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红笛鲷(Lutjanus sanguineus)CD4和CD4-2基因克隆与诱导表达
引用本文:黄郁葱,丁燏,梁秀全,蔡双虎,吴灶和,简纪常.红笛鲷(Lutjanus sanguineus)CD4和CD4-2基因克隆与诱导表达[J].海洋与湖沼,2017,48(3):589-599.
作者姓名:黄郁葱  丁燏  梁秀全  蔡双虎  吴灶和  简纪常
作者单位:广东海洋大学水产学院 湛江 524088;广东省水产经济动物病原生物学及流行病学重点实验室 湛江 524088,广东海洋大学水产学院 湛江 524088;广东省水产经济动物病原生物学及流行病学重点实验室 湛江 524088,广东海洋大学水产学院 湛江 524088;广东省湛江市霞山区农业技术推广中心 湛江 524000,广东海洋大学水产学院 湛江 524088;广东省水产经济动物病原生物学及流行病学重点实验室 湛江 524088,广东省水产经济动物病原生物学及流行病学重点实验室 湛江 524088;仲恺农业工程学院 广州 510225,广东海洋大学水产学院 湛江 524088;广东省水产经济动物病原生物学及流行病学重点实验室 湛江 524088
基金项目:广东省海洋经济创新发展区域示范专项,GD2012-B01-004号;广东省自然科学基金项目,2016A030313748号;大学生创新创业训练计划,CXXL2014020号;国家自然科学基金项目,41240041号。
摘    要:应用RT-PCR和RACE-PCR技术克隆了红笛鲷(Lutjanus sanguineus)CD4和CD4-2基因,并分析了它们在健康鱼不同组织的表达分布及免疫刺激物诱导后的表达变化。CD4基因c DNA序列全长2216bp,包含180bp的5′UTR(untranslated regions)、605bp的3′UTR和1431bp的开放阅读框(open reading frame,ORF),编码476个氨基酸;红笛鲷CD4-2基因c DNA序列全长为1520bp,包含62bp的5′UTR、525bp的3′UTR和933bp的ORF,编码310个氨基酸。CD4分子由信号肽、4个免疫球蛋白样结构域(D1—D4)构成的胞外区、跨膜区和胞浆区组成,CD4-2分子由信号肽、2个免疫球蛋白样结构域(D1—D2)构成的胞外区、跨膜区和胞浆区组成。荧光定量PCR(Real Time Quantitative PCR,q PCR)分析显示红笛鲷CD4和CD4-2基因在健康鱼的胸腺中表达量最高,其次是中肾、鳃、皮肤、脾、头肾和肠。红笛鲷头肾淋巴细胞体外经脂多糖(Lipopolysaccharide,LPS)和刀豆蛋白A(Concanavalin A,Con A)刺激12h后,CD4和CD4-2表达量显著上调(P0.05)。哈维氏弧菌疫苗免疫24h后鳃、头肾、脾脏和肠的表达量显著上升(P0.05)。研究结果为进一步研究鱼类CD4和CD4-2在抗菌免疫反应中的作用提供了基础资料。

关 键 词:红笛鲷  CD4  CD4-2  基因克隆  诱导表达
收稿时间:2016/12/14 0:00:00
修稿时间:2017/1/23 0:00:00

MOLECULAR CLONING AND INDUCED EXPRESSION OF CD4 AND CD4-2 GENES FROM HUMPHEAD SNAPPER LUTJANUS SANGUINEUS
HUANG Yu-Cong,DING Yu,LIANG Xiu-Quan,CAI Shuang-Hu,WU Zao-He and JIAN Ji-Chang.MOLECULAR CLONING AND INDUCED EXPRESSION OF CD4 AND CD4-2 GENES FROM HUMPHEAD SNAPPER LUTJANUS SANGUINEUS[J].Oceanologia Et Limnologia Sinica,2017,48(3):589-599.
Authors:HUANG Yu-Cong  DING Yu  LIANG Xiu-Quan  CAI Shuang-Hu  WU Zao-He and JIAN Ji-Chang
Institution:Fisheries College of Guangdong Ocean University, Zhanjiang 524088, China;Guangdong Provincial Key Laboratory of Pathogenic Biology and Epidemiology for Aquatic Economic Animals, Zhanjiang 524088, China,Fisheries College of Guangdong Ocean University, Zhanjiang 524088, China;Guangdong Provincial Key Laboratory of Pathogenic Biology and Epidemiology for Aquatic Economic Animals, Zhanjiang 524088, China,Fisheries College of Guangdong Ocean University, Zhanjiang 524088, China;Agricultural Technology Promotion Center of Xiashan District, Zhanjiang 524000, China,Fisheries College of Guangdong Ocean University, Zhanjiang 524088, China;Guangdong Provincial Key Laboratory of Pathogenic Biology and Epidemiology for Aquatic Economic Animals, Zhanjiang 524088, China,Guangdong Provincial Key Laboratory of Pathogenic Biology and Epidemiology for Aquatic Economic Animals, Zhanjiang 524088, China;Zhongkai University of Agriculture and Engineering, Guangzhou 510225, China and Fisheries College of Guangdong Ocean University, Zhanjiang 524088, China;Guangdong Provincial Key Laboratory of Pathogenic Biology and Epidemiology for Aquatic Economic Animals, Zhanjiang 524088, China
Abstract:
Keywords:Lutjanus sanguineus  CD4  CD4-2  gene cloning  induced expression
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