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鮰爱德华菌黄颡鱼分离株外膜蛋白的抗原性分析
引用本文:李强,刘海燕,黄华,李华.鮰爱德华菌黄颡鱼分离株外膜蛋白的抗原性分析[J].广东海洋大学学报,2011,31(3):85-89.
作者姓名:李强  刘海燕  黄华  李华
作者单位:大连海洋大学辽宁省海洋生物资源与生物修复重点实验室,辽宁大连,116023
基金项目:国家“十二五”科技支撑项目(2011BAD13B03); 海洋公益性行业科研专项(200905020); 辽宁省海洋与渔业厅项目(201005); 辽宁省教育厅高等学校科研计划(2008143)
摘    要:以黄颡鱼"红头病"致病菌——鮰爱德华菌(Edwardsiella ictaluri)A86作为实验菌株,通过十二烷基肌氨酸钠(Sarkosyl)抽提并结合超速离心的方法提取主要外膜蛋白(OMPs),SDS-PAGE图谱分析结果显示,OMPs主要有6条条带,相对分子质量分别为45 000、42 000、41 000、36 000、30 000和22 000。用A86 OMPs免疫新西兰大白兔,获得多克隆抗体22 mL,抗体效价为1∶20 480,抗体按照1∶2 560稀释时具有较高的特异性,仅与迟缓爱德华菌(E.tarda)、海豚链球菌(Streptococcus iniae)和创伤弧菌(Vibrio vulnificus)存在微弱的交叉反应,与鮰爱德华菌参考株及不同地区的分离株呈现特异性结合。多克隆抗体与OMPs的免疫印迹结果显示,主要有2条明显的免疫反应发色带,相对分子质量分别为36 000和30 000,且36 000蛋白染色最为明显。多克隆抗体与包括菌株A86在内的分离自南北方不同地区的10株鮰爱德华菌全菌免疫印迹试验发现,所有受检菌株反应结果相同,主要有4条明显的反应条带,相对分子质量分别为106 000、54 000、36 000和30 000,其中36 000和30 000两条蛋白带染色最深。因此,认为从黄颡鱼体内分离的鮰爱德华菌OMPs中36 000和30 000蛋白具有很好的免疫原性,36 000蛋白尤甚。

关 键 词:鮰爱德华菌  黄颡鱼  外膜蛋白  抗原性

Antigenic Characterization of the Outer Membrane Proteins of Edwardsiella ictaluri, Isolated from Pelteobagrus fulvidraco
LI Qiang,LIU Hai-yan,HUANG Hua,LI Hua.Antigenic Characterization of the Outer Membrane Proteins of Edwardsiella ictaluri, Isolated from Pelteobagrus fulvidraco[J].Journal of Zhanjiang Ocean University,2011,31(3):85-89.
Authors:LI Qiang  LIU Hai-yan  HUANG Hua  LI Hua
Institution:LI Qiang,LIU Hai-yan,HUANG Hua,LI Hua(Key Laboratory of Marine Bio-resoursce Restoration and Habitat Reparation in Liaoning Province,Dalian Ocean University,Dalian 116023,China)
Abstract:Using sodium lauryl sarcosine(Sarkosyl) method combined with super centrifugal purification,the outer membrane proteins(OMPs) were extracted from Edwardsiella ictaluri isolated A86,pathogen of red-headed disease in yellow catfish Pelteobagrus fulvidraco.Subsequently,polyclonal antibody(pAb) against OMPs of strain A86 was produced from New Zealand white rabbit.The result of SDS-PAGE showed the OMPs contained 6 major protein bands with relative molecular mass of 45 000,42 000,41 000,36 000,30 000,and 22 000,r...
Keywords:Edwardsiella ictaluri  Pelteobagrus fulvidraco  outer membrane proteins(OMPs)  antigenicity  
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