产河豚毒素菌株的筛选、鉴定及透析培养 |
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引用本文: | 张宏宇,林涛,武斌,李增鹏,郭文斌,陈明谅.产河豚毒素菌株的筛选、鉴定及透析培养[J].应用海洋学学报,2023,42(2):210-217. |
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作者姓名: | 张宏宇 林涛 武斌 李增鹏 郭文斌 陈明谅 |
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作者单位: | 自然资源部第三海洋研究所,福建 厦门 361005;河北施坦纳生物科技有限公司,河北 石家庄 050011 |
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基金项目: | 自然资源部第三海洋研究所基本科研业务费专项经费(海三科2018016,2019031);福建省杰出青年科学基金(F180304) |
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摘 要: | 河豚毒素(Tetrodotoxin, TTX)在镇静、镇痛、麻醉、戒毒等神经性疾病治疗方面效果显著且无致瘾性,因此具有极好的应用前景,但由于其从河豚体内提取的成本过高,所以难以大量推广应用。越来越多的证据表明TTX来源于河豚体内共生的微生物。我们从野生横纹东方鲀(Takifugu oblongus)肝脏中分离得到了一株产TTX较高的芽孢杆菌3G2(Bacillus sp. 3G2),通过ELISA和胶体金的方法检测到其发酵液TTX含量为35 ng/mL。将该菌株接种于专用透析培养器中,不断流加新鲜培养基实现连续培养,同时实现简化分离工艺,对发酵液进行小鼠生物活性检测、TTX试纸条检测,并通过河豚毒素抗体免疫共沉淀纯化得到TTX粗品后进行高效液相色谱鉴定均表明发酵液中含有TTX且含量较高。本研究通过筛选产TTX的优质菌株进一步了证实河豚毒素外源性假说,并初步验证了透析法生产河豚毒素的优越性,为后续商业应用提供实践性基础。
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关 键 词: | 海洋生物学 河豚毒素 芽孢杆菌 ELISA检测 透析培养 HPLC |
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