| TaqMan-MGB探针法快速检测对虾Taura 综合征病毒的研究 |
| |
| 引用本文： | 韦信贤,童桂香,谢宗升,黎小正,吴祥庆,廖永志,黄国秋.TaqMan-MGB探针法快速检测对虾Taura 综合征病毒的研究[J].海洋科学,2011,35(9):37-42. |
| |
| 作者姓名： | 韦信贤 童桂香 谢宗升 黎小正 吴祥庆 廖永志 黄国秋 |
| |
| 作者单位： | 1. 广西渔业病害防治环境监测和质量检验中心,广西南宁530021／上海海洋大学水产与生命学院,上海201306
2. 广西渔业病害防治环境监测和质量检验中心,广西南宁,530021 |
| |
| 基金项目： | 广西壮族自治区直属公益性科研院所基本科研业务费专项资金项目(2060302 GXIF-2009-05) |
| |
| 摘 要： | 为建立Taura综合征病毒（Taura syndrome virus，简称TSV）的TaqMan—MGB探针荧光定量RT-PC方法，根据TSV衣壳蛋白基因保守序列设计引物和TaqMan—MGB探针，扩增产物长度为118bp。将PCR产物克隆到pGM—T载体，重组质粒经筛选鉴定、SalⅠ单酶切，得到线性化转录模板DNA，经体外转录获得标准品RNA。以体外转录的RNA作为模板，进行一步法荧光定量RT-PCR反应，根据RNA模板拷贝数与Ct（Cycle threshold，Ct）值制备了标准曲线，制作的标准曲线在2×10^1拷贝／μL≤TSV RNA≤2×10^7拷贝／此的范围内具良好的线性关系，可以用于TSV的定量分析，检测灵敏度为20个拷贝数。特异性、重复性试验结果表明，该方法对SPF对虾组织RNA没有扩增反应，表现出良好的特异性；组内和组间实验变异系数分别为0．32％～1．84％和0．79％-2．71％。利用TaqMan—MGB探针建立检测TSV的一步法荧光定量RT-PCR方法可用于对虾TSV的检测。
|
| 关 键 词： | TSV Taqman-MGB探针 一步法荧光定量 RT-PCR |
| 收稿时间： | 1/7/2011 12:00:00 AM |
| 修稿时间： | 7/9/2011 12:00:00 AM |
TaqMan-MGB probe real-time fluorescence quantitative RT-PCR for rapid detection of taura syndrome virus in shrimps |
| |
| WEI Xin-xian,TONG Gui-xiang,XIE Zong-sheng,LI Xiao-zheng,WU Xiang-qing,LIAO Yong-zhi,HUANG Guo-qiu.TaqMan-MGB probe real-time fluorescence quantitative RT-PCR for rapid detection of taura syndrome virus in shrimps[J].Marine Sciences,2011,35(9):37-42. |
| |
| Authors: | WEI Xin-xian TONG Gui-xiang XIE Zong-sheng LI Xiao-zheng WU Xiang-qing LIAO Yong-zhi HUANG Guo-qiu |
| |
| Institution: | WEI Xin-xian1,2,TONG Gui-xiang1,XIE Zong-sheng1,LI Xiao-zheng1,WU Xiang-qing1,LIAO Yong-zhi1,HUANG Guo-qiu1(1.Center of Disease Prevention and Cure,Environmental Monitoring and Quality Monitoring of Guangxi Fishery,Nanning 530021,China,2.Shanghai Ocean University,College of Fisheries and Life Science,Shanghai 201306,China) |
| |
| Abstract: | |
| |
| Keywords: | TSV TaqMan-MGB probe one step real-time RT-PCR |
| 本文献已被 CNKI 万方数据 等数据库收录！ |
| 点击此处可从《海洋科学》浏览原始摘要信息 |
| 点击此处可从《海洋科学》下载免费的PDF全文 |
|
