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单细胞凝胶电泳用于检测低温保存的真鲷(Pagrosomus major)精子DNA损伤
引用本文:徐西长,丁福红,李军.单细胞凝胶电泳用于检测低温保存的真鲷(Pagrosomus major)精子DNA损伤[J].海洋与湖沼,2005,36(3):221-225.
作者姓名:徐西长  丁福红  李军
作者单位:1. 中国科学院海洋研究所,青岛,266071;中国科学院研究生院,北京,100039
2. 中国科学院海洋研究所,青岛,266071
基金项目:国家高技术研究发展计划(863计划)课题,2003AA603510号,2001AA621100号
摘    要:应用单细胞凝胶电泳(SCGE)方法,对超低温冷冻保存的真鲷精子DNA的损伤状况进行了检测研究。针对研究对象,在实验过程中对传统的碱性单细胞凝胶电泳在铺胶方法、电泳条件等进行了改进。对精子细胞进行预处理,在碱性电泳液中使核DNA双链解链变性后电泳,EB染色10min后,在荧光显微镜下观察,每次随机观察50个左右的核DNA。结果表明,对荧光显微镜下观察到的精子核按彗尾长度及荧光强度划分等级,出现损伤的精子核DNA的损伤程度主要为轻度损伤和中度损伤,很少见有完全损伤的真鲷精子核。对比真鲷冷冻精液与新鲜精液的精子DNA的损伤状况,表明仅用30%DMSO冷冻精子DNA损伤状况与鲜精差异显著(P>95%),其他冷冻方法保存的精子与鲜精差异不显著(P>95%)。

关 键 词:超低温冷冻保存,真鲷精子,DNA损伤,单细胞凝胶电泳
收稿时间:2004/8/27 0:00:00
修稿时间:2004年8月27日

CRYOPRESERVATION CAUSED SPERM DNA DAMAGE IN RED SEA BREAM PAGROSOMUS MAJOR AND ITS DETECTION
XU Xi-Zhang,DING Fu-Hong and LI Jun.CRYOPRESERVATION CAUSED SPERM DNA DAMAGE IN RED SEA BREAM PAGROSOMUS MAJOR AND ITS DETECTION[J].Oceanologia Et Limnologia Sinica,2005,36(3):221-225.
Authors:XU Xi-Zhang  DING Fu-Hong and LI Jun
Institution:Institute of Oceanology, Chinese Academy of Sciences, Qingdao, 266071; Graduate School, Chinese Academy of Sciences, Beijing, 100039;Institute of Oceanology, Chinese Academy of Sciences, Qingdao, 266071; Graduate School, Chinese Academy of Sciences, Beijing, 100039;Institute of Oceanology, Chinese Academy of Sciences, Qingdao, 266071
Abstract:
Keywords:Cryopreservation  Red sea bream sperm  DNA damage  SCGE
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