| 圆斑星鲽连续性鳃细胞系的建立 |
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| 引用本文： | 樊廷俊,郭雪阳,姜国建,徐晓辉,孙爱,徐彬.圆斑星鲽连续性鳃细胞系的建立[J].中国海洋大学学报(自然科学版),2010,40(9). |
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| 作者姓名： | 樊廷俊 郭雪阳 姜国建 徐晓辉 孙爱 徐彬 |
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| 作者单位： | 中国海洋大学海洋生命学院海洋生物系,山东,青岛,266003 |
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| 基金项目： | 国家高技术研究发展计划项目 |
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| 摘 要： | 为建立圆斑星鲽(Verasper variegatus)鳃细胞系,本文采用胰蛋白酶消化法启动了圆斑星鲽鳃组织的体外培养,并通过对培养液配方和培养条件的优化成功地进行了圆斑星鲽鳃细胞的原代培养和继代培养。结果显示,圆斑星鲽鳃细胞的最适培养液为含有20%胎牛血清(FBS)的DMEM/F-12培养液,培养液最适pH值为7.2,最适培养温度为22℃;通过向20%FBS-DMEM/F-12培养液(pH=7.2)中添加N-乙酰葡萄糖盐酸盐、羧甲基壳寡糖、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)及I型胰岛素样生长因子(IGF-I),在22℃成功启动了圆斑星鲽鳃细胞的原代培养,细胞的贴壁、生长和分裂状态良好,为典型的成纤维样细胞形态,30 d即可形成汇合的细胞单层;经连续继代培养后,已成功建立了连续性圆斑星鲽鳃细胞系,现已继代培养至第76代;该细胞系细胞经液氮冻存复苏后仍保持其原有的成纤维样细胞形态,其贴壁生长状态和增殖速度也与冻存前无差异;生长特性鉴定结果显示,第60代圆斑星鲽鳃细胞系细胞的群体倍增时间为43.6 h,表明细胞的生长分裂依然十分旺盛。染色体分析结果显示,圆斑星鲽鳃细胞系细胞虽然出现了染色体的非整倍性,但其特征性染色体数目仍为46条,并具有其典型的二倍体核型特征(46 t),表明所建立的细胞系确为圆斑星鲽鳃细胞系。该细胞系的建立对于病毒与宿主相互作用机理的研究及病毒疫苗的开发具有重要的理论和应用价值。
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| 关 键 词： | 圆斑星鲽 鳃 原代培养 继代培养 细胞系 |
Establishment of a Continuous Gill Cell Line from Spotted Halibut,Verasper variegatus |
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| FAN Ting-Jun,GUO Xue-Yang,JIANG Guo-Jian,XU Xiao-Hui,SUN Ai,XU Bin.Establishment of a Continuous Gill Cell Line from Spotted Halibut,Verasper variegatus[J].Periodical of Ocean University of China,2010,40(9). |
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| Authors: | FAN Ting-Jun GUO Xue-Yang JIANG Guo-Jian XU Xiao-Hui SUN Ai XU Bin |
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