| 重组质粒HF443-EGFP的构建及其在赤潮毒素检测中的应用初探 |
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| 引用本文： | 刘洁生,杨维东,车 军,甄 熹,江天久,吴春利.重组质粒HF443-EGFP的构建及其在赤潮毒素检测中的应用初探[J].海洋与湖沼,2003,34(5):566-571. |
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| 作者姓名： | 刘洁生 杨维东 车 军 甄 熹 江天久 吴春利 |
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| 作者单位： | 暨南大学生命科学技术学院,广州,510632 |
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| 基金项目： | 国家重点基础研究发展规划 (973)资助项目 ,2 0 0 1CB4 0 971 0号 ,2 0 0 1CB4 0 970 9号，教育部科学技术研究重点项目资助 ,0 0 2 1 4号，广州市科技攻关课题资助项目 ,2 0 0 1 Z 0 5 6 0 1号，广州市科技项目 ,2 0 0 2J1 C0 0 1 1号 |
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| 摘 要： | 采用基因工程的方法，进行重组质粒HF443一EGFP的构建和在哺乳动物细胞中的表达，并进行了其用于赤潮毒素检测的可能性研究。结果表明，用PCR技术扩增EGFP基因，用XbaⅠ、Hind Ⅲ双酶切并纯化，与同样双酶切并纯化的HF443质粒连接，可构建重组质粒HF443-EGFP；利用Lipofect AMINE2000转染体外培养哺乳动物BIU-87细胞。在培养体系中加入不同浓度的GTX，而后加入Na^ 通道激活剂乌头碱以诱导绿色荧光蛋白表达，荧光显微镜下观察细胞中绿色荧光蛋白表达的变化情况。细胞发出的荧光随毒素浓度的增加而减弱，存在一定的剂量效应关系，提示毒素GTX可显著影响绿色荧光蛋白的表达，重组质粒：HF443-EGFP用于赤潮霉素检测有一定的可行性.
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| 关 键 词： | 绿色荧光蛋白 BIu-87细胞 赤潮毒素 基因工程 |
| 收稿时间： | 2002/8/20 0:00:00 |
| 修稿时间： | 2002年8月20日 |
CONSTRUCTION OF A RECOMBINANT PLASMID HF443-EGFP AND ITS PRIMARY APPLICATION IN DETECTION OF HAB TOXINS |
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| LIU Jie-Shen,YANG Wei-Dong,CHE Jun,ZHEN Xi,JIANG Tian-Jiu and WU Chun-Li.CONSTRUCTION OF A RECOMBINANT PLASMID HF443-EGFP AND ITS PRIMARY APPLICATION IN DETECTION OF HAB TOXINS[J].Oceanologia Et Limnologia Sinica,2003,34(5):566-571. |
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| Authors: | LIU Jie-Shen YANG Wei-Dong CHE Jun ZHEN Xi JIANG Tian-Jiu and WU Chun-Li |
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| Institution: | College of Life Science and Technology, Jinan University;College of Life Science and Technology, Jinan University;College of Life Science and Technology, Jinan University;College of Life Science and Technology, Jinan University;College of Life Science and Technology, Jinan University;College of Life Science and Technology, Jinan University |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | c-fos promoter Green Fluorescent Protein BIU-87 cell HAB toxin |
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