鉴定海参的斑点杂交法及其应用     

律迎春  段高飞  左涛  徐洁  李晋  郑荣  唐庆娟  薛长湖 《中国海洋大学学报(自然科学版)》2012,(11):62-65

本研究目的是通过斑点杂交方法对不同种类的海参进行快速准确的鉴定。采用CTAB沉淀法提取海参的DNA,PCR扩增线粒体COⅠ基因并测序,利用Primer premier 5.0软件设计并筛选了仿刺参(Apostichopus japonicus)、北大西洋瓜参(Cucumaria frondosa)、加州红参(Parastichopus californicus)及梅花参(Thelenota ananas)4种海参的特异性探针,设计并进行斑点杂交实验。实验结果显示:4条探针均具有高度的特异性,灵敏度可达100pg,能够实现对仿刺参、北大西洋瓜参、加州红参和梅花参的准确鉴定。本文建立的斑点杂交方法,为海参品种的快速、准确的鉴定提供了可靠的技术方法。  相似文献   

核酸斑点杂交分析法检测对虾皮下及造血组织坏死杆状病毒(HHNBV)   总被引：25，自引：1，他引：24  

史成银  宋晓玲  黄倢  杨丛海 《海洋与湖沼》1999,30(5):486-490

于１９９５年７月在青岛晨阳对虾养殖场采集患当性流行病的中国对虾样品,提纯ＨＨＮＢＶ并研制了一组地高辛标记的ＨＨＮＢＶ核酸探针。采用核酸斑点杂交方法了此组核酸探针的灵敏度和特异性。结果表明,此组探针检测ＨＨＮＢＶＤＮＡ的灵敏度为６２．５ｐｇ,对４６９ｎｇ病虾胃中的病毒可以检出;此组探针与３．７５μｇ健康对虾组织和２ｎｇ健康对虾ＤＮＡ均无交叉反应,１９９７年,应用此组特异性核酸探针检测了发病虾池对虾及  相似文献   

虾池中桡足类及其休眠卵携带对虾白斑综合症病毒的初步调查研究   总被引：2，自引：0，他引：2  

张家松  董双林  董云伟  闫冬春  田相利  刘相义 《中国海洋大学学报(自然科学版)》2007,37(3):405-408,412

探讨对虾白斑综合症(White Spot Syndrome WSS)与虾池中桡足类之间的关系,于2003年5~10月份,在暴发过对虾白斑综合症的池塘中采集桡足类样品共128个,并从冬季底泥样品分离出桡足类休眠卵样品20个,以及此种休眠卵孵化得来的桡足类幼体样品5个。利用PCR斑点杂交法以及巢式PCR法检测样品中对虾白斑综合症病毒(White Spot Syndrome Virus WSSV)携带情况。结果表明,5~10月份桡足类样品中均能检测到阳性样品,总的阳性率为56.3%;其中,5月份样品阳性率为37.5%,6,8,9,10月份各取样1次,每次样品中的阳性率均在60%以上。在20例桡足类休眠卵样品中有1例为阳性,阳性率为5%;并且实验室中孵化此种休眠卵得来的桡足类幼体样品中检测到阳性,阳性率为40%。本研究初步表明,桡足类是WSSV的携带者或传播媒介之一,且冬季池塘底泥中携带WSSV的桡足类休眠卵可萌发出带病毒的桡足类。  相似文献   

建立白斑综合症病毒在日本对虾体内潜伏性感染的方法研究   总被引：3，自引：0，他引：3  

刘波  俞志明 《海洋科学》2003,27(8):72-76

在27℃，pH8．0，盐度33条件下，用套式PCR方法和王证点杂交方法对日本对虾(Penaeus japonicus)体内潜伏性感染WSSV的方法进行了研究。对健康日本对虾注射不同稀释倍数的白斑综合症病毒粗提液，死亡率统计显示注射10^4，10^6倍稀释液组的日本对虾死亡率明显低于10，10^2，10^3倍组，结合套式PCR方法和斑点杂交方法进行病毒检测结果发现，仅10，10^2倍稀释液组斑点杂交和一步PCR结果呈阳性；10^3，10^4，10^6倍稀释液组经二步PCR检测为阳性、斑点杂交呈阴性，该结果为建立或界定WSSV在日本对虾体内的潜伏性感染提供了方法学上的依据。  相似文献