| 中国明对虾体壁N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶的分离纯化及酶学性质 |
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| 引用本文： | 林建城,林大河,林秀春.中国明对虾体壁N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶的分离纯化及酶学性质[J].海洋科学,2014,38(8):52-58. |
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| 作者姓名： | 林建城 林大河 林秀春 |
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| 作者单位： | 莆田学院 环境与生物工程学院,福建 莆田,351100 |
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| 基金项目： | 福建省高校服务海西重点建设资助项目(2008HX02); 福建省教育厅科技项目(JB04175); 莆田学院科研基金资助项目(2004031) |
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| 摘 要： | 为了探讨对虾N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(EC3.2.1.52,NAGase)的分离纯化及其酶学性质,作者以中国明对虾(Fenneropenaeus chinensis)体壁为材料,通过硫酸铵沉淀分级分离、SephadexG-100柱层析和DEAE-32离子交换柱层析纯化,获得聚丙烯酰胺凝胶电泳纯的N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶酶制剂,纯化酶比活力为3938.56U/mg。通过SDS-PAGE凝胶电泳,测得该酶亚基分子量为48.88 kD。酶的最适pH为6.0,最适温度为45℃;该酶在pH 6.0~9.0区域较稳定,温度稳定性范围是20~35℃,45℃下处理1 h酶活力丧失65.04%。酶水解对硝基苯-N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷的Km为0.229 mmol/L,Vmax为5.00μmol/(L·min)。进一步研究金属离子对酶活力的影响,结果表明:Li+、Na+和Ba2+对酶没有明显影响,Mg2+、Ca2+、Mn2+、Co2+、Fe3+和Al3+对酶均有不同程度的激活作用,Cu2+、Zn2+和Pb2+对酶呈抑制作用,1.0 mmol/L Hg2+对酶呈激活作用,而10 mmol/L Hg2+使酶活力降低42.37%。
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| 关 键 词： | 中国明对虾(Fenneropenaeus chinensis) 体壁 N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶 分离纯化 酶学性质 |
| 收稿时间： | 7/6/2013 12:00:00 AM |
| 修稿时间： | 2014/1/12 0:00:00 |
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