红螯螯虾网格蛋白轻链的克隆及制备抗体的检测 |
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引用本文: | 黄家骏,李钫,杨丰.红螯螯虾网格蛋白轻链的克隆及制备抗体的检测[J].应用海洋学学报,2016,35(2):205-210. |
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作者姓名: | 黄家骏 李钫 杨丰 |
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作者单位: | 国家海洋局第三海洋研究所、国家海洋局海洋生物遗传资源重点实验室,福建,厦门361005 |
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基金项目: | 国家973课题资助项目(2012CB114401) |
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摘 要: | 网格蛋白为三脚蛋白复合体,其介导的内吞作用是病毒侵染细胞的常用途径之一.而对虾白斑综合症病毒(white spot syndrome virus,WSSV)是对虾养殖业的主要病原,为了研究分析WSSV的侵染机制及进入宿主细胞的途径,在本研究中,克隆得到红螯螯虾(Cherax quadricarinatus)网格蛋白轻链的c DNA全长,并将其命名为Cq CLC(Genbank登录号为KR075008).进化树分析表明,其与黑腹果蝇(Drosophila melanogaster)的网格蛋白轻链进化距离较近.此外,在其蛋白序列中选择抗原性较好的片段合成多肽,并以此制备单克隆抗体,而后经免疫荧光和western blot检测从中筛选出具有特异性的抗体,为进一步对WSSV侵染虾细胞机制及入胞途径的研究奠定了基础.
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关 键 词: | 海洋生物学 红螯螯虾 网格蛋白轻链 克隆 进化树分析 抗体特异性 |
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