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龙须菜(Gracilariopsis lemaneiformis)中两种分支酸代谢酶对温度和水杨酸的响应及其原核表达研究
引用本文:林丽春,吕燕,孙鹏,孙雪,徐年军.龙须菜(Gracilariopsis lemaneiformis)中两种分支酸代谢酶对温度和水杨酸的响应及其原核表达研究[J].海洋与湖沼,2019,50(1):220-227.
作者姓名:林丽春  吕燕  孙鹏  孙雪  徐年军
作者单位:宁波大学海洋学院 宁波315211;宁波大学海洋学院 宁波315211;宁波大学海洋学院 宁波315211;宁波大学海洋学院 宁波315211;宁波大学海洋学院 宁波315211
基金项目:国家自然科学基金项目,31672674号,41376151号。
摘    要:龙须菜(Gracilariopsislemaneiformis)在我国主要用作鲍饵料和琼胶生产原料,但是南方夏季高温限制了龙须菜的栽培和产业化。抗逆植物激素水杨酸(salicylicacid,SA)与分支酸代谢之间存在着密切的联系。本文以两种分支酸代谢酶——异分支酸合成酶(isochorismate synthase,ICS)和分支酸变位酶(chorismatemutase,CM)为研究对象,分析了23℃(常温)和33℃(高温)条件下添加SA对龙须菜中两种分支酸代谢酶编码基因转录水平的影响。结果表明高温和SA不同程度地刺激了两种分支酸代谢酶转录水平的表达,如在3—12h,SA添加后ics表达量分别提高到常温对照组的2.84—4.76倍和高温对照组的1.25—1.62倍;在24h时,cm表达量分别提高到常温对照组的2.73倍和高温对照组的1.82倍。然后,我们将两种酶的编码基因分别转化到原核表达载体pET28a中,结果得到了多以包涵体形式大量表达的重组ICS和CM蛋白,其最佳诱导条件为0.1mmol/LIPTG在16℃诱导24h,并用镍柱初步纯化了重组蛋白。该研究为阐明温度和外源SA对龙须菜中两种分支酸代谢酶的影响规律,以及为从蛋白水平研究这两种代谢酶提供了资料。

关 键 词:龙须菜  水杨酸  异分支酸合成酶  分支酸变位酶  原核表达
收稿时间:2018/8/17 0:00:00
修稿时间:2018/10/28 0:00:00

RESPONSES OF TWO CHOTISMATE METABOLIC ENZYMES TO TEMPERATURE AND SALICYLIC ACID IN GRACILARIOPSIS LEMANEIFORMIS AND THEIR PROKARYOTIC EXPRESSION ANALYSIS
LIN Li-Chun,L&#; Yan,SUN Peng,SUN Xue and XU Nian-Jun.RESPONSES OF TWO CHOTISMATE METABOLIC ENZYMES TO TEMPERATURE AND SALICYLIC ACID IN GRACILARIOPSIS LEMANEIFORMIS AND THEIR PROKARYOTIC EXPRESSION ANALYSIS[J].Oceanologia Et Limnologia Sinica,2019,50(1):220-227.
Authors:LIN Li-Chun  L&#; Yan  SUN Peng  SUN Xue and XU Nian-Jun
Institution:School of Marine Sciences, Ningbo University, Ningbo 315211, China,School of Marine Sciences, Ningbo University, Ningbo 315211, China,School of Marine Sciences, Ningbo University, Ningbo 315211, China,School of Marine Sciences, Ningbo University, Ningbo 315211, China and School of Marine Sciences, Ningbo University, Ningbo 315211, China
Abstract:
Keywords:Gracilariopsis lemaneiformis  salicylic acid  isochorismate synthase  chorismate mutase  prokaryotic expression
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