| 利用引物退火控制技术克隆日本囊对虾性腺差异表达基因 |
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| 引用本文： | 贾锡伟,沈冰玲,张子平,王艺磊,谢芳靖.利用引物退火控制技术克隆日本囊对虾性腺差异表达基因[J].台湾海峡,2011,30(3):349-356. |
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| 作者姓名： | 贾锡伟 沈冰玲 张子平 王艺磊 谢芳靖 |
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| 作者单位： | 1. 集美大学水产学院;集美大学福建省高校水产科学技术与食品安全重点实验室,福建厦门361021
2. 美国德克萨斯州立大学化学与生化系 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金资助项目(30070597); 集美大学创新团队基金资助项目(2008A001) |
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| 摘 要： | 为了解日本囊对虾（Marsupenaeusjaponicus）性腺发育及分化的分子机制，本研究采用改良的引物退火控制技术克隆到了共8个精巢、卵巢的差异表达基因．其中4个为已知基因，分别为凝血酶敏感蛋白基因、皮质棒蛋白基因、增殖细胞核抗原基因和泛素缀合酶基因；4个为未知基因，分别命名为MjACP3-T、MjACP4一T、MjACPl5一T和MjACP4一O基因．采用实时定量PCR方法分析了4个未知基因在性腺发育过程的表达谱，结果表明：MjACP3一T、MjACP4．T和MjACPl5，T基因在日本囊对虾精巢和卵巢中的表达量有显著差异，且在各个时期精巢的表达量均高于卵巢，说明这3个基因可能在精巢的发育中起到某些重要作用．卵巢MjACP4一O基因的表达量变化较大，第5期卵巢的相对表达量达到最高（为1．38），而其他各个阶段的变化较大，在第4期卵巢的相对表达量最低（为0．03）．在精巢中，MjACP4一O基因的表达量随着精巢逐渐发育成熟呈下降趋势．定量PCR结果与引物退火控制技术的结果有着很好的一致性．研究结果表明，引物退火控制技术是一种简单高效的克隆差异表达基因的技术．采用该技术所克隆到的8个精巢、卵巢的差异表达基因，为进一步了解日本囊对虾性腺发育分化的分子机制提供了基础材料．
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| 关 键 词： | 海洋生物学 日本囊对虾 性腺 差异表达基因 引物退火控制技术 |
Cloning differentially expressed genes from the gonads of Marsupenaeus japonicus through annealing control primer technology |
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| JIA Xi-wei,SHEN Bing-ling,ZHANG Zi-ping,WANG Yi-lei,XIE Fang-jing.Cloning differentially expressed genes from the gonads of Marsupenaeus japonicus through annealing control primer technology[J].Journal of Oceanography In Taiwan Strait,2011,30(3):349-356. |
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| Authors: | JIA Xi-wei SHEN Bing-ling ZHANG Zi-ping WANG Yi-lei XIE Fang-jing |
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| Institution: | JIA Xi-wei,SHEN Bing-ling,ZHANG Zi-ping,WANG Yi-lei,XIE Fang-jing(Key Laboratory of Science and Technology for Aquaculture and Food Safety,Fisheries College,Jimei University,Xiamen 361021,China) |
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| Abstract: | To understand the molecular mechanisms of gonad development and maturation in Marsupenaeus japonicus,eight differentially expressed genes of the ovary and testis were cloned using annealing control primer technology(ACP).Four genes were previously known and consisted of thrombospondin,cortical rod protein-2,proliferating cell nuclear antigen gene(PCNA),and ubiquitin-conjugating enzyme E2r(UBE2r) genes.Four other novel genes were identified and named MjACP3-T,MjACP4-T,MjACP15-T,and MjACP4-O gene.The expressi... |
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| Keywords: | marine biology Marsupenaeus japonicus gonad differentially expressed gene annealing control primer technology |
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