| 青鳉foxl2基因敲除突变体的构建与表型分析 |
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| 引用本文： | 周运迪,吴星星,赵海萍,罗大极.青鳉foxl2基因敲除突变体的构建与表型分析[J].广东海洋大学学报,2019(2). |
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| 作者姓名： | 周运迪 吴星星 赵海萍 罗大极 |
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| 作者单位： | 武汉大学基础医学院;中国科学院水生生物研究所淡水生态与生物技术国家重点实验室 |
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| 摘 要： | 【目的】建立青鳉(Oryziaslatipes)foxl2基因突变体材料,为阐释foxl2基因功能提供良好的动物模型和研究基础。【方法】利用CRISPR/Cas9技术敲除青鳉foxl2基因,建立突变体材料。观察foxl2基因突变体的第二性征、性腺等形态特征;组织学分析性腺结构与性腺中细胞类型;用定量PCR检测性腺发育相关基因的表达情况。【结果】通过CRISPR/Cas9技术成功敲除青鳉foxl2基因,建立foxl2基因缺失4个碱基的青鳉突变体。从第二性征与性腺表型上,foxl2-/-突变体均表现为生理雄性;组织切片分析发现,foxl2-/-突变体的性腺结构与野生型卵巢和野生型精巢均有显著差异,存在退化的核仁外周卵母细胞与精子,提示foxl2-/-的性腺在组织结构上类似精巢;定量PCR结果显示,foxl2-/-突变体中雄性性腺发育关键基因sox9b、gsdf、amh等的表达量升高,雌性性腺发育关键基因cyp19a1a等的表达量下降。【结论】通过CRISPR/Cas9技术成功建立青鳉foxl2基因缺失的突变体,foxl2-/-突变体有遗传雌性、生理雄性的表型特征,foxl2对维持青鳉性腺功能有重要作用。
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| 关 键 词： | 青鳉 foxl2 基因敲除 CRISPR/Cas9 性腺发育 |
Generation and Phenotype Analysis on foxl2 Mutant in Medaka,Oryzias latipes |
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