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11.
12.
6种海洋致病性弧菌36kDa外膜蛋白特性分析   总被引:3,自引:0,他引:3  
研究本着筛选和制备弧菌共同外膜蛋白亚单位疫苗,用十二烷基肌氨酸钠抽提并结合超速离心的方法提取了鳗弧菌(Vibrio anguillarum)、鱼肠道弧菌(V.ichthyoenteri)、溶藻弧菌(V.alginolyticus)、副溶血弧菌(V.parahaemolyticus)、哈维氏弧菌(V.harveyi)和创伤弧菌(V.vulnificus)6种海洋致病性弧菌的主要外膜蛋白, SDS-PAGE图谱比较发现这6种弧菌都存在36 kDa的外膜蛋白条带.通过电泳洗脱分离纯化这6种弧菌的36 kDa外膜蛋白,并制备了鳗弧菌菌株SJ060621的36 kDa外膜蛋白多抗.ELISA和Western-blot印迹结果显示,仅鳗弧菌SJ060621、S010610-1和哈维氏弧菌的36 kDa外膜蛋白存在免疫交叉反应;双向电泳分析了鳗弧菌SJ060621、S010610-1、哈维氏弧菌和溶藻弧菌的36 kDa外膜蛋白,2-DE图谱显示出鳗弧菌SJ060621和S010610-1均由3种等电点相近的蛋白组成,存在很高的同源性,2株鳗弧菌与溶藻弧菌和哈维氏弧菌在蛋白质组成数量和等电点上都存在较大的差异,结果说明通过主要外膜蛋白的分子量和免疫特性研究,可为筛选不同弧菌共同外膜蛋白的亚单位疫苗提供有利参考.  相似文献   
13.
米氏凯伦藻(Karenia mikimotoi)近年在我国福建、浙江和广东沿海经常形成赤潮,其赤潮不仅影响到海洋生态系统的稳定,也严重威胁到水产养殖以及人类生命健康安全。本论文以米氏凯伦藻为研究对象,建立了米氏凯伦藻细胞表面膜蛋白质荧光标记技术和细胞膜蛋白质提取方法,运用荧光差异凝胶电泳技术(2-DDIGE)对膜蛋白质进行了分析,并研究了米氏凯伦藻的膜蛋白质组及其对环境温度变动的响应。实验共鉴定到44个细胞表面膜蛋白,其中有效注释27个,主要为转运蛋白、HSP70蛋白家族和捕光蛋白等。米氏凯伦藻在20°C条件下的细胞生长和光合作用要明显好于16°C和12°C,但16°C和12°C条件下的差别不大,表明低温限制了米氏凯伦藻的生长。当米氏凯伦藻从12°C快速转移至16°C和20°C时,藻细胞密度和光合作用效率短时间迅速降低,但细胞很快即适应温度变化。细胞膜上的转运蛋白和光合作用蛋白在其适应温度变化中起着重要作用。  相似文献   
14.
15.
三种碳源对乌梁素海好氧不产氧光合细菌群落结构的影响   总被引:3,自引:1,他引:2  
好氧不产氧光合细菌(AAPB)营光合异养,在水体碳循环中起着重要作用.但是,碳源对AAPB群落结构的影响尚不明确.本文基于16S rDNA和光合反应中心合成中的关键基因——pufM基因,运用变性梯度凝胶电泳(DGGE)技术,比较分析了在微生物分离培养中常用的3种碳源(葡萄糖、丙酮酸钠、酵母提取物)对乌梁素海水体总细菌及AAPB群落结构的影响.结果表明,不同碳源诱导7~21 d后,水体总细菌群落丰富度及多样性指数均有不同程度的提升,AAPB群落则呈现先升后降的趋势.3种碳源中,丙酮酸钠添加后对总细菌及AAPB菌群的丰富度和多样性的提升效果最好.测序及系统发育结果表明,乌梁素海水体经诱导后新检测到了一些原环境中未发现的菌属,一些具有特殊碳代谢能力的菌属丰度得到了提升.本研究为充分认识和理解AAPB的生态学作用和意义,及其富集、分离和培养提供了基础依据.  相似文献   
16.
提要 利用非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳法,对虹鳟、溪红点鲑及杂交种(虹鳟♀溪红点鲑♂)的进行了血液蛋白多态性研究, 计算了各座位的基因频率、基因纯合度和Shannon 信息指数, 并探讨了群体间的亲缘关系和遗传距离。结果表明: ( 1) 3个种群在α球蛋白、β1球蛋白、γ-球蛋白、前白蛋白和白蛋白5个座位上的遗传差异较大, 血清蛋白座位的优势基因在不同群体中有不同的频率; ( 2) 杂交种中出现部分双亲特异条带,表明杂交种整合了虹鳟♀ 和溪红点鲑♂的遗传信息,属两性融合生殖, 是真正意义上的杂交种。( 3) 杂交种与虹鳟和溪红点鲑的遗传相似性系数分别为0.718和0.575, 遗传距离分别为0.332和0.554, 表明杂交种与两亲本的遗传差异不是对等的, 而是偏向母本一方, U PGMA 系统树也同样证明了这一点。  相似文献   
17.
采用比较蛋白质组学的方法,对2011年10月20日取自辽宁省普兰店室内养殖厂腐皮综合症刺参和健康个体肠组织中差异表达蛋白进行了研究。结果表明,在优化的电泳条件(80μg脱盐蛋白、pH4—7[NL,13cm]的IPG预制胶条)下,共检测到约700个蛋白质点;表达量差异两倍以上的蛋白点51个,最大表达差异比率为4.32;对其中重复性一致的30个差异点进行质谱鉴定,成功鉴定了23个差异蛋白,包括铁蛋白,过氧化氢酶,泛素相关修饰子3,细胞色素氧化酶和肌动蛋白等;进一步扫描实验室完成的刺参转录组数据,筛选了过氧化氢酶和泛素相关修饰子3的EST序列。本研究是蛋白层面上刺参腐皮综合症发生机制的有效尝试,研究结果为进一步认识该疾病的发生机制提供了参考。  相似文献   
18.
The intestinal bacteria of vertebrates form a close relationship with their host.External and internal conditions of the host,including its habitat,affect the intestinal bacterial community.Similarly,the intestinal bacterial community can,in turn,influence the host,particularly with respect to disease resistance.We compared the intestinal bacterial communities of grass carp that were collected from farm-ponds or a lake.We conducted denaturing gradient gel electrophoresis of amplified 16S rRNA genes,from which 66 different operational taxonomic units were identified.Using both the unweighted pair-group method with arithmetic means clustering and principal component analysis ordination,we found that the intestinal bacterial communities from the two groups of pond fish were clustered together and inset into the clusters of wild fish,except for DF-7,and there was no significant correlation between genetic diversity of grass carp and their intestinal bacterial communities(Mantel one-tailed test,R=0.157,P=0.175).Cetobacterium appeared more frequently in the intestine of grass carp collected from pond.A more thorough understanding of the role played by intestinal microbiota on fish health would be of considerable benefit to the aquaculture industry.  相似文献   
19.
Spatial (10 different locations) and temporal (2 years) changes in characteristics of the Marmara Sea Sediments were monitored to determine interactions between the chemical and microbial diversity. The sediments were rich in terms of hydrocarbon, nitrate, Ni and microbial cell content. Denitrifying, sulfate reducing, fermentative and methanogenic organisms were co-abundant in 15 cm below the sea floor. The local variations in the sediments’ characteristics were more distinctive than the temporal ones. The sulfate and nitrate contents were the main drivers of the changes in the microbial community compositions. N and P were limited for microbial growth in the sediments, and their levels determined the total cell abundance and activity. Seasonal shifts in temperatures of the shallow sediments were also reflected in the active cell abundances. It was concluded that the Marmara Sea is a promising ecosystem for the further investigation of the ecologically important microbial processes.  相似文献   
20.
Sublimation was developed by Alley and Brown (2000) in order to isolate bacterial strains that were capable of degrading water insoluble compounds. In this study, sublimation was modified by the use of nutritional agar plates, instead of mineral salt agar, to isolate phenanthrene-degrading bacteria from a mixed culture that had been enriched under the selective pressure of high phenanthrene content. Five strains were obtained with different morphology and degradation ability. Based on the 16S rDNA sequence, two of them were classified as species of the genus Sphingomonas; the others as species of the genus Burkholderia. Denaturing gradient gel electrophoresis (DGGE) was introduced to detect dynamic changes in the bacterial community during enrichment batch culture, and to determine any correlation between the five isolates and the phenanthrene-degrading consortium. The DGGE profile indicated that these five isolates corresponded to four dominant bands of the consortium. Compared to traditional means of isolation, we concluded that modified sublimation is effective and more convenient.  相似文献   
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