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缢蛏生物钟基因Tim的鉴定、昼夜表达模式及对性激素分泌的影响
引用本文:郦琪钧,郑向阳,柳燕子,严玉箫,陈妍蕾,姚韩韩,董迎辉.缢蛏生物钟基因Tim的鉴定、昼夜表达模式及对性激素分泌的影响[J].海洋学报,2023(12):101-111.
作者姓名:郦琪钧  郑向阳  柳燕子  严玉箫  陈妍蕾  姚韩韩  董迎辉
作者单位:1. 浙江万里学院生物与环境学院浙江省水产种质资源高效利用技术研究重点实验室;2. 宁海海洋生物种业研究院
基金项目:国家自然科学青年基金项目(31902393);;国家海洋水产种质资源库项目(2023);
摘    要:Tim(Timeless)是继Per基因发现后的第2个核心生物钟基因,在动物繁殖调控中发挥重要作用。为探讨生物钟基因Tim对缢蛏夜间产卵的调控作用,本研究克隆了缢蛏Tim基因的cDNA全长序列并进行序列分析,利用qRT-PCR和免疫荧光技术研究了Tim基因/蛋白在不同组织中的昼夜表达模式,并用siRNA干扰技术初步研究了Tim基因对性激素分泌的影响。结果显示,缢蛏Tim基因开放阅读框序列为3 090 bp,编码1 029个氨基酸,具备3个保守结构域(TIMELESS superfamily、TIMELESS_C和FIil);Tim基因在缢蛏各个组织中均有表达,其中在肝胰腺、水管、卵巢、精巢中的表达水平较高;Tim基因在卵巢和精巢中呈现昼夜规律性表达,均在白天12:00–18:00较高,夜间00:00–06:00较低;Tim蛋白主要定位在肝胰腺的肝细胞、水管末端的上皮细胞、卵巢的成熟卵母细胞及精巢的精子细胞中,且在卵巢和精巢中的阳性信号均是白天12:00稍强于夜间00:00;siRNA干扰后,Tim基因在精巢、卵巢中的表达量均在干扰后第3~7天显著下降(P <0.05),而精巢中睾...

关 键 词:缢蛏  生物钟  Tim  基因表达  siRNA  性激素
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