缢蛏(Sinonovacula constricta)耐氨氮关联SNP验证及相关基因NKA在氨氮胁迫下的表达特征分析     

胡晨馨  吕丽媛  孙改改  姚韩韩  林志华  董迎辉 《海洋与湖沼》2023,54(5):1413-1423

为筛查和验证缢蛏(Sinonovacula constricta)耐氨氮相关单核苷酸多态性(SNP)和基因, 为分子标记辅助育种提供参考, 通过竞争性等位基因特异性PCR (KASP)对位于缢蛏NKA基因(Sc-NKA)下游的SNP (g.21062868T＞A)进行验证, 采用实时荧光定量PCR (qRT-PCR)和蛋白免疫印迹(WB)检测高氨氮胁迫下Sc-NKA基因的表达水平, 用免疫荧光技术对Sc-NKA蛋白进行组织细胞定位, 通过RNA干扰探究Sc-NKA基因在氨氮排泄中的作用。结果显示, SNP位点(g.21062868T＞A)与氨氮耐受性状显著相关(P＜0.05); Sc-NKA基因在氨氮胁迫后的mRNA和蛋白表达量均显著增加(P＜0.05); 缢蛏鳃中的柱状细胞和扁平细胞是Sc-NKA蛋白分泌的主要部位, 且在氨氮胁迫后细胞中的蛋白丰度增加; 干扰Sc-NKA基因6~48 h后, 缢蛏血淋巴中氨含量显著升高(P＜0.05),且Na⁺-K⁺-2Cl共转运蛋白1 (NKCC1)的mRNA表达水平显著降低(P＜0.05)。这些研究结果表明, Sc-NKA参与氨氮的排泄过程, 且与NKCC1在氨氮转运中具有协同作用。  相似文献   

西安建筑科技大学数字校园设计与实现     

冯晓刚  唐冬梅 《地理空间信息》2010,8(4):101-104

在综述数字校园建设的基础上,针对组成西安建筑科技大学"数字校园"系统的构建目标,提出了组成校园地理信息系统的构建体系,并就组成校园地理信息系统的系统功能、数据组织、可视化表现等进行了详细论述,结合面向对象的编程环境Visual Basic6.0,最终实现了西安建筑科技大学校园地理信息原型系统的设计与开发,为更进一步构建"数字建大"提供参考。  相似文献   

Hydrolysis Activities of the Particle of Agarose-Ce4 + Complex for Compounds Containing Phosphodiester or Peptide Bonds   总被引：1，自引：0，他引：1  

YU Lina  WANG Dongfeng*  SU Lin  LUO Yi  SUN Liping  and XUE ChanghuCollege of Food Science  Engineering  Ocean University of China  Qingdao  P. R. China 《中国海洋大学学报(英文版)》2005,4(3)

1 IntroductionRare earth elements (REE) have smaller ion radii,higher electric charge and ion potential energy thanother transitional elements; REE are excellent Louisacid, because they can provide twelve positive chargesto other compounds. Under the nearly neutral condi-tion, REE can form a great deal of steady gelatinousREE deposit so as to reduce the solvency of REE. Inrecent years, many scholars have studied REE com-plexes, such as the complexes of REE and amino acidor its ramific…  相似文献   

Effects of Dietary Protein Level on Growth and Utilization of Protein and Energy by Juvenile Mangrove Red Snapper (Lutjanus argentimaculatus )   总被引：1，自引：1，他引：0  

Ghulam Abbas  Khalid Jamil  Rukhsana Akhtar 《中国海洋大学学报(英文版)》2005,4(1)

1Introduction The mangrove red snapper,Lutjanus argentimacu-latus(Forsskal,1775)is a carnivorous,warm-watereuryhaline fish that is considerably cultured in South-east Asia,Southern China and the Middle East(Le-ung et al.,1999;Estudillo et at.,2000;Ng et al.,2000;Catacutan et al.,2001).In Pakistan,it isknown for its good quality meat and also for its highconsumption rate.Although it fetches a premiumprice at local markets(Anonymous,2002),the in-creasing demand has generated interest towar…  相似文献   

盐度和蛋白质水平对凡纳滨对虾存活、生长和能量转换的影响   总被引：18，自引：2，他引：16  

王兴强  马甡  董双林 《中国海洋大学学报(自然科学版)》2005,35(1):33-37

探讨不同盐度条件下饲料中蛋白质水平的变化对凡纳滨对虾存活、生长和能量转换的影响。实验周期6周。结果表明：在0、5盐度下,随蛋白质水平的提高,凡纳滨对虾存活率呈下降趋势;盐度增加至8以上后对虾可正常生活;在26．59％,35．18％和45.31％3个蛋白质水平,凡纳滨对虾特定生长率、摄食量、总转换效率和净转换效率均以8和16盐度组最高;随盐度的升高或降低,对虾特定生长率、摄食量、总转换效率和净转换效率均呈下降趋势;但在0、5盐度下,摄食3个蛋白质水平对虾的特定生长率组间差异不显著;在8～25盐度下,摄食35．18％和45．31％蛋白质水平的对虾的特定生长率、总转换效率和净转换效率组间差异不显著,但显著高于其它处理。  相似文献   

魁蚶(Scapharca broughtonii)热休克蛋白90(HSP90)基因的克隆及转录表达分析     

郑利兵  刘志鸿  吴彪  周丽青  孙秀俊  杨爱国  田吉腾  董迎辉 《海洋与湖沼》2018,49(1):124-133

热休克蛋白90(HSP90)作为一种研究的常规免疫基因,在许多物种都有过报道。本研究从构建的魁蚶转录组文库中筛选得到的HSP90基因部分序列为基础,通过RACE技术获得其c DNA全长序列(命名为Sb HSP90),以期明确魁蚶HSP90基因的结构特征、组织分布及其对病原菌刺激的免疫变化规律。序列和结构分析表明,该c DNA全长2707bp,编码一个由728个氨基酸组成的多肽,该多肽含有HSP90家族共有的5个签名序列,C端高度保守的MEEVD短肽序列和ATPase结构域;预测蛋白的分子量(Mw)为83.72k Da,理论等电点(p I)为4.85;预测该蛋白无信号肽,具有4个糖基化位点。同源性及系统分析表明,Sb HSP90基因与软体动物的HSP90相似性达到83%以上,其中与长牡蛎(Crassostrea gigas)和海湾扇贝(Argopecten irradians)相似度最高达86%,与甲壳动物HSP90的相似度都在81%左右,与脊椎动物HSP90-α和HSP90-β的同源性都很接近。实时荧光定量PCR(q RT-PCR)结果表明:Sb HSP90 m RNA在魁蚶血细胞、斧足、鳃、外套膜、闭壳肌和肝胰腺和中均有表达,斧足中的表达量相对较高,而在肝胰腺中的表达量则相对较低;注射鳗弧菌后,相对于对照组,Sb HSP90基因在所检测的每个组织中m RNA水平上的表达量都显著上调(P0.01),而且具有显著的时间依赖性和瞬时表达趋势。  相似文献   

免疫增强剂紫锥菊(Echinacea purpurea)提取物对大菱鲆(Scophthalmus maximus)头肾内非特异性免疫基因表达量的影响     

秦志华  潘柳婷  董文宾  单虎 《海洋与湖沼》2018,49(2):340-345

通过给大菱鲆(Scophthalmus maximus)注射不同浓度的紫锥菊(Echinacea purpurea)提取物,测定其非特异性免疫指标的变化水平,研究其对大菱鲆的头肾内非特异性免疫分子基因相对表达量的影响,进而为其在大菱鲆养殖生产过程中推广应用提供科学依据。试验选取体重(250±20)g的大菱鲆作为试验动物,分别注射10、20、40mg/m L浓度的紫锥菊提取物,试验共进行28d,注射试验结束后,分别从高、中、低剂量组及空白对照组选出6尾大菱鲆,分别取出大菱鲆的头肾并提取总RNA。采用?Ct法进行目标基因的荧光定量分析,再应用SPSS17.0软件对获得的实验数据进行单因素方差分析。研究结果表明,紫锥菊提取物能够不同程度地提高大菱鲆头肾内非特异性免疫分子基因相对表达量。注射紫锥菊提取物28d后对大菱鲆头肾中Lysozyme基因相对表达量的影响显著(P0.05),对C3补体基因相对表达量的影响极显著(P0.01),对Transferrin基因相对表达量的影响显著(P0.05),对TGF-β1基因相对表达量的影响极显著(P0.01),对IL-1h基因相对表达量的影响极显著(P0.01),本试验研究表明,紫锥菊提取物能够显著提高大菱鲆头肾内非特异性免疫分子基因的相对表达量。  相似文献   

松江鲈肌酸激酶的基因克隆、表达与功能分析     

刘莹莹  陈学昭  于珊珊  柴迎梅  林啸鹏  祝茜 《海洋学报》2018,40(12):21-30

前期蛋白质质谱分析发现,松江鲈（Trachidermus fasciatus Heckel）经鳗弧菌（Vibrio anguillarum）刺激后,其皮肤黏液中的肌酸激酶（creatine kinase,CK）的表达明显上调。目前,肌酸激酶在鱼类中的功能研究尚未深入开展。本文利用RACE技术克隆获得了松江鲈CK基因的全长cDNA序列（命名为TfM-CK）。TfM-CK基因的cDNA全长为1 474 bp,开放阅读框为1 146 bp,编码381个氨基酸。序列比对分析显示,TfM-CK序列高度保守。实时荧光定量PCR显示,TfM-CK mRNA广泛表达于松江鲈各组织,在肌肉中的相对表达量最高,其次为血液。鳗弧菌刺激后,TfM-CK mRNA在肌肉、皮肤、脾脏和头肾中均上调表达。其中,脾脏中的表达量高达对照组的900多倍。原核重组表达纯化的TfM-CK （rTfM-CK）蛋白酶活测定实验结果显示,重组蛋白的酶活为22.0 U/mg。rTfM-CK对鳗弧菌、大肠杆菌（Escherichia coli）、巨大芽孢杆菌（Bacillus megaterium）和金黄色葡萄球菌（Staphylococcus aureus）有较强的凝集作用。由以上实验结果推测,TfM-CK可能通过细菌凝集作用参与到了松江鲈抵抗病原菌的先天免疫防御过程中。本研究为认识鱼类肌酸激酶的功能及其在病原菌防御过程中的分子免疫机制机制提供了参考。  相似文献   

海洋无脊椎动物抗氧化酶研究进展   总被引：1，自引：0，他引：1  

李亚男  张海滨 《海洋通报》2018,(3):241-253

海洋无脊椎动物是重要的经济水产生物和海洋生态系统的主要组成者。抗氧化酶系统在其环境适应性以及非特异性免疫中发挥着重要作用。本文从海洋无脊椎动物主要抗氧化酶类的种类、结构、环境适应性、酶学、基因和蛋白研究等几个方面进行综述并对今后海洋无脊椎动物抗氧化酶的相关研究提出展望。  相似文献   

Molecular cloning and expression analysis of Crustin-like gene from Chinese shrimp Fenneropenaeus chinensis     

LIU Fengsong  LI Fuhu  XIANG Jianhai  DONG Bo  LIU Yichen  ZHANG Xiaojun  ZHANG Liusuo 《海洋学报(英文版)》2008,27(2):81-92

A new member of antimicrobial protein genes of the Crustin family was cloned from haemocytes of the Chinese shrimp Fennero- penaeus chinensis by 3 ′and 5′ RACE. The full-length cDNA of Crustin-like gene contains a 390 bp open reading frame, encoding 130 amino acids. The deduced peptide contains a putative signal peptide of 17 amino acids and mature peptide of 113 amino acids. The molecular mass of the deduced mature peptide is 12. 3 ku. It is highly cationic with a theoretical isoelectric point of 8.5. The deduced amino acids sequence of this Crustin showed high homology with those of Penaeus （ Litopenaeus ） setferus. Northern blotting showed that the cloned Crustin gene was mainly expressed in haemocytes, gill, intestine, and RNA in situ hybridization indicated that the Crustin gene was constitutively expressed exclusively in haemocytes of these tissues. Capillary elec- trophoresis RT-PCR analysis showed that Crustin was up-regulated dramatically from 12 to 48 h after a brief decrease of mRNA during first 6 h in response to microbe infection. The level of Crustin mRNA began to restore at 72 h post-challenge. This indicated that Crustin gene might play an important role when shrimps are infected by bacterial pathogen.  相似文献