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企鹅珍珠贝非致死性DNA提取方法的研究
引用本文:陈一,刘二田,战欣,顾志峰,王爱民.企鹅珍珠贝非致死性DNA提取方法的研究[J].海洋科学,2023,47(2):55-62.
作者姓名:陈一  刘二田  战欣  顾志峰  王爱民
作者单位:海南大学海洋学院, 南海海洋资源利用国家重点实验室, 海南 海口 570228
基金项目:国家自然科学基金项目(31860727)
摘    要:在企鹅珍珠贝遗传育种研究中,为保证在贝类存活的条件下获得其DNA信息,采用企鹅珍珠贝(Pteria penguin)贝壳边缘和足丝研究非致死性DNA提取方法。不同于贝壳获取过程中会对实验贝体产生一定损伤,足丝是无生命的细胞外纤维束,其获取方法简单且属于非损伤性取样,对实验贝几乎无伤害,是潜在的获取具足丝贝类基因组DNA的优良材料。本研究采用脱钙与未脱钙两种处理方式,并结合海洋动物组织基因组DNA提取试剂盒法及有机溶剂萃取法(OSE)提取贝壳及足丝DNA,对获得的贝壳DNA及足丝DNA进行PCR扩增。结果显示,足丝有机溶剂法(OSE法)提取效率显著高于贝壳DNA提取方法,脱钙足丝与未脱钙足丝的DNA提取效率无显著差异,分别为(0.016 7±0.002 9)μg/mg和(0.016 1±0.003 1)μg/mg。未脱钙足丝的OSE法获得的DNA产物纯度最优, A260/280值为1.400 0±0.040 0,A260/230值显著高于贝壳DNA及足丝DNA的其他提取方法,为0.910 0±0.080 0。除脱钙贝壳OSE法外,其他所有DNA提取方法均可用于后续PCR扩增,测序结果表明...

关 键 词:企鹅珍珠贝  非致死性  贝壳DNA提取  足丝DNA提取
收稿时间:2022/3/15 0:00:00
修稿时间:2022/9/10 0:00:00

Nonlethal DNA extraction methods for Pteria penguin
CHEN Yi,LIU Er-tian,ZHAN Xin,GU Zhi-feng,WANG Ai-min.Nonlethal DNA extraction methods for Pteria penguin[J].Marine Sciences,2023,47(2):55-62.
Authors:CHEN Yi  LIU Er-tian  ZHAN Xin  GU Zhi-feng  WANG Ai-min
Institution:College of Ocean, State Key Laboratory of Marine Resource Utilization in South China Sea, Hainan University, Haikou 570228, China
Abstract:
Keywords:Pteria penguin  non-lethal  shell DNA extraction  byssus DNA extraction
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