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黄鳍鲷白细胞介素1β基因的克隆及其在大肠杆菌中的表达
引用本文:李建柱,江世贵.黄鳍鲷白细胞介素1β基因的克隆及其在大肠杆菌中的表达[J].热带海洋学报,2006,25(2):37-43.
作者姓名:李建柱  江世贵
作者单位:1. 中国水产科学研究院南海水产研究所,广东,广州,510300;上海水产大学生命科学与技术学院,上海,200090
2. 中国水产科学研究院南海水产研究所,广东,广州,510300
摘    要:采用同源克隆和RACE-PCR(Rap id amp lification of DNA ends-PCR)技术,从黄鳍鲷Acanthopgrus latus中克隆了白细胞介素1β(interleuk in-1,βIL-1β)基因的全长cDNA序列。黄鳍鲷IL-1β的cDNA全长共1 242 bp,5端非编码区(UTR)为121 bp,3端非编码区(UTR)为342 bp,开放阅读框(open read ing fram e,ORF)为762 bp,编码一条253个氨基酸残基的多肽,分子量约为28.5kDa,理论等电点为5.55,含有2个潜在的糖基化位点。同源性分析表明与其它鱼类和脊椎动物的IL-1β序列具有较高的同源性。利用软件S ignalP分析表明它不存在信号肽序列,氨基酸序列中不存在IL-1β转换酶(interleuk in-1βconverting enzym e,ICE)剪切位点,推导可能成熟肽为从第85位氨基酸开始共169个氨基酸残基的多肽,分子量约为18.9kDa。将此成熟肽序列克隆入pQE30质粒构建表达载体pQE30-IL1β,并在大肠杆菌Escherichia coliM15(pREP4)中进行诱导表达,获得了分子量约为21 kDa的特异性融合蛋白。

关 键 词:黄鳍鲷Acanthopagrus  latus  IL-1β  RACE  克隆  序列分析  表达
文章编号:1009-5470(2005)02-0037-07
收稿时间:2005-03-16
修稿时间:2005-08-16

Molecular cloning of interleukin-1β gene from Acanthopagrus latus (Houttuyn) and its expression in Escherichia coli
LI Jian-zhu,JIANG Shi-gui.Molecular cloning of interleukin-1β gene from Acanthopagrus latus (Houttuyn) and its expression in Escherichia coli[J].Journal of Tropical Oceanography,2006,25(2):37-43.
Authors:LI Jian-zhu  JIANG Shi-gui
Institution:1. South China Sea Fisheries Research Institute, Chinese Academy of Fishery Sciences, Guangzhou 510300, China;2. Shanghai Fisheries University, Shanghai 200090, China
Abstract:
Keywords:RACE
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