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九孔鲍BMP-2基因cDNA克隆及表达分析
引用本文:艾加林,栗志民,刘建勇,申玉春.九孔鲍BMP-2基因cDNA克隆及表达分析[J].海洋科学,2018,42(8):107-115.
作者姓名:艾加林  栗志民  刘建勇  申玉春
作者单位:广东海洋大学 水产学院,广东海洋大学 水产学院;湛江市海洋生态与养殖环境重点实验室,广东海洋大学 水产学院,广东海洋大学 水产学院;湛江市海洋生态与养殖环境重点实验室
基金项目:深圳市大鹏新区产业发展专项资金科技研发项目(KY20170211); 湛江市财政资金科技专项(2015A06006)
摘    要:为探究BMP-2基因在九孔鲍(Haliotisdiversicolorsupertexta)中的功能,采用cDNA末端快速扩增(RACE)技术从九孔鲍外套膜中获得了BMP-2基因cDNA全长,并用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测了BMP-2基因在各组织和发育时期的表达水平。结果表明:九孔鲍BMP-2基因cDNA全长2572bp,其中5′非编码区(5′UTR)123bp, 3′非编码区(3′UTR)1150bp,开放阅读框(ORF)为1299 bp,编码432个氨基酸,其分子质量为48.59ku,理论等电点(pI)为9.84;具有N端信号肽(1-39 aa)、TGF-β前肽区域(63-294 aa)和TGF-β成熟肽区域(331-432 aa),以及蛋白酶水解位点RLRR (272-275 aa)和7个保守的半胱氨酸残基,符合TGF-β超家族蛋白典型结构特征。系统进化树结果显示九孔鲍BMP-2基因和耳鲍聚为一支。qRT-PCR结果表明BMP-2基因在九孔鲍的6个组织中均有表达,在足、右侧壳肌、外套膜及肝脏中显著高表达;在检测的7个发育时期均表达,其中在受精卵、4细胞、8细胞、原肠胚、稚鲍时期表达量显著高于卵、幼鲍时期。研究表明BMP-2基因可能在九孔鲍贝壳形成中具有重要作用。

关 键 词:九孔鲍    BMP-2    cDNA    基因克隆
收稿时间:2018/1/21 0:00:00
修稿时间:2018/3/6 0:00:00

Molecular cloning and expression analysis of BMP-2 cDNA in Haliotis diversicolor supertexta
AI Jia-lin,LI Zhi-min,LIU Jian-yong and SHEN Yu-chun.Molecular cloning and expression analysis of BMP-2 cDNA in Haliotis diversicolor supertexta[J].Marine Sciences,2018,42(8):107-115.
Authors:AI Jia-lin  LI Zhi-min  LIU Jian-yong and SHEN Yu-chun
Abstract:
Keywords:Haliotis diversicolor supertexta  BMP-2  cDNA  molecular cloning
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