultural disease diagnosis and oceanic biological toxin detection[J].Journal of Marine Sciences,2008,26(4):79-85.
Authors:ZHANG Xiao-hui  DENG Zhi-ping  HE Feng  LU Jian-ping  HUANG Jia-qing  ZHENG Tian-lun
Institution:ZHANG Xiao-hui1,DENG Zhi-ping2,HE Feng1,LU Jian-ping3,HUANG Jia-qing1,ZHENG Tian-lun1
Abstract:
Keywords:ELISA
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