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中国明对虾T7噬菌体展示文库的构建与免疫相关基因的淘选
引用本文:刘宁,杜欣军,赵小凡,王金星.中国明对虾T7噬菌体展示文库的构建与免疫相关基因的淘选[J].海洋学报,2007,29(5):102-108.
作者姓名:刘宁  杜欣军  赵小凡  王金星
作者单位:1.山东大学, 生命科学学院, 山东, 济南, 250100;山东泉港药业有限公司, 山东, 济南, 250014
基金项目:国家自然科学基金资助(30470222),高等学校博士学科点专项科研基金(20060422034)资助
摘    要:利用淘选噬菌体展示文库的方法,获取中国明对虾(Fenneropenaeus chinensis)的免疫相关基因.首先用中国明对虾的血细胞mRNA构建了其T7噬菌体展示文库,文库滴度达到1.1×1011pfu/cm3,然后用不同的配体(脂多糖/几丁质/不同的细菌)进行文库淘选.淘选3轮后随机挑取数个噬菌斑,用T7 select 10-3b载体引物扩增插入片段,将不同长度的片段克隆入pMD 18-T载体后进行测序.把基因序列在GenBank数据库进行BLAST搜索比对,同时在ExPASy进行编码蛋白质的结构和性质的预测.经不同配体淘选,获得了16个基因片段,其中围食膜蛋白、蛋白质精氨酸N端转甲基酶、血小板反应素、RNA结合蛋白、核自身免疫精蛋白等基因,首次在中国明对虾中发现.

关 键 词:T7噬菌体展示    先天免疫    病原相关分子模式    中国明对虾
文章编号:0253-4193(2007)05-0102-07
收稿时间:3/8/2006 12:00:00 AM
修稿时间:2006-03-08

Panning for immune-related genes from T7 phage display library constructed using Chinese shrimp's hemocyte RNA
LIU Ning,DU Xin-jun,ZHAO Xiao-fan and WANG Jin-xing.Panning for immune-related genes from T7 phage display library constructed using Chinese shrimp''''s hemocyte RNA[J].Acta Oceanologica Sinica (in Chinese),2007,29(5):102-108.
Authors:LIU Ning  DU Xin-jun  ZHAO Xiao-fan and WANG Jin-xing
Institution:1.School of Life Sciences Shandong University, Jinan 250100, China;Shandong Quangang Pharmaceutical Con Led Jinan 250014, China2.School of Life Sciences Shandong University, Jinan 250100, China
Abstract:
Keywords:T7 phage display  innate immunity  pathogen associated molecular patterns  Chinese shrimp
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