三疣梭子蟹几丁质酶基因(PtCht6)的克隆及其在免疫中的功能分析     

宋柳  吕建建  王磊  孙东方  刘萍 《海洋与湖沼》2019,50(5):1080-1090

几丁质酶(chitinase)在甲壳动物的蜕皮、消化和免疫等很多生物学过程中发挥重要功能,为深入探讨几丁质酶的免疫防御机制,本实验利用RACE技术克隆了三疣梭子蟹(Portunus trituberculatus)PtCht6基因。该基因cDNA全长2736bp,开放阅读框(ORF)2103bp,编码700个氨基酸,具有几丁质酶GH18家族典型特征。利用实时荧光定量技术分析PtCht6在三疣梭子蟹不同组织、不同蜕皮阶段、不同病原感染以及低盐胁迫(11)下的表达特征,结果显示:PtCht6在各组织中均有表达且在肝胰腺中的表达量最高;在不同蜕皮时期的肝胰腺中,其表达量由蜕皮后期(A/B)、蜕皮间期(C)、蜕皮前期(D)依次递减(P0.05);人工感染WSSV和副溶血弧菌后.PtCht6的表达量在肝胰腺中分别于12h、72h达到最大值,在血细胞中均于12h达到最大值,且相较于对照组,整体显著上调表达(P0.05);低盐胁迫能够显著抑制该基因的表达,最高抑制73倍(P0.05)。同时发现,低盐环境下感染WSSV后,该基因达到峰值的时间明显延迟(至少延迟12h.P0.05)。该研究结果预示PtCht6作为免疫因子参与三疣梭子蟹的病原防御,且低盐胁迫在一定程度上抑制了该基因的免疫功能。  相似文献   

产新琼四糖的海洋微泡菌属AG1热稳定性β-琼胶酶的过量表达与鉴定     

朱艳冰  高贺  李鹤宾  倪辉  姜泽东  李利君  肖安风 《海洋学报(英文版)》2019,38(2):96-106

从微泡菌属AG1（Microbulbifer sp. AG1）克隆得到1302 bp大小的琼胶酶基因，该基因编码产物为一个成熟蛋白（413个氨基酸残基）外加一个信号肽（20个残基）。将不含信号肽片段的琼胶酶在E. coli BL21 （DE3）中进行了异源表达和纯化。使用琼脂糖作为底物，该重组琼胶酶的最适反应温度和pH分别为60℃和7.5。该重组酶表现出优良的热稳定性，在50℃和60℃下处理1 h，重组琼胶酶仍能分别保持67%和19%的残余酶活力。除了SDS，重组琼胶酶对于其他测试的抑制剂、去垢剂和尿素变性剂有着较好的抗性。利用薄层色谱和以对硝基苯-α/β-D-吡喃半乳糖苷为底物的酶活力分析结果表明，该重组琼胶酶为β型琼胶酶，它水解琼脂糖的主要终产物为新琼四糖，而且不同聚合度的酶解产物具有抗氧化活性。  相似文献   

菲律宾蛤仔肉不同提取物呈味特性     

饶梦微  章超桦  林海生  曹文红  秦小明  郑惠娜  高加龙 《广东海洋大学学报》2022,(1)

【目的】系统评价菲律宾蛤仔(Ruditapes philippinarum)肉不同提取物的呈味物质含量和呈味特征差异。【方法】以新鲜菲律宾蛤仔肉为原材料,采用水煮和酶解的不同提取方式,制得两种冻干粉,比较分析两者游离氨基酸、呈味核苷酸、有机酸、有机碱和无机离子含量的差异,通过滋味活性值(Taste Activity Value,TAV)评价其对滋味的贡献,并结合感官评价法和电子舌检测法考察其整体呈味特征。【结果】感官评定结果表明,水煮提取物鲜味和甜味强于酶解提取物;鲜味、甜味和苦味是酶解提取物的重要味觉特征;电子舌主成分分析结果亦表明水煮提取物更接近谷氨酸钠的呈鲜特性。水煮和酶解提取物中游离氨基酸、呈味核苷酸、有机酸、有机碱和无机离子的含量均存在显著差异(P<0.05)。不同的呈味物质由于含量的差异及呈味组分间的相互作用导致水煮和酶解提取物的整体滋味存在差异。【结论】菲律宾蛤仔的呈味特性与其水溶性呈味物质密切相关,酶解提取物虽增加了氨基酸等的总体含量,但对鲜味、甜味的贡献不大。  相似文献   

江蓠原生质体分离和培养的初步研究   总被引：2，自引：0，他引：2  

初建松  张朝阳 《海洋通报》1998,17(6):17-20

以江蓠Ｇｒａｃｉｌａｒｉａｖｅｒｒｕｃｏｓａ（Ｈｕｄｓ．）Ｐａｐｅｎｆｕｓｓ为材料,用微生物发酵法提取的琼胶酶成功地分离到江蓠的原生质体,经初步培养,原生质体发育为愈伤组织,为江芳江生物工程研究和育苗利用提供了可能。  相似文献   

免疫多糖对中国对虾血清溶菌酶、磷酸酶和过氧化物酶的作用   总被引：101，自引：2，他引：99  

刘树青  江晓路  牟海津  王慧谧  管华诗 《海洋与湖沼》1999,30(3):278-283

于１９９７年９月在青岛红鸟养殖场采集中国对虾,给对虾腹腔注射不同剂量的海藻多糖和北虫草我糖后,用生化法测定其血清中的溶菌酶,碱性磷酸酶,酸性磷酸酶和过氧化物酶活性的动力学变化。结果表明,注射１．０％北虫草多糖及１．０％海藻多糖４８ｈ后,对虾血清中的ＬＳＺ活性由对照组的０．２５Ｕ／ｍｌ分别增至０．８８Ｕ／ｍｌ和０．７５Ｕ／ｍｌＰＯＤ活性由对照组的０．１１Ｕ／ｍｇ分别增至２．２Ｕ／ｍｇ和１．９６Ｕ／ｍ  相似文献   

Elmwood扩区深部密西西比河谷型锌矿体伴生的酶浸析异常     

Yeag.  JR 吴传芝 《国外地质勘探技术》1999,(2):8-15

目前,北美已开采或正开采的深部密西西比河谷型矿藏最初都是由钻探发现的。当这类盲矿存在于稳定地台的碳酸盐岩和页岩层序中时,传统的地球化学方法就无力检测出它们。“酶”浸析是一种选择性分析技术,为的是确定土壤中非晶质氧化锰吸收的微量元素。  相似文献   

以哈维氏弧菌(Vibrio harveyi)为重点的鱼类细菌病原的诊断与控制(英文)   总被引：2，自引：0，他引：2  

Ｂ．Ａｕｓｔｉｎ  Ｄ．Ａ．Ａｕｓｔｉｎ  Ｚ．Ｆａｒｈａｔ  Ｐ．Ａ．Ｗ．Ｒｏｂｅｒｔｓｏｎ 《中国海洋大学学报(自然科学版)》1999,(3)

作者对鱼类细菌病原的诊断与控制作了较全面的综述。细菌病原诊断技术包括酶联免疫吸附技术（ＥＬＩＳＡ）及蛋白印迹法（Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔｉｎｇ）。细菌病原控制技术包括化学疗剂的应用,有益微生物的应用,营养添加剂,β－葡萄糖苷增强免疫抗病力,及免疫保护作用等。  相似文献   

寡照复光试验中设施番茄叶片保护酶活性的变化          下载免费PDF全文

朱雨晴  薛晓萍 《海洋气象学报》2023,43(4):92-98

番茄是山东地区的主要设施作物之一,研究光照对设施番茄的影响程度,对山东地区的设施农业生产有重要意义。以无限生长型番茄“粉冠”为试材,在花果期于日光温室内设置3、6、9、12和15 d共5个遮阴日数处理,以日光温室内自然光为对照,研究在不同遮阴日数下,番茄叶片的保护酶活性和复光后叶片保护酶的恢复能力。结果表明：寡照会使番茄叶片的保护酶活性升高,比叶重减小;随着遮阴日数的增加,番茄叶片的保护酶和比叶重的恢复能力逐渐降低,遮阴时间过长（12 d以上）则会对叶片光合系统产生不可逆的损伤,使保护酶活性无法恢复。  相似文献   

离水停食胁迫对中华鳖(Trionyx sinensis)翻身能力、血清生化、裙边质构及脏器相关功能酶活力的影响     

郑嘉豪  申屠琰  徐英杰  李有志  朱卫东  王志铮 《海洋与湖沼》2023,54(6):1737-1745

中华鳖(Trionyx sinensis)历来有活品消费的习惯,离水停食是其批量销售环节必须承受的胁迫。因此,探究离水停食对其商品价值的影响过程与机制,对于明确其活体销售货架期具有重要指导价值和现实意义。以2020年5月20日同池起捕后离水停食处理0 d(S₀实验组)、4 d(S₄实验组)、8 d(S₈实验组)、12 d(S₁₂实验组)、16 d(S₁₆实验组)的雄性商品鳖[平均体质量(546.86±94.70) g]为研究对象,在常温条件下较系统开展了离水停食对其翻身能力、血清生化、裙边质构及脏器酶活力的影响研究。结果表明:(1)实验鳖连续翻身次数呈S₄≈S₈>S₀≈S₁₂≈S₁₆,且均主要集中于1 min内;(2)血清TP、ALB、TC、LDL-C均无组间差异(P>0.05),GLU-O呈S₀≈S₄≈S  相似文献   

广西茅尾海红树林土壤放线菌多样性及功能酶活性研究     

李菲  李喆  胡文进  黄庶识  刘泾泾  黄媛林  王巧贞  潘信利 《海洋学报》2021,43(2):88-97

研究广西茅尾海红树林自然保护区内红树林土壤中可培养放线菌的多样性,挖掘具有高产多种功能酶活性的放线菌类群。应用可培养技术和基于16S rRNA基因序列的系统发育分析研究红树林土壤中可培养放线菌的多样性;并以10种酶活底物为指示物,结合点植法和透明圈法对可培养的放线菌进行功能酶活性筛选。结果显示,从红树林土壤中共分离到444株放线菌,隶属于6目13科24属63种,其中3株放线菌为潜在新种。从63株不同种的放线菌中筛选出56株放线菌在至少1种功能酶活性检测中显示阳性,总阳性率为88.89%;其中具有2种以上功能酶活性的放线菌31株,链霉菌属、微杆菌属和短小杆菌属的产酶菌株最为丰富。综上所述,广西茅尾海红树林自然保护区内红树林土壤中可培养放线菌的种类丰富多样,潜藏着放线菌新资源,且功能酶活性显著,具有较大的挖掘潜力。  相似文献