合浦珠母贝碱性磷酸酶的分离纯化与性质研究   总被引：19，自引：0，他引：19  

谢莉萍  林静瑜  肖锐  张荣庆 《海洋科学》2000,24(10):37-40

以合浦珠母贝（Ｐｉｎｃｔａｄａ ｆｕｃａｔａ）为提取酶的原料,经Ｔｒｉｓ－ＨＣｌ缓冲液（ｐＨ７．５）抽提,正丁醇处理,硫酸铵分级沉淀分离,ＤＥＡＥ－纤维素离子交换树脂支析,ＤＥＡＥ－Ａ２５离子交换分子筛柱层析纯化,得到一定纯度的碱性磷酸酶,比活力达到１４４４Ｕ／ｍｇ。酶学性质和动力学性质研究表明,该酶催化对硝基苯磷酸（ｐＮＰＰ）的水解反应,最适ｐＨ值为９．７２,最适温度为４５℃,水解反应的活化能为  相似文献   

形态学和SNP标记分析马氏珠母贝杂交子代及其亲本群体的遗传结构     

黄景  潘肖兰  许濛  刘文广  张华  何毛贤 《热带海洋学报》2019,38(6):80-89

马氏珠母贝是重要的海水养殖贝类, 为了探究繁育亲本及其子代的遗传结构和关系, 本研究运用多元性形态学和SNP标记对马氏珠母贝母本深圳群体、父本海南群体和其杂交子代F1的外部形态和分子遗传结构进行分析。结果发现, 3个群体的综合判别率为72%, F1和母本群体的形态差异最小, 父本群体与母本、F1的形态差异较大。采用HRM法 (high resolution melting) 应用4个SNP位点对这3个群体进行分型, 3个群体的平均观测杂合度H_o和期望杂合度H_e分别为0.2110~0.2879和0.3317~0.4685, F1的杂合度高于两个亲本; 平均多态信息含量PIC值为0.2643~0.3556, 呈现中等程度遗传多样性。F1与母本之间的基因流N_m最大(7.7701), 遗传距离最小(0.0546), 亲缘关系最近; 两个亲本之间的N_m最小(1.9662), 遗传距离最大(0.1759)。rs8位点可以判别两个亲本群体, 可作为特异性的标记。该结果可以为马氏珠母贝群体遗传结构鉴别、育种群体管理提供指导。  相似文献   

合浦珠母贝iPS细胞相关的转录因子的克隆及分析     

张若云  徐广锐  潘聪  谢莉萍  王洪钟  张贵友  张荣庆 《海洋科学》2014,38(4):7-14

转录因子Sox2、Oct4、c-Myc和KLF4在iPS细胞研究中具有重要作用,将它们加入体外培养的细胞中,可以诱导体细胞去分化成为多能干细胞。作者通过RACE-PCR技术从合浦珠母贝(Pinctada fucata)的外套膜组织中克隆获得了3个转录因子——c-Myc、Sox2及KLF4的cDNA。c-Myc全长1585bp,开放阅读框的长度为1131bp,编码376个氨基酸,蛋白结构分析表明它具有保守的HLH和Myc-N结构域。Sox2全长1908bp,开放阅读框长度为990bp,编码329个氨基酸,蛋白结构分析它具有保守的HMG-box和Soxp结构域。KLF4全长2268bp,开放阅读框长624bp,编码207个氨基酸,预测该蛋白具有两个zf-H2C2_2结构域。BLAST分析它们均与太平洋牡蛎的相关蛋白具有较高同源性,说明其与太平洋牡蛎亲缘关系更近。RT-PCR实验发现这3个基因在合浦珠母贝外套膜、足、生殖腺、内脏团、闭壳肌和鳃6种组织中均有表达,表明它们是非常保守的转录因子。本研究对于合浦珠母贝细胞系建立和研究具有启发意义。  相似文献   

地塞米松和过氧化氢对合浦珠母贝珍珠层结构及基质蛋白表达的影响     

陈鹏  苏境坦  孔玮  王洪钟  张贵友  谢莉萍  张荣庆 《海洋科学》2014,38(11):7-15

分别用地塞米松(Dexamethasone,DEX)和过氧化氢(H2O2)处理合浦珠母贝(Pinctada fucata),研究其对贝珍珠层和基质蛋白表达的影响。扫描电镜观察显示,DEX可促进珍珠层生长,H2O2则抑制珍珠层生长。体外碳酸钙结晶实验表明,DEX处理组间液蛋白调控文石生成的趋势加强,并加速碳酸钙结晶速率;H2O2处理组相反。实时定量PCR实验显示,DEX处理组TGFβ和NF-кB信号通路关键因子pf-smad3、pf-rel等和基质蛋白Nacrein等基因表达水平明显降低,H2O2作用组则显著上升。由上述结果推测,DEX和H2O2可通过抑制或激活合浦珠母贝的TGFβ和NF-кB信号通路,从而调控与珍珠层形成相关的基质蛋白的表达,并影响珍珠层的结构;同时暗示贝的免疫体系和矿化系统可能存在协同作用,该作用机制具有生物进化学意义,并对养殖珍珠的培育具有借鉴作用。  相似文献   

盐度和pH对合浦珠母贝（Pinctada fucata）耗氧率和排氨率的影响   总被引：2，自引：0，他引：2  

刘建业  喻达辉  李金碧 《海洋与湖沼》2011,42(4):603-607

采用实验生态学方法,对3种规格的合浦珠母贝在不同盐度和pH下的耗氧率和排氨率进行了研究。结果表明,盐度对合浦珠母贝的耗氧率和排氨率有极显著影响（P〈0．01）。在盐度21—36的范围内,耗氧率和排氨率均随盐度的升高而降低,且单位体重耗氧率、排氨率随其个体的增大而变小;pH对合浦珠母贝的耗氧率有极显著影响（P〈0．01）...  相似文献   

In vivo and in vitro biomineralization in the presence of the inner-shell film of pearl oyster     

YAN Zhenguang  MENG Wei  LIU Zhengtao  YANG Suwen  LIU Xiaojun  SUN Juan  XIE Liping  ZHANG Rongqing 《海洋学报(英文版)》2011,30(1):87-93

The inner shell surface is the biomineralization site in shell formation and an inner-shell film covers it.This surface is composed of two regions:an outer calcitic region and an inner aragonitic region.In this study,some amalgamated calcite crystals were found in the calcitic region and some aragonitic "imprints" were found in the central part of the aragonitic region.The "imprints" are probably the trace of mantle cells that adhered to the inner shell surface when the shell was produced.Furthermore,to build a novel in vitro biomineralization system,the inner-shell film was detached from the shell and introduced to the calcitic crystallization solution.Crystallization experiments showed that nacre proteins could induce aragonite crystals in the novel system but inhibited calcite growth in the absence of the inner-shell film.These data suggested that the inner-shell film may induce aragonite growth in vivo by combining nacre proteins.  相似文献   

温度和盐度对马氏珠母贝精子激活率及活力的影响   总被引：1，自引：0，他引：1  

王辉  罗明明  朱晓闻  吕文刚  李艳红  王亚男  刘志刚 《海洋科学》2011,35(10):57-63

采用中心组合试验设计（CCD）和响应曲面法,在实验室条件下研究温度（T）、盐度（S）对马氏珠母贝（Pinctada martensii）精子激活率及活力的影响并建立了模型。实验设置的温度范围为15～45℃,盐度范围为12～48。结果表明,马氏珠母92精子激活率与活力随着温度、盐度的升高呈先升高后降低的趋势：盐度的一次效...  相似文献   

湛江北部湾马氏珠母贝红壳色选育系生长模型研究   总被引：1，自引：0，他引：1  

邬思荣  刘志刚  王辉 《广东海洋大学学报》2011,31(3)

为检验不同模型对马氏珠母贝红壳色选育系的生长发育拟合效果,分别采用von Bertalanffy、Gompertz、Logistic和Brody 4种非线性生长模型对红壳色选育系壳长、壳宽、壳高等形态性状和重量性状的生长发育进行拟合,通过Levenberg-Marquardt迭代法求出模型中各生长参数,结合各参数的最优值,得出拟合效果最佳的生长模型。结果表明,在马氏珠母贝红壳色选育系的第一年半生长过程中,Brody模型为壳长、壳宽与壳高的最优生长模型,von Bertalanffy模型为体重的最优生长模型,分别有效地拟合了马氏珠母贝红壳色选育系早期生长发育的累积生长曲线。  相似文献   

引进印度尼西亚大珠母贝人工育苗试验   总被引：2，自引：0，他引：2  

谢绍河  梁飞龙  符韶 《广东海洋大学学报》2011,(4)

在雷州半岛海域水温24.0～30.0℃、盐度30.8～32.5、pH8.0～8.3条件下,以牟氏角毛藻,亚心形扁藻,牟氏角毛藻、亚心形扁藻和小球藻,天然混合藻等4种饵料,进行印度尼西亚产大珠母贝亲贝促熟培育试验。结果表明:不同饵料组合在亲贝促熟百分率、排精产卵率和受精率之间差异不显著(P>0.05);阴干温差流水刺激可以有效诱导亲贝排精产卵,优选幼虫和投放合适的采苗器可以提高幼虫的变态率。  相似文献   

马氏珠母贝育珠术前处理和术后休养期软体部生化组成的变化     

王庆恒杜晓东  邓岳文罗戈 岑永安 《广东海洋大学学报》2007,27(6):27-30

以2龄马氏珠母贝为材料，建立S1（对照组）、S2（术前处理后不插核）、S3（术前处理后插核）和s4（不做术前处理直接插核）四个试验组，每组500个个体。比较研究了术前处理和休养期间各组软体部干重和糖、脂肪、蛋白质含量的差异。试验结果如下：（1）术前处理后，S2和S3组软体部干重显著小于S1组（P〈0．05）；S2组短期休养后恢复到S1组水平：S3组在休养期结束后仍然显著小于S1组（P〈0．05）。（2）插核后，S4组软体部干重显著小于S1组（p〈0．05）；休养20天后恢复到S1组水平；（3）术前处理后，S2和S3组的软体部糖、脂肪含量明显下降。（4）插核后，S4组的软体部糖、脂肪含量明显下降。（5）试验期间，各组蛋白质含量总体呈上升趋势。结果表明术前处理能够有效降低育珠贝的生理活性：术前处理的马氏珠母贝表现出补偿生长效应，并在营养限制或创伤后的恢复过程中，首先利用体内储存的糖原和脂肪。  相似文献