菲律宾蛤仔(Ruditapes philippinarum)漆酶型酚氧化酶的纯化及特性分析     

蒋经伟  邢婧  战文斌 《海洋与湖沼》2012,43(2):294-298

采用非变性电泳结合特异性底物发色方法从菲律宾蛤仔血细胞中分离出一种酚氧化酶,研究了该酶的酶促反应动力学参数,金属离子、抑制剂对酶活的影响。结果表明,分离获得的酚氧化酶分子量约为563kDa;对底物邻苯二酚、左旋多巴(L-DOPA)、多巴胺、对苯二酚的米氏常数Km分别为0.42、1.60、1.79和1.76mmol/L;酶的活性在Mg2+、Zn2+、Mn2+、Fe2+、Cu2+和Ca2+浓度为5、10、20、30mmol/L时受到抑制;酶的活性可被抑制剂抗坏血酸、二乙基二硫代氨基甲酸钠(DETC)、半胱氨酸、亚硫酸钠、柠檬酸、乙二胺四乙酸二钠(EDTA)、叠氮钠和硫代尿素等抑制。根据底物特异性、抑制剂等结果,所分离获得的酚氧化酶属于漆酶型的含铜酚氧化酶。  相似文献   

中国对虾酚氧化酶的部分生物化学特性的初步研究   总被引：8，自引：0，他引：8       下载免费PDF全文

汪小锋  樊廷俊 《海洋科学》2003,27(4):71-75

以海捕中国对虾(Penacus chinensis)为材料，运用离心、凝胶过滤柱层析和离子交换柱层析的方法从对虾血淋巴中部分纯化出酚氧化酶。实验又以L-DOPAC为底物，分析各种因子对其活力的影响。结果显示酚氧化酶的最适pH值约为6．0，最适温度为40℃，Cu^2 能强烈抑制酚氧化酶的活性，而Mg^2 则能促进其活性，表明酚氧化酶可能是一种金属酶。  相似文献   

日本蟳酚氧化酶的分离纯化及其部分生物化学性质研究     

杨玲玲  樊廷俊  丛日山  汤志宏  孙文杰  刘光兴  孟祥红  朱丽岩 《海洋科学》2008,32(2):29-35

利用离子交换层析和凝胶过滤层析等方法,从日本(Charybdis japonica)血淋巴中分离纯化出了酚氧化酶,并以L-二羟苯丙氨酸(L-DOPA)作为特异性底物对其生化性质和酶性质进行了研究。结果表明,酚氧化酶和酚氧化酶原的分子质量分别为64.5 ku和69.5 ku。以L-DOPA为底物对酚氧化酶纯品进行研究发现,其最适pH值为6.0、最适温度为40℃。对底物L-DOPA和儿茶酚的米氏常数Km值分别为3.41和7.97 mmol/L。该酶对亚硫酸钠、苯硫脲极为敏感,对硫脲、苯甲酸非常敏感,表明该酶很可能是一种儿茶酚酶型的酶。此外,EDTA,DETC,Zn2 ,Mg2 和Cu2 均能显著抑制该酶活性,且10 mmol/L Cu2 能有效地回复该酶被DETC所抑制的酶活性,表明该酶确为一种Cu-金属酶。  相似文献