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| 实时荧光定量PCR检测鳜IgM mRNA标准品质粒的构建 | |
| 引用本文： | 刘雨果,潘厚军,陈偿,巩华,石存斌,吴淑勤.实时荧光定量PCR检测鳜IgM mRNA标准品质粒的构建[J].广东海洋大学学报,2008,28(6). |
| 作者姓名： | 刘雨果 潘厚军 陈偿 巩华 石存斌 吴淑勤 |
| 作者单位： | 1. 广东海洋大学水产学院,广东,湛江,524088;中国水产科学研究院珠江水产研究所,广东,广州,510380 2. 中国水产科学研究院珠江水产研究所,广东,广州,510380 3. 中国科学院南海海洋研究所,广东,广州,510380 |
| 基金项目： | 国家科技支撑计划 ， 广东省自然科学基金 |
| 摘 要： | 利用SYBR Green I荧光定量PCR技术,建立鳜IgM-DNA定量标准品的制备方法。从浸泡免疫后的鳜头肾中提取总RNA逆转录合成cDNA,对目的片段进行PCR扩增、电泳纯化、T-A克隆及测序鉴定。将所得预期质粒梯度稀释后构建标准曲线并进行融解曲线分析。结果表明,当标准品的浓度在3.29×102～3.29×108拷贝/μL时,模板浓度与循环阈值(Ct)间的线性关系良好,相关系数r2达到0.999;融解曲线分析显示具特异的单个峰,表明扩增产物特异性非常好。此法制备的重组质粒标准品可用于对鳜IgM基因的转录水平进行测定。 |
| 关 键 词： | 鳜 IgM基因 实时荧光定量PCR |
Construction of the Standards for Detecting IgM mRNA of Siniperca chuatsi with Real-time Quantitative PCR |
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| LIU Yu-guo,PAN Hou-jun,CHEN Chang,GONG Hua,SHI Cun-bin,WU Shu-qin.Construction of the Standards for Detecting IgM mRNA of Siniperca chuatsi with Real-time Quantitative PCR[J].Journal of Zhanjiang Ocean University,2008,28(6). | |
| Authors: | LIU Yu-guo PAN Hou-jun CHEN Chang GONG Hua SHI Cun-bin WU Shu-qin |
| Institution: | LIU Yu-guo1,2,PAN Hou-jun2,CHEN Chang3,GONG Hua2,SHI Cun-bin2,WU Shu-qin2(1.Guangdong Ocean University,Zhanjiang 524088,China,2.Pearl River Fisheries Research Institute,CAFS,Guangzhou 510380,3.South China Sea Institute of Oceanology,CAS,China) |
| Abstract: | |
| Keywords: | Siniperca chuatsi IgM gene real-time quantitative PCR |
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