| 大弹涂鱼(Boleophthalmus pectinirostris) Gal-8L基因序列及其细菌凝集活性的鉴定 |
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| 引用本文： | 梁亚芳,史雨红,苗亮,陈炯.大弹涂鱼(Boleophthalmus pectinirostris) Gal-8L基因序列及其细菌凝集活性的鉴定[J].海洋与湖沼,2018,49(2):413-421. |
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| 作者姓名： | 梁亚芳 史雨红 苗亮 陈炯 |
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| 作者单位： | 宁波大学海洋学院生物化学与分子生物学实验室 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金项目，31402323号；浙江省自然科学基金项目，LY14C190007号；宁波市科技创新团队项目，2015C110018号；宁波市科技富民项目，2017C10037号；“水产”浙江省重中之重开放基金，xkzsc1417号。 |
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| 摘 要： | 半乳糖凝集素-8基因(galectin-8,Gal-8)属于凝集素家族一员。已知Gal-8在哺乳动物的先天免疫中发挥重要作用,然而在鱼类中却鲜有报道。本研究通过转录组测序获得大弹涂鱼(Boleophthalmus pectinirostris)半乳糖凝集素-8样基因(galectin-8 like,Bp Gal-8L)c DNA序列。首先确定其序列特征,其次采用实时定量PCR(real-time quantitative PCR,q PCR)的方法鉴定Bp Gal-8L组织表达分布及其与迟缓爱德华氏菌(Edwardsiella tarda)感染相关性;最后分别通过原核表达获得N端和C端CRD区重组蛋白Bp Gal-8L-N和Bp Gal-8L-C,并采用玻片法观察这两个CRD区的细菌凝集活性和糖类结合特性。多重序列比对显示,Bp Gal-8L蛋白含有两个糖识别结构域(carbohydrate recognition domain,CRD),但只有C端的CRD区存在Gal家族典型的β-半乳糖苷糖类结合基序。系统进化树表明Bp Gal-8L属于鱼类Gal-8的一种亚型。q PCR结果显示,Bp Gal-8L基因m RNA在各组织中普遍表达,并且在迟缓爱德华氏菌感染后大弹涂鱼肝和脾中表达量呈上调趋势。细菌凝集实验结果显示,只有Bp Gal-8L-C重组蛋白对检测的5种革兰氏阴性菌及2种革兰氏阳性菌有凝集作用,并与乳糖和脂多糖特异性结合。综上所述,Bp Gal-8L与大弹涂鱼抗菌免疫密切相关,且其N端和C端CRD区发挥不同作用。
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| 关 键 词： | 半乳糖凝集素-8样基因 细菌凝集 糖结合特异性 大弹涂鱼 |
| 收稿时间： | 2017/10/31 0:00:00 |
| 修稿时间： | 2017/11/26 0:00:00 |
Gal-8L OF MUDSKIPPER BOLEOPHTHALMUS PECTINIROSTRIS: CHARACTERIZATION OF THE SEQUENCE AND BACTERIAL AGGLUTINATION ACTIVITY |
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| LIANG Ya-Fang,SHI Yu-Hong,MIAO Liang and CHEN Jiong.Gal-8L OF MUDSKIPPER BOLEOPHTHALMUS PECTINIROSTRIS: CHARACTERIZATION OF THE SEQUENCE AND BACTERIAL AGGLUTINATION ACTIVITY[J].Oceanologia Et Limnologia Sinica,2018,49(2):413-421. |
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| Authors: | LIANG Ya-Fang SHI Yu-Hong MIAO Liang and CHEN Jiong |
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| Institution: | Laboratory of Biochemistry and Molecular Biology, School of Marine Sciences, Ningbo University, Ningbo 315211, China,Laboratory of Biochemistry and Molecular Biology, School of Marine Sciences, Ningbo University, Ningbo 315211, China,Laboratory of Biochemistry and Molecular Biology, School of Marine Sciences, Ningbo University, Ningbo 315211, China and Laboratory of Biochemistry and Molecular Biology, School of Marine Sciences, Ningbo University, Ningbo 315211, China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | galectin-8 like bacterial agglutination carbohydrate-binding specificity Boleophthalmus pectinirostris |
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