| 哈维氏弧菌GST核酸疫苗制备及其对斜带石斑鱼的免疫保护作用 |
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| 引用本文： | 王海阳,;黄郁葱,;丁燏,;朱帆,;简纪常,;吴灶和.哈维氏弧菌GST核酸疫苗制备及其对斜带石斑鱼的免疫保护作用[J].广东海洋大学学报,2014(4):50-55. |
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| 作者姓名： | 王海阳 ;黄郁葱 ;丁燏 ;朱帆 ;简纪常 ;吴灶和 |
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| 作者单位： | [1]广东海洋大学水产学院; [2]广东省水产经济动物病原生物学及流行病学重点实验室; [3]广东省高等学校水产经济动物病害控制重点实验室,广东湛江524025; [4]仲恺农业工程学院,广东广州510225 |
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| 基金项目： | 国家支撑计划（2012BAD17B03）; 广东省海洋经济创新发展区域示范专项（GD2012-B01-004） |
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| 摘 要： | 通过同源引物从致病性哈维氏弧菌(Vibrio harveyi)ZJ0603基因组中克隆GST的开放阅读框(ORF),构建真核表达质粒pcDNA-GST。大量抽提重组质粒后,于背鳍基部肌肉注射重组质粒免疫斜带石斑鱼(Epinephelus coioides),分析重组质粒的免疫效果。通过核酸水平检测重组质粒在鱼体肝、肌肉、头肾和脾脏组织的分布;用ELISA法检测鱼体血清的抗体水平,用Western-blot检测目的蛋白的表达情况。结果表明:该序列全长615 bp;免疫7 d后,鱼体中均有质粒分布;斜带石斑鱼血清中产生抗GST的高效抗体(1∶4 096);相应的目的蛋白也在鱼体中成功表达。攻毒后,疫苗免疫保护率达80%,表明GST可作为防治哈维氏弧菌病有效候选抗原。
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| 关 键 词： | 哈维氏弧菌 谷胱甘肽硫转移酶 斜带石斑鱼 核酸疫苗 |
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