| 牙鲆FEL1基因的表达及功能分析 |
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| 引用本文： | 李奥运,王宣刚,王欣桐,王志刚,于海洋.牙鲆FEL1基因的表达及功能分析[J].中国海洋大学学报(自然科学版),2020,50(6). |
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| 作者姓名： | 李奥运 王宣刚 王欣桐 王志刚 于海洋 |
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| 作者单位： | 中国海洋大学海洋生命学院,海洋生物遗传学与育种教育部重点实验室,山东青岛266003;中国海洋大学海洋生命学院,海洋生物遗传学与育种教育部重点实验室,山东青岛266003;中国海洋大学海洋生命学院,海洋生物遗传学与育种教育部重点实验室,山东青岛266003;中国海洋大学海洋生命学院,海洋生物遗传学与育种教育部重点实验室,山东青岛266003;中国海洋大学海洋生命学院,海洋生物遗传学与育种教育部重点实验室,山东青岛266003 |
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| 基金项目： | 国家高技术研究发展计划项目;国家水产种质资源平台项目 |
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| 摘 要： | 凝集素(Lectin)是一类能与糖进行非共价可逆结合的蛋白质,具有凝集细胞和聚糖的作用。在牙鲆的集约化养殖过程中,会面临许多病原微生物的入侵,造成大量的经济损失,研究表明鱼卵凝集素(Fish egg lectin)是凝集素超家族中的一员,在硬骨鱼的抗菌免疫反应中发挥作用。在本研究中,克隆验证了牙鲆FEL1基因(Fish egg lectin 1,PoFEL1),其中开放阅读框(Open reading frame, ORF)为675 bp,编码224个氨基酸,蛋白分子量为24.8 kDa。PoFEL1组织表达分析显示,PoFEL1在卵巢、肠以及肝脏中的表达量比较高;胚胎发育过程中PoFEL1表达分析显示,在胚胎发育的早期PoFEL1的表达量比较高,随着胚胎的逐渐成熟,其表达量逐渐降低,呈母源性表达。体外细胞刺激实验表明LPS、PGN、Poly(I∶C)和E.tarda刺激牙鲆卵巢细胞系后,PoFEL1的表达上调。利用牙鲆卵巢细胞研究了PoFEL1蛋白的亚细胞定位,证实其分布在细胞质中。用LPS刺激过表达PoFEL1的牙鲆卵巢细胞系,发现细胞因子p38、IL-6和TNF-α的表达显著上调。通过双荧光素酶检测系统发现,过表达PoFEL1能显著上调NF-κB报告基因的表达,从而引起机体的免疫应答,说明PoFEL1对NF-κB通路可能具有调节作用。以上研究结果说明PoFEL1在牙鲆先天性免疫过程中发挥作用。
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| 关 键 词： | 牙鲆 鱼卵凝集素 母源表达 先天免疫 |
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